耿会欣
（河北省唐山市妇幼保健院妇科 河北 唐山 063000）
【摘 要】目的：观察miR-129-1-3p于注浆液卵巢组织和普通输卵管散端组织内的表述，同时研究miR-129-1-3p和卵巢浆液上皮癌临床病例特征关系。方法：使用实时荧光定量聚合酶链的反应定力对200例浆液性卵巢上皮癌组织和100例普通输卵管伞端的组织内miR-129-1-3P实施表达，同时把最终的检测结果和临床与病理特征资料实施统计学的分析。结果：浆液性的卵巢癌组织内的miR-129-1-3p其所呈现出来的表达量要明显比普通输卵管伞端组织的更低。miR-129-1-3p的表达和FIGO分期、病例的分化程度、血清CA125以及病人年龄等没有统计学差异，即P＞0.05。结论：miR-129-1-3p可能是现阶段有效抑制癌因子实施参与卵巢上皮性癌的出现，在一定程度上说对卵巢的上皮性癌有一定的辅助和诊断的效果，这样就为有效寻找卵巢上皮性癌生物靶向治疗有效的提供了相关依据。
【关键词】miR-129-1-3p；浆液性卵巢；分析
【中图分类号】R737. 31 【文献标识码】B 【文章编号】1003-5028（2015）8-0715-02
卵巢癌的病理类型相对较为复杂，其上皮性癌占据绝大多数，涵盖浆液性癌以及粘液性癌和子宫内膜样癌此几种类型，在这几种病理中，浆液性的卵巢癌是最主要的。该病理具有早期癌症的隐匿、很容易转移与广泛播散生物学行为，超过三分之二的病人在就诊时发现癌细胞已经扩散，正常情况下五年的生存率仅仅为30％。近些年通过临床学者研究表明miRNA可以有效的调节控制部分致癌基因与抑制癌基因表达而最终对细胞的增值造成影响。分析显示，miRNA表达谱表明在多个肿瘤组织中均可能直接有miRNA表达失调，所以可以直接推断此类失调的表达和肿瘤出现发展之间的关系。研究表明miR-129-1-3p于肝癌以及胃癌出现或者发展中有着十分重要的调解控制效果，不过在卵巢上皮性的癌症中其作用的机制还不是特别明显，国内外目前还没有相关报道。
1 资料与方法
1.1 临床资料
选取2010年2月至2014年2月在我院接受治疗的浆液性卵巢癌石头腊病人200例作为研究对象，病人在医院接受治疗期间的上皮性卵巢癌病人实施手术或者化学治疗之前，标本的采集需要征得患者和患者家属的完全统一之后开始实施，分期参照FIGO病理分期标准。而相关病理的诊断则通过资深的病理专家实施，100例普通的输卵管伞端石蜡组织的标准作为此次研究的对照人群。
1.2 治疗方法
1.2.1 总RNA提取
把石蜡包埋组织有针对性的切成8um薄片×十张，使用二甲苯作为石蜡的组织切片脱蜡，依据miR-Neasy FFPE LIt的试剂说明实施RNA的有效提取，在提取过程中严格按照说明书的操作流程和要求实施。使用Gene Company Linited的核酸蛋白分析器对RNA溶液OD260/OD280的光密度数值OD以及RNA的纯度与浓度实施有效检测，在OD260/OD280大于1.8，同时小于2的情况下可以实施下一步的检测。
1.2.2 反转录
因为miRNA分子相对不大，尽管RT-PCR方法是现阶段对基因实施检测表达最科学合理的方法，不过不能使用常规的RT-PCR实施检测，在检测的过程中往往要设计特殊性的茎环RT引物，尽管于miRNA分子的末端可以加poly（A）尾，之后用5端带延伸的序列Olig-dT引物实施反转录，在此过程中样本的RNA可以依据不完全相同的样本浓度通过一系列的等值换算之后添加，需要特别注意的是，添加的量应该大于10mg，同时要小于2ug，另外可以使用RNase-free water补足到7ul。miRNA的反转录反应的体系如下表1所示，把以上逆转录的反应体系有效的防止在冰中实施操作。当然应该严格按照相关标准，在37摄氏度的条件下可以孵育一个小时，在95摄氏度的条件下应该孵育5分钟，之后将其放置冰块上如果不会即刻实施PCR，则反转录之后的cdna应该在零下29摄氏度的环境下实施保存。
1.3统计学分析
采用SPSS16.0统计学软件进行统计学分析，计量资料用( ±s)表示，组间差异、组内差异采用t检验，计数资料比较采用χ2检验 ，P＜0.05时为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 miR-129-1-3p于浆液性的卵巢癌表达
实时荧光定量的PCR检测，此次实验的扩增曲线可以发现上皮性的卵巢癌内其miR-129-1-3p的最终CT数值要比普通的输卵管伞端患者要高出不少，这在某种程度上说要比普通人更低。而查阅相关资料发现，其熔解的曲线改变率呈现单峰，这在一定程度上指代无引物的二聚体与非特异性的荧光出现，其定量相对较为准确。而浆液性的卵巢癌病人组织与普通输卵管伞端的组织miR-129-1-3p其相对的表达量是：1.00以及29.64，则表明浆液性的卵巢癌病人组织要比一般性的输卵管上皮组织更加低。二者差异有统计学意义，即P＜0.05.
3 讨论
有研究统计发现目前卵巢癌为女性生殖系统最为普遍的恶性肿瘤，该肿瘤的致死率是妇科疾病肿瘤的第一位。而在其三大恶性肿瘤中，浆液性的卵巢癌最多[1]。不过目前研究来看还没有确定发病的机制，不过很多学者通过分析发现该恶性肿瘤主要起源输卵管上皮[2]。同时有相关的临床学者通过相关研究发现浆液性的卵巢癌应该是起源于输卵管上皮，这样就为卵巢癌早期的出现机制提供较为精准的对照。现阶段已有的分析选取发现输卵管的上皮是普通的发生机制[3]。
相关研究显示miRNA可以有效的调节控制部分致癌基因或者最大限度的一直癌细胞的表达最终影响细胞的增值或者转移，该种抑制在很多癌症中都能起到同样的作用[4]。实际上miRNA的表达谱可以有效的显示于多种类型的肿瘤组织内均可以存在miNRA表达的失调，这就说明此类失调的表达和肿瘤出现的有着某种直接或者间接的关系[5]。
文章通过对临床的病理特征的相关资料实施研究，发现miR-129-1-3p于浆液性的卵巢癌中其低表达和年龄、病理分化的程度等没有直接的关系，这在某种程度上说明miR-129-1-3p实际上仅仅参与了浆液性卵巢癌早期的发生机制。
参考文献：
[1]张振辉,熊旭明,江子欣等.miR-129和miR-142-3p对人单核细胞凋亡与自噬的作用研究[J].中国急救医学,2014,34(1):62-66.
[2]马莉,康石清,苗莉等.凋亡相关基因 Bax、FasL、c - FLIP 在浆液性卵巢癌中的表达[J].现代肿瘤医学,2015,(7):904-907.
[3]张莹,岳瑛,王东娇等.浆液性卵巢癌组织中P53的表达与化疗敏感性及临床预后研究[J].中国妇幼保健,2015,30(2):290-292.
[4]吴鹏,朱笕青,郑智国等.雌、孕激素受体和人表皮生长因子受体2共表达用于高级别浆液性卵巢癌患者复发预测的价值研究[J].中国全科医学,2014,17(2):151-154.
[5]杨梅琳,康玉,洪珊珊等.不同腹膜后淋巴结转移能力的卵巢癌细胞小RNA(miRNA)表达差异[J].复旦学报（医学版）,2014,41(4):476-482.
论文作者:耿会欣
论文发表刊物:《河南中医》2015年8月
论文发表时间:2016/6/2
标签：浆液论文; 卵巢癌论文; 输卵管论文; 组织论文; 卵巢论文; 病理论文; 统计学论文; 《河南中医》2015年8月论文;