【摘 要】目的：了解我国人免疫球蛋白制品中甲肝抗体水平。方法：不同实验组显著性差异分析方法，采用不同的标准品，对酶联法（ELISA）和放免法（RIA）检测甲肝抗体进行比较。对人免疫球蛋白类制品中的甲肝抗体效价进行分析评价。结果：在相同标准品前提下，酶联法（ELISA）的检测结果与放免法（RIA）的检测结果有显著差异，酶联法（ELISA）测得结果明显高于放免法（RIA）。甲肝抗体的稳定性较好，生产过程对其效价影响较小。结论：放免法（RIA）和酶联法（ELISA）检测甲肝抗体效价都具有可行性，但检测血浆应采用血浆标准品，检测制品应采用人免疫球蛋白标准品。甲肝抗体与蛋白质含量呈正相关。
【关键词】人免疫球蛋白制品；甲肝抗体；效价情况
【中图分类号】R322.4+7【文献标识码】A【文章编号】1276-7808（2017）04-023-01
Study on the method of detecting the titer of hepatitis A antibody in human immunoglobulin products
Abstract：Objective：To understand the level of hepatitis A antibody in human immunoglobulin products. Methods：The differences of different experimental groups were analyzed by different standard，and the comparison of enzyme - linked immunosorbent assay（ELISA）and radioimmunoassay（RIA）was performed. The titer of hepatitis A antibody in human immunoglobulin products was evaluated and evaluated. Results：Under the same standard，the results of ELISA were significantly different from those of radioimmunoassay（RIA），and the result was significantly higher than that of radioimmunoassay（RIA）. The stability of hepatitis A antibody is better，the production process has little effect on its titer. Conclusion：Radioimmunoassay（RIA）and enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）are feasible to detect the titer of hepatitis A antibody. However，plasma standard should be used for the detection of plasma，and the human immunoglobulin standard should be used for the detection of the product. There was a positive correlation between hepatitis A antibody and protein content.
key words：human immunoglobulin；hepatitis A antibody；titer
前言：甲型肝炎是最常见的一种急性传染病，其传染率高，易引起流行，多发于儿童及青少年人群。目前，使用甲肝疫苗对降低甲肝发病率、控制甲肝周期性流行起到了积极作用。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆为更好地提高甲肝的防治效果，也常在以甲肝疫苗预防的基础上，用人免疫球蛋白产品或者甲肝特异性人免疫球蛋白进行甲肝爆发流行的防治。本文采用酶联法（ELISA）和放免法（RIA）检测人免疫球蛋白类制品中的甲肝抗体效价，并对其进行分析评价。
1.资料与方法
1.1一般资料
主要试剂有酶联法（ELISA）测试剂；放射免疫法（RIA）检测试剂。甲肝抗体标准品/参考品（血浆标准品批号：20050602；人免疫球蛋白标准品批号：20080301）。样品：20个批次静注人免疫球蛋白（PH4）类成品、25个批次肌注人免疫球蛋白类成品及相对应的31个批次合并血浆样品。
1.2方法；
主要有同种检测方法检测不同标准品：用同种检测方法（RIA或ELISA法）不同标准品（血浆标准品和人免疫球蛋白标准品）检测静注人免疫球蛋白（PH4）和肌注人免疫球蛋白。不同检测方法同种标准品检测：对同种标准品（血浆标准品或人免疫球蛋白标准品）采用不同的检测方法（RIA和ELISA法）检测静注人免疫球蛋白（PH4）和人免疫球蛋白。不同检测方法不同标准品检测：RIA法+人免疫球蛋白标准品及ELISA法+血浆标准品检测静注人免疫球蛋白（PH4）和人免疫球蛋白成品甲肝抗体效价。检测之后比较测得的数据，对采用酶联法（ELISA）和放免法（RIA）检测人免疫球蛋白类制品中甲肝抗体的效价进行分析评价。
1.4统计学方法
采用Origin 7 Pro分析软件进行显著性检验，且双样本独立检验，P<0.05表示差异有统计学意义。
2.结果
不同标准品ELISA法测定静注人免疫球蛋白（PH4）：人免疫球蛋白标准品的甲肝抗体效价为71.88±17.92，血浆标准品的甲肝抗体效价为65.11±16.19。不同检测方法测定静注人免疫球蛋白（PH4）：RIA法的甲肝抗体效价为41.95±4. 71，ELISA法的甲肝抗体效价为71.88±17.92。不同检测方法测定肌注人免疫球蛋白：RIA法的甲肝抗体效价为90.42 ±13.01，ELISA法的甲肝抗体效价为13O.96±11.68。不同检测方法测定肌注人免疫球蛋白对应批次合并血浆甲肝抗体效价结果：RIA法的甲肝抗体效价为6.52 ±0.58，ELISA法的甲肝抗体效价为10.39±1.21。不同检测方法不同标准品测定静注人免疫球蛋白（PH4）甲肝抗体效：RIA法+人免疫球蛋白标准品的为41.95 ±4.71，ELISA法+血浆标准品的为65.11±16.19。静注人免疫球蛋白（PH4）成品与合并血浆甲肝抗体效价之间相关性：RIA+血浆标准品的为6.52±0.85（6.4*）；RIA+人免疫球蛋白标准品的为41.95±4.71（6.4*）；ELISA+血浆标准品的为10.39±l.21（6.9*）；ELISA+人免疫球蛋白标准品的为71.88±17.93（6.9*）。肌注人免疫球蛋白成品与合并血浆甲肝抗体效价之间相关性：RIA+血浆标准品的为6.52±0.85（13.9*）；RIA+人免疫球蛋白标准品的为90.42±13.01（13.9*）；ELISA+血浆标准品的为10.39±l.21（12.6*）；ELISA+人免疫球蛋白标准品的为13O.96±11.68（12.6*）。
3.讨论
从试验数据可以看出来，用酶联法（ELISA）法检测人免疫球蛋白标准品的检测结果均高于血浆标准品。采用相同的标准品，ELISA法的检测结果均高于RIA法。RIA法+人免疫球蛋白标准品和ELISA法+血浆标准品比较，后者的检测结果高于前者。从实际操作来看，ELISA法操作方便、快捷，处理样品量大但由于样品处理时稀释倍数较高会影响检测结果的准确性；RIA法操作较复杂，每次只能检测少量样品，但准确性较高。RIA法和ELISA法测得的血浆和成品的甲肝抗体效价与生产过程的蛋白质含量的浓缩倍数基本相当，甲肝抗体的稳定性较好，不会受生产过程的影响，且与蛋白质含量呈正相关。放免法和酶联法检测甲肝抗体效价都具有可行性，但检测血浆应采用血浆标准品、检测制品应采用人免疫球蛋白标准品。
参考文献：
[1]江砚芳，刘素芳，谢勇，倪永碧，张春丽，廖红茹，何学新，杨汇川. 人免疫球蛋白类制品甲肝抗体效价检测方法的探讨[J].中国输血杂志，2010，（06）：451-452.
论文作者:冯贞玉
论文发表刊物:《世界复合医学》2017年第4期
论文发表时间:2017/7/13
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