殷萌1付加伦1罗妙玲2
（1新疆博尔塔拉蒙古自治州人民医院感染科新疆博乐833400;
2新疆博尔塔拉蒙古自治州人民医院检验科新疆博乐833400）
【中图分类号】R331【文献标识码】B【文章编号】1003-5028(2013)10-0314-01
血液中的细胞因子表达水平与HCV感染和免疫息息相关，对HCV感染的病程发展以及治疗效果预测具有重要意义。本文主要研究慢性HCV感染引起的HCC患者，以及接受标准治疗患者的血液白介素6水平。
1资料与方法
1.1一般资料：选用HCV慢性感染者20例，其中男15例，女5例；平均年龄37岁，HCV引起的HCC患者19例，平均年龄46岁，其中男13例，女6例；接受标准治疗的HCV感染者共50例，平均年龄41岁，其中发生持续病毒学应答（SVR）的患者28例，未发生SVR的患者22例。正常未感染者12人，平均年龄35岁，其中男9例，女3例。临床及病理学诊断根据2000年西安第十次全国病毒性肝炎会议修订的病毒性肝炎防治方案。
1.2检测方法：采用Elisa法检测白介素6表达水平。定量检测白介素6酶联免疫试剂盒购自于Abcam公司。
按照试剂盒操作手册操作。十倍稀释200pg/ml的标准品，配制标准曲线；在微孔板中加入100μl样品，标品或者对照。然后每孔分别加入50μl生物素标记的白介素6抗体，封上孔板，常温孵育一小时；去除孔板中的液体，每孔分别加入300μl洗液，静置30秒，去除洗液，重复洗板2次；每孔分别加入100μl HRP溶液，封板，室温孵育30分钟；再次洗板3次；每孔分别加入100μl TMB溶液，常温孵育15分钟；每孔分别加入100μl反应终止液终止反应；在酶标仪上以450nm读取OD值，630nm作为参照波长。
2结果
白介素6在HCV感染者和HCV相关HCC患者血液中的表达：
图1HCV感染者和HCV相关HCC患者血液中IL6表达水平
由图1可见，相对于正常人群，HCV慢性感染者和HCV相关的HCC患者的血液白介素6表达水平显著升高，分别为245±29pg/ml和352±40pg/ml。而相对HCV慢性感染者，HCV相关的HCC患者具有明显更高的血液白介素6表达水平(P＜005)。
白介素6在HCV标准治疗产生持续病毒学应答（SVR）人群和未产生SVR人群中的表达：
图2产生持续病毒学应答（SVR）人群和未产生SVR人群中血液IL6的表达水平
由图2可见，产生SVR的人群相对于未产生SVR的人群在治疗之初具有更高的白介素6表达水平，分别为375±29pg/ml和284±30pg/ml，P＜005。
3讨论
当病毒感染肝细胞时，肝脏内的免疫细胞kupffer细胞识别病毒感染，并且激活kupffer细胞内的NFκB通路，使得kupffer细胞分泌白介素6。通过旁分泌途径，白介素6刺激肝脏实质细胞，激发肝实质细胞的炎症反应，从而达到清除肝实质细胞内的病毒。所以，使用白介素6抑制药物的人群，具有较高的风险感染HCV。
白介素6是一种多效细胞因子，并且在抗病毒免疫反应中起到了重要作用。白介素6能通过与细胞受体gp130形成异二聚体，激活细胞内STAT3蛋白。同时，白介素6能够通过IL-6-gp130-STAT3保护肝细胞免受T细胞介导的肝损伤［1］。但是，白介素6能够持续地激活肝细胞炎症反应，并导致肝损伤［2］。
我们发现血液白介素6浓度与HCV感染病程发展具有正相关性。而更高的白介素6表达具有更高的产生SVR的概率。白介素6能够通过激活肝实质细胞内的MAPK通路［3］，调控抑制肝细胞内的HNF4α的表达，进而能够控制肝细胞内的HNF1家族蛋白的表达［4］。而HNF4α和HNF1家族蛋白被认为对于HCV的复制是十分重要的，抑制这两个蛋白在肝实质细胞中的表达，就能够起到抑制HCV在细胞内复制的功能［5］。因此，在HCV感染治疗前，检测白介素6表达水平，可以对联合治疗的效果进行评估，从而采取个性化的治疗方案。
反过来，慢性HCV感染能够造成血液白介素6水平的显著提高，而更高的白介素6水平提示了HCC发生的可能。标准的联合治疗能够有效地降低血液白介素6水平，这可以降低HCV感染造成的HCC。白介素6能够激活肝实质细胞内的ERK通路，而持续的激活ERK通路被认为能够导致细胞不断的生长与增殖，从而导致HCC的发生［6,7］。同时，白介素6还能够激活肝细胞中的PKC通路。研究表明，在HCV相关的HCC患者的肝脏组织中，PKC的表达是要高于非癌症组织的［8］。这提示了在HCV相关的HCC患者的肝细胞中，PKC的表达与HCC有关。PKC调控着一些列与癌细胞增殖，转移，浸润相关的基因，如cyclin D1，p53，p21，MMP-1，u-PA，u-PAR，以及FAK等［9］。因此，肝细胞长时间处于白介素6的刺激下，使得肝细胞癌化的风险提高。在慢性HCV感染者的病程中，降低血液白介素6的表达水平可以有效地保护肝脏组织。
总之，血液白介素6水平随着HCV感染的病程逐步提高，预示了较高的血液白介素6水平会增加HCC的风险。同时，在HCV感染后，较高水平的白介素6表达却更容易获得病毒学应答SVR。因此，在HCV感染的不同时期，监控，调节血液白介素6的水平，能够提高HCV感染者的联合治疗效果，同时也能在随后的病程发展中，控制HCC的发生。
参考文献
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论文作者:殷萌1付加伦1罗妙玲
论文发表刊物:《河南中医》2013年10月第2期供稿
论文发表时间:2014-3-19
标签：白介素论文; 水平论文; 血液论文; 患者论文; 感染者论文; 肝细胞论文; 细胞论文; 《河南中医》2013年10月第2期供稿论文;