王继红[1]2002年在《实验性家兔持续性高眼压及眼压恢复正常后角膜内皮细胞变化的观察》文中指出目的：本文旨在观察实验性家兔持续性高眼压对角膜内皮细胞的损伤以及眼压恢复正常后受伤角膜内皮细胞修复情况，希冀探讨临床上青光眼持续性高眼压对角膜内皮细胞损伤的机制以及将眼压恢复至正常后受损角膜内皮细胞修复机制，为临床治疗提供实验依据。方法：以42只(84眼)无眼病的健康成年家兔随机分成二大组，一组又随机分成1、2、3、4四个小组，每组6只(12眼)。1组为正常对照组，2、3、4叁个小组分别代表眼压升高后1周、3周、5周的家兔；二组又随机分成5、6、7叁个小组，每组6只(12眼)，分别代表持续高眼压5周又将眼压恢复正常后2周、4周、6周的家兔。由前房注入2％甲基纤维素建立持续性高眼压家兔模型，通过虹膜周切术使眼压降至正常。将各组家兔猝死后在光镜及透射电射下观察兔眼角膜内皮细胞密度、活性及超微结构的变化。结果：实验2、3、4组兔眼角膜内皮细胞平均密度较正常对照组(即1组)均有不同程度下降，在此叁组内皮细胞平均密度均有差异，差异有显着性，且随高眼压持续时间越长兔眼角膜内皮细胞平均密度越低。电镜下发现兔角膜内皮细胞超微结构在持续性高眼压下发生变性，出现线粒体嵴消失，空泡样变，粗面内质网扩张，脱颗粒。随高眼压持续时间越长细胞破坏程度越重，在持续高眼压5周组(即实验4组)家兔角膜内皮细胞出现细胞核膜破裂，核质外流染色质边集损伤，提示细胞出现坏死迹象。实验5、6、7组兔眼角膜内皮细胞平均密度较第4组均有不同程度升高，在此叁组之间内皮细胞平均密度均有差异，差异有显着性，且随眼压恢复正常后的时间越长，内皮细胞的平均密度越高。电镜下发现兔角膜内皮细胞超微结构在眼压恢复正常后受损的表现均有恢复趋势，表现为靖消失及空泡样改变的线粒体减少，粗面内质网少有扩张脱颗粒，甚至出现双核表现。结论:持续性高眼压对角膜内皮细胞造成损伤，随高眼压持续时间越长程度越重，但随眼压恢复正常后的时间越长，受损角膜内皮细胞出现不同程度的修复。对临床上持续高眼压的青光眼患者，即使出现角膜内皮细胞损伤、坏死，也不应放弃治疗，使其眼压恢复正常，对角膜内皮细胞损伤的修复有很大的裨益。
佚名[2]2004年在《眼底病专题》文中进行了进一步梳理S1-01脉络膜新生血管膜治疗新进展严密四川大学附属华西医院眼科S1-02年龄相关性黄斑变性发病机制的研究进展Shikun He(何世坤)Department of Pathology and Ophthalmology,Keek School of Medicine at the University of Southern California,Doheny Eye Institute,Los Angeles
佚名[3]2004年在《青光眼专题》文中提出S1-01青光眼基本问题的研究现状及展望葛坚中山大学眼科中心青光眼主要表现为病理性眼压升高以及特征性视神经损害和视野缺损,尽管近来重提青光眼的中枢神经病变与自体免疫变化。数十年来,青光眼的研究始终围绕着五个“基本问题”,即“硬核问题”:1.青光眼的发病机制;2.青光眼的早期诊
高洪瑞[4]2009年在《器官培养保存角膜及大泡性角膜病变Na~+-K~+-ATP酶活性及水通道蛋白-1表达的改变》文中研究表明目的一、检测器官培养法保存角膜Na~+-K~+-ATP酶活性和水通道蛋白-1表达的改变,探讨Na~+-K~+-ATP酶活性和水通道蛋白-1表达的改变在保存角膜水肿中的作用。二、以0.05%的新洁尔灭溶液前房注射制作兔眼大泡性角膜病变的动物模型,检测Na~+-K~+-ATP酶活性和水通道蛋白-1的表达,探讨Na~+-K~+-ATP酶和AQP-1在大泡性角膜病变发病机制中的作用。叁、以器官培养法保存的角膜为供体行穿透性角膜移植术治疗实验性大泡性角膜病变,观察角膜透明、厚度等恢复情况,了解术后角膜CEC存活情况能否满足PKP的要求。方法一、本实验分为2组,24只新鲜兔眼角膜作为对照组,24只器官培养保存的角膜作为实验组。两组均在眼球摘除前以角膜测厚仪测量角膜厚度,眼球摘除后以非接触角膜内皮显微镜行角膜内皮细胞计数。实验组经器官培养保存4周后以角膜测厚仪测量角膜厚度,然后每个角膜被分成两半,共48个半片角膜,再分成4组,每组12个半片。12个半片用茜素红-台盼蓝染色染色行角膜内皮细胞计数;12个半片角膜用4%中性福尔马林溶液固定行HE染色、应用免疫组化染色检测AQP-1在角膜基质和内皮细胞表达的改变;12个半片角膜用Na~+-K~+-ATP酶试剂盒测量角膜内皮细胞Na~+-K~+-ATP酶活性;12个半片角膜用实时荧光定量PCR检测AQP-1mRNA表达改变。实验组角膜厚度和角膜内皮细胞计数进行保存前后的比较。实验组Na~+-K~+-ATP酶活性、免疫组化染色及实时荧光定量PCR检测AQP-1表达的改变,与正常对照组角膜比较。二、以0.05%的新洁尔灭溶液前房注射制作兔眼大泡性角膜病变的动物模型,制模前分别用角膜测厚仪和角膜内皮显微镜测量角膜厚度和角膜内皮细胞数目。术后观察眼球大体情况、测量角膜厚度。1周后处死实验动物取角膜,用茜素红-台盼蓝染色染色行角膜内皮细胞计数;用4%中性福尔马林溶液固定行HE染色、应用免疫组化染色检测AQP-1在角膜基质和内皮细胞表达的改变;用Na~+-K~+-ATP酶试剂盒测量角膜内皮细胞Na~+-K~+-ATP酶活性;实时荧光定量PCR检测AQP-1mRNA在角膜内皮细胞表达的改变;并于正常对照组角膜比较。叁、以0.05%的新洁尔灭溶液前房注射制作兔眼大泡性角膜病变的动物模型,制模7天后,用器官培养法保存4周的角膜作为供体行穿透性角膜移植术。观察术后植片透明度、以角膜测厚仪测量角膜厚度。PKP术后14天摘取移植植片,行茜素红-台盼蓝染色染色检查角膜内皮存活情况。结果一、器官培养保存4周后角膜厚度明显增厚水肿,角膜厚度由保存前的351.12±23.23μm增厚至保存后683.60±48.92μm;内皮细胞密度由2742.61±124.02个/mm2减少为2381.56±174.27个/mm2 ; Na~+-K~+-ATP酶活性在新鲜角膜为3.82±0.27U/mgprot,在保存角膜降低为3.58±0.26U/mgprot;HE染色显示保存4w时角膜上皮仅剩余1~2层细胞,基底细胞规则的柱状结构消失,基质仍轻度水肿,后弹力层有较多皱折;免疫组化法检测到AQP-1在角膜的内皮细胞与基质有阳性表达,保存后角膜内皮、基质的棕黄色变淡,表达降低;实时荧光定量PCR结果显示保存后角膜内皮细胞的AQP-1mRNA相对于保存前的表达呈下降趋势。二、实验性大泡性角膜病变的角膜水肿混浊,明显增厚,第7天时平均达到696.17±43.54μm;角膜内皮细胞密度由制模前的2876.00±164.65个/mm2减少到646.58±126.72个/mm2;CEC染色见内皮细胞片脱落,细胞失去正常六边形外观、不规则,细胞膜破裂溶解。Na~+-K~+-ATP酶活性明显降低至1.03±0.28 U/mgprot;HE染色组织学观察内皮层不完整,细胞数目较少,部分脱落,上皮下有水泡形成;免疫组化法检测到AQP-1在角膜内皮的着色变淡,部分区域无阳性染色,基质的染色变淡。实验性大泡性角膜病变角膜内皮AQP-1mRNA相对于正常的表达呈明显下降趋势。叁、术后第一天,植片基本透明,可以看清瞳孔和虹膜,术后第叁天植片完全透明,可以看清虹膜纹理;角膜缘充血及结膜充血3天后逐渐减轻,但轻度充血一直存在。术后第一天,植片轻度水肿,厚度开始变薄;术后第叁天,植片水肿消退,厚度已基本恢复到保存前水平;术后7天植片厚度较保存前略薄;术后14天仍较保存前薄。PKP术后角膜植片CEC密度较保存后略有下降,不规则的细胞形态减少。结论:一、器官培养法保存的角膜厚度增加,内皮密度降低,Na~+-K~+-ATP酶活性轻度下降,水通道蛋白-1的表达降低;保存后细胞密度能满足角膜移植的要求;保存的角膜水肿可能与Na~+-K~+-ATP酶活性和内皮AQP-1表达降低有关。二、以0.05%的新洁尔灭溶液前房注射可以建立兔眼大泡性角膜病变的动物模型,Na~+-K~+-ATP酶活性和内皮AQP-1表达降低与大泡性角膜病变的发病有关。叁、器官培养保存兔角膜在行PK术后植片透明,能够满足治疗大泡性角膜病变的PKP手术要求。
邓宏伟[5]2002年在《防治高危角膜移植免疫排斥反应的研究》文中研究说明角膜移植是目前同种器官移植中成功率最高的一种组织移植手术，亦是眼科重要的一种复明手术。对眼部条件好的病例，术后第1年的排斥率仅为10％(Foulks，1996)，但对于病情复杂的高危病人(high-risk patients)如：受体眼表新生血管化、持续炎症、结角膜化学伤、大植片移植、第二次移植等病人，虽通过HLA配型或局部和全身应用免疫抑制性药物等方法，术后角膜移植的存活率仍小于35％(Apel，1995)。如何提高有高危因素眼的角膜移植术后存活率已成为目前临床亟待解决的问题。 雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook.f.,TWHf)有免疫抑制、抗炎、抗生育、抗肿瘤和抗菌作用。但由于其全身应用对造血系统、心、肝、肾及生殖系统有一定的毒副作用，因此，阻碍了其广泛的临床应用。 本研究旨在研制出新型的雷公藤多甙滴眼液应用于防治角膜移植排斥反应，并通过术后联合新型的雷公藤多甙滴眼液以及局部免疫抑制剂与局部抗新生血管制剂，以期在临床上降低高危角膜移植术后免疫排斥反应的发生率或在实验中延长免疫排斥反应的发生时间。并同时通过体外混合淋巴细胞培养，研究角膜缘干细胞在角膜移植排斥反应发生中的作用机制，以期从理论上进一步阐明角膜缘干细胞的作用。 暨南人学博卜学位论义（2002）队治扁危闲膜移柏兔疫排斥反）巾的研究（中义摘要） 第一部分 雷公藤多汛及雷公藤内酯醇滴眼液在兔眼前房的药代动 J学U究 目的 研制出雷公膝多贰 （”11）淌眼液以及雷公藤内酯醇（T10）滴眼液， 并用高效液相色谱仪法对两种滴眼液进／、眼房水中的药代动力学参数进行研究。 方法 将0刀3％Tll滴眼液或1叶驴11！TI。滴眼液50…滴入兔眼下睑结膜囊 内，在仙中定时采驭房水做为测试仟本，纤处理后，川；为效液相色谱仪测定样本 中的雷公藤内酯醇质量浓度。 结果Tll、TIO滴眼液在新西兰白兔眼房水中为一室模型，T＊滴眼液的主要药 代动力学参数为：A＝2．703gb； Kd．047h一’二 ho厂08 11一’；L＊gti＊＊一0．456h二 ti／2（k。）一0．256h；ti／2（kC）＝0．339h； T（111。X）＝0．880h； C（m。）＝0．278Ug／llll；AUC＝0．323 fig”h’il－‘。其拟合的动力学万程为C（t）＝178 123 XDOSeX（e－‘047。（t·0456）e·2·708x （’”＊％）厂 T；。滴眼液主要药代动力学参数为：A－2．23 u旮ml；Ke－2刀lh‘’； ＊肝2．80卜‘Z L＊g ＊＊＊二0．43hh／2b）二0二sh；1；／。k）一0．34卜；v一）二0．85卜； C（ma－c）＝0．27卜驴川；AUC一0．31u g·h·n。lJ。其拟合的利力学万程为＊）＝44石2 X DOSC X（C－‘””（‘－’“）e－”‘“（‘－’“’）） 结论 卜滴眼液在眼房水内仑伽＠从Itr出现在点药后0．8811，而飞 滴眼液 出现在点药后 0．85h，两种滴眼液均在 411基本被代谢消除。 第二部分雷公藤多贰滴眼液对离休和在体角膜上皮刺激性和毒性的 研究 目的 了解雷公藤多贰滴眼液局部使用的安全浓度。 方法 分别用 10只 WIStar大鼠、新西兰白兔，滴用不同浓度雷公藤多贰滴 眼液，按照眼部刺激反应评分标准，在休评价各种浓度滴眼液的刺激性，并行角 膜荧光素钠染色，继后取角膜行常规病理切片，HE染色。均与未滴眼组相比。 对正常人眼（实验研究者自身）滴以上动物实验确定的低毒性浓度的雷公藤多贰 2 褂南人’Hd）卜J价论义（2《）02 ） 队治．九危川仰柑川见疫排斤反＊的研究（中义摘茨） 滴眼液 100ill，3次后，感受眼部有七刺激症状，观察限部刺激反应，并进行角膜 荧光染色，观察角膜上皮是否有首色。通过对兔角膜上皮体外培养，并应用0．4％ 台盼蓝染色，在显微镜下观察死广细胞数的方法，研究滴眼液对离体兔角膜上皮 的毒性。 结果200［ig／nil山冷n。l浓）吐组，以及空白对照叁局部应用眼刺激反应的 评分为 l～3分；450叱／Illl浓度组为 4～12分；600卜g／1ill浓度组为 12～16分。 200pg／Inl、300pg／ml浓度组，以及个白对贝组局部应川 1）hfijj未滴眼组相＊， 大鼠和兔角膜上皮荧光染色，角膜上皮着色以及HE染O均未见有显着差异，而 在450us／nl． 600＂g／ml浓度组角膜【i皮则出现损伤。300fig／Inl雷公藤多贰滴眼液 对在体人眼无?
参考文献：
[1]. 实验性家兔持续性高眼压及眼压恢复正常后角膜内皮细胞变化的观察[D]. 王继红. 山西医科大学. 2002
[2]. 眼底病专题[C]. 佚名. 中华医学会第九届全国眼科学术大会论文汇编. 2004
[3]. 青光眼专题[C]. 佚名. 中华医学会第九届全国眼科学术大会论文汇编. 2004
[4]. 器官培养保存角膜及大泡性角膜病变Na~+-K~+-ATP酶活性及水通道蛋白-1表达的改变[D]. 高洪瑞. 第二军医大学. 2009
[5]. 防治高危角膜移植免疫排斥反应的研究[D]. 邓宏伟. 暨南大学. 2002
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