（湖南省永州市第三人民医院 425000）
摘要：目的 分析荧光定量PCR基因检测对G6PD缺乏症诊断所发挥的诊断价值。方法 选择我院在2016年5月~2017年8月进行G6PD缺乏症检测的100例血样进行检测，对常见的6个突变位点进行检测，以临床就检测金标准对荧光定量PCR基因检测所发挥的价值进行评价。结果 荧光PCR法诊断G6PD缺乏症的灵敏度为98%，特异性为100%，阳性预测值为100%，阴性预测值为98%，诊断符合率为98%。结论 荧光定量PCR基因检测在G6PD缺乏症诊断中发挥了积极的诊断价值，具有灵敏度高、特异性强、诊断符合率高等特点，杂合子检出率高，可以将荧光定量PCR基因检测作为G6PD缺乏症的首选诊断检查方式。
关键词：荧光定量；PCR基因检测；G6PD缺乏症；诊断价值
G6PD缺乏症（葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症）是全球型的X连锁不完全显性遗传性溶血性疾病，其致病原因为G6PD基因突变导致编码蛋白结构发生变化，G6PD酶活性降低。G6PD酶是磷酸戊糖旁路代谢的重要酶，其提供的戊糖可用于合成核算，确保还原性谷胱甘肽生成还原性辅酶，避免过氧化氢等物质损伤红细胞。G6PD缺乏症在全球约有4亿人，具有代表性的是以红细胞异常为主要病因的遗传性溶血性疾病，我国南方地区分布较多。G6PD缺乏症的临床症状表现带有差异性，无症状、新生儿黄疸、药物或感染导致的急性溶血、蚕豆病等，严重会导致新生儿重症核黄疽，造成永久性神经系统损伤和死亡[1]。若能早期发现G6PD缺乏症并给予有效治疗干预能够达到较好的治疗效果。本文分析了荧光定量PCR基因检测对G6PD缺乏症所发挥的诊断价值，现总结如下。
1 资料和方法
1.1一般资料
选择我院遗传实验室在2016年5月~2017年8月进行检测的血样标本100例进行检测分析，样本均来自各个地区，以广东居多，其中男性52例，女性48例。
1.2检测方法
采用ABI7500荧光PCR仪进行检测，按照检测标准提取样本DNA，在-20℃的环境下保存，检测技术原理为荧光PCR法，设计特异Taqman探针对常见的6个突变位点进行合管检测[2]，分别为G1376T、A95G、G1388A、C1024T、G382T、A871G，以有无扩增曲线作为定性突变检测，根据人类基因组中的β-actin一斤作为模板设计扩增引物对本次检测实验进行内控监测。
1.3检测评价
以Sanger测序结果为金标准，评价荧光定量PCR基因检测的灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值和诊断符合率。
2 结果
荧光定量PCR基因检测法的灵敏度为98%，特异性为100%，阳性预测值为100%，阴性预测值为98%，诊断符合率为98%。
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3 讨论
当前临床上进行G6PD活性筛查的方法主要有高铁血红蛋白还原法等，当其检测结果为弱阳性时，易出现主观误判，其溶血标本对于检测结果也存在一定影响，用于新生儿筛查时易出现假阳性率偏高的情况。一些实验室采用高铁血红蛋白进行定性初级筛查，并用酶法进行定量确诊，虽然能够提升筛查的敏感性和准确性，女性纯合子和男性杂合子均能够准确检测处，但女性杂合子的检出率较低。G6PD测序法是当前确诊G6PD缺乏症的临床金标准，但检测费用高，时间长，仅能够作为科学研究，无法应用在临床。本文研究所采用的荧光定量PCR基因检测具有简单、快速、准确、价格低等特点，杂合子检出率高，可作为临床筛查检测使用[3]。
结合本次研究的数据分析可见，荧光定量PCR基因检测的特异度和阳性预测值均达到100%。特异度指的是无病患者按照检测金标准可准确判定为无病的百分比，阳性预测值指的是检测阳性患者按照诊断标准所占的比重，按照荧光定量PCR基因检测方法，无病患者可确诊为无病，检测阳性结果可直接确诊为G6PD缺乏症[4]。荧光定量PCR基因检测能够明确患者病变的基因型，有助于妊娠患者在产前便能够准确诊断，其检测操作方法检测，在1个小时左右即可得到准确的检测结果。按照扩增曲线来判定突变位点是“阳性”或“阴性”，结果清晰直观，便于分析和确诊，同时不会受溶血影响导致检测结果出现误差。荧光定量检测选择的6个主要突变位点能够涵盖我国广东地区大部分的G6PD缺乏症的基因型，因此可推广用基因疾病筛查[5]。从检测价格上看，荧光定量PCR基因检测的成本低，不会给患者造成较大的经济负担，患者易于接受，临床推广可行性高。
荧光定量PCR基因检测对G6PD缺乏症的检测发挥了高的检测价值，具有灵敏度高、特异性强、诊断率高等特点，其价格低，检测时间短，可在临床检测中应用。随着各种基因检测技术的不断发展，G6PD缺乏症的基因测序类型也在增加，需要不断提升荧光定量PCR基因检测检测技术，检测出更多类型的基因突变。
参考文献
[1]姚英姿，谭志伟，杨孜，等.新生儿G6PD缺乏症筛查结果分析[J].中国妇幼保健，2016，23（4）：498-500.
[2]Lyu R Y，Chen X W，Zhang M，et al.Detection of gene mutation in glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency by RT-PCR sequencing.[J].Zhong guo dang dai er ke za zhi Chinese Journal of contemporary pediatrics，2016，18（7）：78-80.
[3]李维，张静，刘丽益，雷洁，韩路好.荧光定量PCR基因检测对G6PD缺乏症的诊断价值探讨[J].中国优生与遗传杂志，2017，25（04）：19-22.
[4]Bubp J，Jen M，Matuszewski K.Caring for Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase（G6PD）-Deficient Patients：Implications for Pharmacy.[J].P&T，2017，40（9）：572-4.
[5]杜传书.蚕豆病病因发病机理探讨III红细胞-6-磷酸葡萄糖脱氢酶杂合子的研究[J].遗传学报，2015，1（1）：92-98.
论文作者:彭雅彬
论文发表刊物:《航空军医》2018年15期
论文发表时间:2018/11/9
标签：荧光论文; 定量论文; 基因论文; 缺乏症论文; 阳性论文; 合子论文; 价值论文; 《航空军医》2018年15期论文;