【摘要】目的:探讨染色体9p21区域rs10757278基因多态性与新疆维吾尔族患者心肌梗死的关系。方法:选取2014年1月至2015年7月在新疆维吾尔自治区人民医院心内科确诊为MI的115例维吾尔族患者作为MI组,所有患者经动脉造影证实至少一支血管狭窄>50%以上;选择同期于我院参加体检的健康人群92人作为对照组。对所有对象的rs10757278基因多态性进行分析,分析比较两组患者相对危险度及95%可信区间。结果:MI组的高血压病史、糖尿病史及高脂血症病史等指标均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。MI组和对照组间rs10757278位点的基因型分布频率存在统计学差异(P=0.003);MI组和对照组等位基因A/G分布频率存在统计学差异(P=0.001)。结论:染色体9p21区域rs10757278位点基因多态性是新疆维吾尔族MI患者的易感基因。
【关键词】维吾尔族;心肌梗死;基因多态性
【中图分类号】R541 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231(2016)18-0132-02
心肌梗死(MI)严重影响患者的身体健康和生活秩序。目前通过病例对照研究经发现了一些基因多态性与MI有很强的关联性,例如:MTHFR-C677T,CETP-TaqlB,PON1-Q192R,eNOS Glu298Asp,Prothrombin G20210A,F5,AT1R,1166 A/C,ApoB,ApoE e4/e4,ACE DD,LPL Ser447Ter等[1]。国内外多位学者已经做过此方面的相关研究,但是很少有关于单核甘酸多态性与我国少数民族的相关性研究。此前本人研究证实染色体9p21区域rs1333049基因多态性表达与新疆维吾尔族MI患者存在相关性[2],提示该区域基因多态性同样为维吾尔族MI患者的风险基因。本文主要研究对象为维吾尔族人民,探讨染色体9p21区域rs10757278基因多态性与新疆维吾尔族患者心肌梗死的关系,对维吾尔族MI患者的早期预防和治疗提供遗传基因方面的证据和参考。
1.资料和方法
1.1 一般资料
选取2014年1月到2015年7月在新疆维吾尔自治区人民医院心内科明确诊断为MI的115例维吾尔族患者作为MI组,同期于我院体检的健康人群92人作为对照组。MI诊断标准遵照2007年欧洲心脏病学会(ESC)、美国心脏学会(AHA)、美国心脏病学会(ACC)和世界心脏联盟(WHF)联合颁布的全球MI的统一定义。所有研究对象均填写知情同意书。
1.2 观察指标
记录MI患者心电图,心肌坏死标志物,冠脉造影检查结果等与MI有关的数据,记录健康对照组的心电图,生化等相关数据。
1.3 生物学标志物及其检测
由新疆自治区人民医院检验科全自动生化分析仪检测各项生化指标:甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等测定。采用酚-氯仿法提取基因组DNA,基因多态性序列检测采用PCR-RFLP法,基因多态性鉴别采用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。
1.4 全血基因组DNA提取
采用酚-氯仿法提取全血基因组DNA。
1.5 目的基因PCR扩增和单核苷酸多态性(SNP)分型
①设计引物并合成,上游引物:AGGCCAGACAGGGCTGTG,下游引物:TAAA GAGAGAGAGAGAAGGAGAAACTAC,延伸引物:AGATAGAGTCGATGCCA GCTAAGTCAGGGTGTGGTCATTCCGGTA。扩增条件:95℃变性15min,循环条件(94℃变性30s、55℃退火30s、72℃延伸1min),进行40个循环,反应完成后4℃保温。④在扩增产物中加入3μl纯化液,纯化反应条件:37℃ 30min,96℃ 10min,4℃保温。再向每个样本中加入7μl引物延伸反应混合物,延伸引物,延伸反应条件:96℃ 3min,循环条件(94℃ 20s,40℃ 11s),进行40个循环,4℃保温。⑤取10μl延伸产物加入杂交板,42℃杂交2h。⑥应用SNP Stream基因分型系统(Beckman coulter公司)进行扫描分析。
1.6 统计学方法
应用SPSS 16.0统计学软件进行分析,计量资料以均数±标准差(x-±s)表示,计数资料采用卡方检验,选择MI作为独立应变量,与其他变量进行logistic回归分析,以P<0.05为差异有统计学意义。
2.结果
2.1 MI组和对照组临床生化指标比较
MI组的高血压病史、糖尿病史及高脂血症病史等指标均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)(见表1)。
3.讨论
随着全基因组关联研究手段的发展,有关MI的基因研究开始兴起,并被证实基因因素是造成MI的独立危险因素,2007年以来全基因组关联性研究专注于CHD和MI所涉及的基因因素,在这些研究和其后续研究中,染色体9p21.3位点区域被发现是最常见的CHD和MI相关的位点,世界各地的研究机构对该区域掀起了研究基因多态性与CHD和MI等严重危害人类健康的心血管疾病的热潮[3]。
本研究结果显示:在维吾尔族人群中,rs10757278基因型分布存在基因多态性;且验证了高血压、糖尿病和高脂血症均为MI的危险因素,并证实了遗传因素是独立于以往已知的高血压、糖尿病、高脂血症等MI危险因素的独立危险因素。
综合对染色体9p21区域rs10757278位点基因多态性在新疆维吾尔族MI患者中的研究,可以认为rs10757278位点基因多态性是新疆维吾尔族MI患者的易感基因,考虑到MI是多因素共同作用所导致的疾病,其分子机制尚不完全清楚,同时新疆维吾尔族患者生活习惯与汉族不同,偏好高脂,高糖饮食,对水果,蔬菜等摄入较少,rs10757278基因多态性在其MI发病中到底起到多大的作用,有待于我们在今后的研究中进一步进行探索,从而对维吾尔族MI患者的早期预防和治疗提供遗传基因方面的证据和参考。
【参考文献】
[1]张琦,钟光珍,陈兴栋,等.染色体9p21上rs10757278单核苷酸多态性与汉族人心肌梗死的相关性分析[J].中国煤炭工业医学杂志,2010,13(02):173-174.
[2]杜蓉,李国庆,彭辉,等.染色体9p21上rs1333049单核苷酸多态性与新疆维吾尔族及汉族心肌梗死的相关性分析[J]. 中华实用诊断与治疗杂志,2012, 26(8):763-765
[3]段园园,夏小杰,孙帅.染色体9p21上rs10757278单核苷酸多态性与冠心病的相关性研究[J].深圳中西医结合杂志, 2016,26(3):1-3.
论文作者:杜蓉,付文博,王凤霞,李国庆
论文发表刊物:《心理医生》2016年18期
论文发表时间:2016/10/18
标签:多态性论文; 基因论文; 维吾尔族论文; 患者论文; 染色体论文; 引物论文; 心肌梗死论文; 《心理医生》2016年18期论文;