刘芳1 吴建超2
1身份证号码：620103198607272624 河北 050000；2身份证号码：13112219830309181x 河北 050000
摘要：目的：清心滚痰胶囊中硫化汞的含量测定方法的确立。方法：采用高效液相色谱法。结果：Hg2+进样量在0.4～2.0μg范围内线性关系良好，平均回收率为93.83％，RSD为1.94％（n＝6）。结论：此种方法准确简单，专属性强，可用于清心滚痰胶囊中硫化汞的含量测定。
关键词：清心滚痰胶囊；硫化汞；高效液相色谱法
1 材料
1.1 仪器
日本岛津LC-10ATVｐ型高效液相色谱仪（双泵，日本岛津SPD-10Avp紫外检测器）；KQ-250型超声波处理器（昆山市超声仪器有限公司）。
1.2 药品与试剂
清心滚痰胶囊（每粒装量0.35g）；氯化汞对照品（购于北京恒元化工技术研究院）。甲醇为色谱纯，水为自制高纯水，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 测定方法
2.1.1 色谱条件：色谱柱：C18柱（4.6mm×250mm，0.5μm）；流动相：甲醇-0.01mol／L磷酸氢二钠缓冲液（含0.01％二乙基二硫代氨基甲酸钠）（V∶V＝73∶27，用磷酸调节pH至7.5）；检测波长：270nm；柱温：30.0℃；流速：0.8ml／min；理论塔板数按硫化汞峰计算应不低于1500。
2.1.2 对照品溶液的制备：精密称取真空干燥的氯化汞对照品68.27mg，置于50ml容量瓶中，以水溶解、定容、摇匀（Hg2+质量浓度相当于1.008787mg／ml）。精密量取上述溶液1.0ml，置于10ml容量瓶中，加入0.5ml消化液、1.5ml水、15mg二乙基二硫代氨基甲酸钠，再用丙酮定容至刻度，摇匀，以0.45μm滤膜滤过，制成Hg2+质量浓度相当于100.8787μg／ml的对照品溶液。
2.1.3 供试品溶液的制备：取本品内容物约10mg，精密称定，置于安瓿中，加入0.5ml消化液［HNO3-HClO4（V∶V＝9∶1）］，封口，在干燥箱内（100℃）放置24h，冷却后；将消化后溶液转移至10ml量瓶中，用2.5ml水分次洗涤安瓿，洗液并入同一量瓶中，再加入15mg二乙基二硫代氨基甲酸钠，用丙酮定容至刻度，摇匀，以0.45μm滤膜滤过，作为供试品溶液。
2.2方法学考察
2.2.1样品专属性考察：取缺朱砂药材的空白药粉，与供试品溶液的制备方法同法制备阴性对照溶液。按照测定方法，取供试品溶液和阴性对照溶液，流动相各10μL注入液相色谱仪。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆结果显示，供试品溶液中存在Hg2+吸收峰，而阴性对照在Hg2+出峰位置上无干扰，流动相在Hg2+出峰位置上无干扰。
2.2.2 Hg2+线性范围的考察：按“2.1.2”项下方法制备含Hg2+相当于100.8787μg／ml的对照品溶液。精密吸取此溶液各4、8、12、16、20μL（约相当于进样量0.4、0.8、1.2、1.6、2.0μg）分别注入液相色谱仪进行测定，测得峰面积分别为194895.8、390423.9、574465.1、767242.2、959426.6。以进样量（X）为横坐标、峰面积值（Y）为纵坐标作标准曲线，得回归方程为Y＝476469.975X＋5526.75（r＝0.99997）。结果表明，Hg2+进样量在0.40～2.00μg时，与峰面积值呈良好的线性关系。
2.2.3 精密度考察：取同一供试品溶液，按上述色谱条件重复进样6次，结果相对标准偏差（RSD）为1.344％，表明精密度良好。
2.2.4 重复性试验：取清心滚痰胶囊（批号：20040501）内容物6份，每份2.0ｇ，精密称定，分别按供试品溶液的制备方法制备溶液，分别进样10
μl，测定峰面积，计算Hg2+的质量并换算为清心滚痰胶囊中硫化汞的含量。结果显示，含量的RSD为0.71％（n＝6），表明重复性良好。
2.2.5 稳定性试验：取供试品溶液放置4、8、12、16、20、24h，分别进样，测定其中硫化汞的含量，以考察供试品溶液稳定性。结果显示，含量的RSD为0.92％，表明供试品溶液至少在24h内稳定。
2.2.6 加样回收试验：精密称取Hg2＋对照品适量，加入至已知Hg2+和硫化汞含量的清心滚痰胶囊（批号：20040501，内容物中Hg2+的含量为12.22％、硫化汞含量为14.18％）中，依法测定Hg2+的含量，并计算加样回收率，回收率＝（实测值－样品中含量）／对照品加入量×100％。结果显示，加样回收率为90.91％～96.36％，平均加样回收率为93.83％，RSD为1.94％（n＝6）。
2.3 样品中硫化汞的含量测定
取10批清心滚痰胶囊样品，依法制备供试品溶液并测定其中中硫化汞的含量。结果显示，每粒含硫化汞的质量分别为46.86、45.87、46.20、46.53、46.53、47.19、46.20、46.86、46.86、47.19、46.63mg。测定结果表明，清心滚痰胶囊中硫化汞含量基本稳定。因此，在平均含量的基础上，按总含量上下浮动30％制订本制剂含量限度为：每粒含硫化汞应为30～60mg。
3讨论
在本实验过程中，选取Hg2+作为对照品，通过测定供试品中Hg2+的含量可计算硫化汞的含量。在流动相中加入二乙基二硫代氨基甲酸钠是为了将供试品消化后与其配合，从而可以使用高效液相色谱法对汞-二乙基二硫代氨基甲酸钠配合物进行分离测定，以确定硫化汞的含量。流动相pH为7.5时，二乙基二硫代氨基甲酸钠稳定；而当pH降低时，二乙基二硫代氨基甲酸钠容易分解并导致高效液相色谱法测定时基线下移。有研究结果显示，当甲醇占流动相的比例为68％～77％时，汞-二乙基二硫代氨基甲酸钠配合物吸收峰的保留时间在30min内。本研究发现，当甲醇占整个流动相的73％时，所测定的配合物吸收峰保留时间在12min前后，保留时间合适且分离度好。
综上所述，本文所建立的硫化汞测定方法准确、专属性强，可用于清心滚痰胶囊的质量控制。
参考文献：
[1］魏绪华．清心滚痰丸合并氯丙嗪治疗首发精神分裂症55例临床观察［J］．中医杂志，2008，49（3）：237-238，241．
[2］徐韧柳．复方芦荟胶囊中硫化汞的含量测定［J］．中国药业，2013，12（4）：47．
论文作者:刘芳1,吴建超2
论文发表刊物:《健康世界》2015年5期供稿
论文发表时间:2015/10/23
标签：硫化汞论文; 溶液论文; 含量论文; 乙基论文; 胶囊论文; 氨基论文; 精密论文; 《健康世界》2015年5期供稿论文;