李传武
（烟台中洲制药有限公司 山东 烟台 265307）
【摘要】 目的：建立金莲花分散片中荭草苷的含量测定方法。方法：色谱柱：InertsilODS-SP（4.6×250mm,5μm） ,流动相甲醇：乙腈：0.1%磷酸溶液 (10:10:80 ) ,流速 0.8mL?min-1,检测波长：349nm，柱温：25℃。结果：荭草苷在 2.02～16.18μg?mL-1呈良好的线性关系y=78232x–172812 (r=0 9999) ,平均回收率为 99.2% ,RSD =0.13% 结论：本法灵敏、准确、专属性强 ,重现性好 ,可作为金莲花分散片含量的有效测定方法。
【关键词】金莲花；分散片；荭草苷；高效液相
【中图分类号】R28 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2015）19-0305-02
金莲花（Trollius Chinensis Bunge）属于毛茛科植物，又名旱金莲、金芙蓉等[1]，为多年生宿根草本植物，河北、陕西、辽宁等省份均有种植。金莲花药用历史悠久，花色深黄，味苦，性寒，无毒，其中药可治口疮喉肿，耳痛目痛，浮热牙宣，疔疮等症状[2]，其化学成分包括黄酮类、有机酸、挥发油、生物碱、少量的萜类成分等，黄酮类化合物为主要成分，具有抑菌、抗病毒、抗氧化等活性[3]。荭草苷是金莲花黄酮类化合物的主要成分之一，目前文献对于金莲花及其制剂中荭草苷有一定研究，但金莲花分散片中荭草苷含量研究不多。本文由此出发，提出对高效液相测定金莲花含量进行测定，结果如下。
1.仪器与试药
采用DIONEX系统高效液相色谱仪，天平为METTLER 240十万分之一天平及FA2004A万分之一天平，甲醇、乙腈、磷酸均为色谱纯，水为超纯水，超声清洗器；荭草苷对照品由中国药品生物制品鉴定所提供，批号为（140503-141105）；所用金莲花分散片（烟台中洲制药有限公司生产，批号20140514-20141109）。
2.方法
2.1 色谱条件
色谱柱：InertsilODS-SP（4.6×250mm,5μm），流动相：甲醇：乙腈：0.1%磷酸溶液?(10:10:80)；检测波长349nm；流速：0.8mL?min-1,；柱温：25℃。
2.2 对照品溶液制备方法
取8.09mg荭草苷对照品，置于50ml容量瓶中，加甲醇溶解至刻度，即得。
2.3 供试品溶液的制备方法
取本品10片，精密称定，研细，混匀，精密称定100.98mg放置在具塞锥形的量瓶中，加入50ml甲醇，闭塞，室温放置30min后，称重，进行超声处理，时间为20min，放冷后称重，用甲醇将减失的重量补足，摇匀、滤过，取5ml上清液，取0.45um微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品。
2.4 线性关系
精密量取1、2、4、6、8ml荭草苷对照品溶液，对应加入标记好的6个容量瓶中，用甲醇稀释至10ml，摇匀后得到不同浓度的荭草苷对照品溶液。在上述色谱条件下各选10ul进样，以浓度为横坐标，峰面积作为纵坐标，绘制呈标准曲线，结果显示y=78232x–172812?(r=0.9999)，在2.02～16.18μg/ml范围内呈良好的线性关系。
2.5 精密度
吸取10ul同一对照品溶液，连续6次进样，对其峰面积进行记录，显示RSD=0.12%，提示仪器具有良好的精密度。
2.6 重复性
取6分同一批供试品，按照供试品制备流程，制备成5份供试品溶液，对荭草苷含量进行测定，RSD为1.34%。
2.7 稳定性
取该供试品溶液，在室温下自然放置，分别于0、1、4、8、12h、24h，测定荭草苷含量变化，结果6次测得荭草苷峰面积的RSD为1.47%，表明供试品溶液在24h内稳定。
2.8 加样回收率试验取同一供试品溶液10ml，至于三个锥形瓶中，分别精密加入3.1234mg、0.3452mg、0.1453mg荭草苷对照品，按供试液制备方式制备后，去续滤液，进针10ul，测定峰面积，测得回收率分别是100.03%、101.25%、99.14%，RSD=1.6%，符合药典标准。
2.9 随机抽取批号（20140514-20141109）共四个批次金莲花分散片样品，按照供试品方法制备供试品溶液，进样10ul，测定含量。
3.结果
采用HPLC法测定金莲花分散片中荭草苷含量具体情况见表1：
3.讨论
3.1 本文在测定条件建立过程中，在参考中国药典基础上，试验了甲醇：乙腈：0.1%磷酸不同比例的色谱分离情况，结果显示甲醇：乙腈：0.1%磷酸（10:10:80?）做为流动相理论塔板数，分离度较好，灵敏度较高。
3.2 在选定的色谱条件下，荭草苷的最大吸收波长为349nm,此波段附近杂质干扰小，吸收强，故选择349nm波长同时测定金莲花分散片中荭草苷的含量。
3.3 参照中国药典中金莲花片的供试品制备过程，结合不同超声结果，我们发现超声20min即可达到溶液澄清，用时短，药物损失小，故考虑超声20min。
结合本次实验结果我们发现，高效液相法测定金莲花分散片中荭草苷含量，方法简便、操作快捷、准确度高、稳定性好，值得推广使用。
【参考文献】
[1] 李桂兰,张桂青,刘丽娜等.高效液相色谱法同时测定金莲花胶囊中4种成分的含量[J].中国医院药学杂志,2013, 33(24).
[2] 刘召阳,罗都强.金莲花的化学成分研究[J].中草药,2010, 41(3):370-373.
[3] 董永喜,张桂青,王爱民等.金莲花水溶性化学成分的研究[J]. 中国药业, 2012, 21(19):17-18.
论文作者:李传武
论文发表刊物:《医药前沿》2015年第19期供稿
论文发表时间:2015/8/26
标签：溶液论文; 金莲花论文; 甲醇论文; 含量论文; 色谱论文; 高效论文; 片中论文; 《医药前沿》2015年第19期供稿论文;