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【摘要】目的：探讨采用多波长高效液相色谱法测定杜仲3类有效成分的价值。方法：采用C18色谱柱（220mm×4.6mm,10um），将甲醇-0.1%的磷酸水溶液作为流动相，对其进行有效的梯度洗脱操作。流速为0.7ml/min；柱温为26℃；检测的波长为200nm，220nm，260nm，280nm。结果：色谱分离的效果较好，多波长高效液相色谱法能够有效的对杜仲中的绿原酸以及松脂醇二葡萄糖苷、京尼平苷酸、桃叶珊瑚苷进行同步测定。结论：应用多波长高效液相色谱法测定杜仲3类有效成份，操作便捷，有良好的重现性，为其杜仲药材的内在质量控制提供了前提条件，有较高的应用价值。
【关键词】杜仲；高效液相色谱法；有效成份；价值
【中图分类号】R284 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2020）01-0209-02
杜仲又叫胶树，属于杜仲科杜仲属[1]。树皮呈灰褐色且粗糙。叶呈椭圆形，薄革质。适宜在湿润的气候和光照充足的环境，有较强得抗冻性、抗寒性。本次研究中，分析探讨采用多波长高效液相色谱法测定杜仲3类有效成分的价值。具体如下：
1.仪器与试剂
1.1 仪器
超声波清洗器（功率250W,频率25kHz），FZ102型微型植物粉碎机，分析天平利用瑞士的Piecisa，高效液相色谱仪用戴安UltiMate。
1.2 试剂
将绿原酸、松脂醇二葡萄糖苷、京尼平苷酸、桃叶珊瑚苷作为对照品。杜仲皮，二次蒸馏水，甲醇。
2.方法
2.1 对照品溶液的制备
取绿原酸、松脂醇二葡萄糖苷、京尼平苷酸、桃叶珊瑚苷适量，将其放置于10ml的容量瓶中，加入色谱纯甲醇溶液将其溶解，并进行有效的稀释至刻度，使其京尼平苷酸的浓度达到1.2g/l，桃叶珊瑚苷的浓度为0.7g/l、松脂醇二葡萄糖苷的浓度为0.5g/l、绿原酸的浓度为3.3g/l的对照品混合储备液，将其进行冷藏。
2.2 供试品的制备
杜仲药材50g，利用FZ102型微型植物粉碎机将其研制为粉末状，去2g粉末将其放置于75%溶液60ml的甲醇中，对其进行称重，在用超声提取30min，冷置后在进行称重，有效的补足减少的量[2]。再对其过滤，将过滤的药渣重复操作。经过两次过滤后，减压浓缩，用相同浓度的甲醇溶液进行定容20ml。摇匀后以0.45um微孔滤膜过滤，可的其供试品。
2.3 色谱具备的条件
C18色谱柱（220mm×4.6mm,10um）；甲醇-0.1%磷酸水梯度洗脱作为流动相，流速为0.7ml/min；柱温为26℃；检测的波长为200nm，220nm，260nm，280nm。
3.结果与分析
3.1 优化提取条件
3.1.1提取方法：利用超声法和回流法 超声法：将2g的杜仲药材粉末放置于100ml的锥形瓶内，将其在哪找有效的方法以75%的甲醇溶液作为提取溶剂进行操作。回流法：将2g的杜仲药材粉末放置于100ml的圆底烧杯中，加入适当的甲醇溶液，将其回流30min后进行过滤，药渣重复操作，经过两次过滤利用相同浓度的甲醇溶液定容至20ml，摇匀并且以0.45um微孔滤膜进行有效的过滤。便可得到。
3.1.2超声提取条件优化 取将2g的杜仲药材粉末，共有九份。对超声提取杜仲主要成份的时间、次数、料液比以及溶液浓度进行比较各因素水平
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3.2 色谱条件的优化
3.2.1检测波长的选择：对样品采用PDA-3000光电二极管进行全波长的扫描，其作用是减少干扰，增强吸收。对四种物质的光谱性质进行有效利用。避免其单波检测的局域性，对其物质进行有效的定量分析。
3.2.2流动相的优化 实验中应用对其梯度洗脱进行不断的改进使其流动相比例具有准确性，达到杜仲有效成份检测的准确性。结果表明，当甲醇的水位流动相时，出峰较多，分离好，但有扫尾的现象。
3.3方法学考证
3.3.1线性关系考察 对四种物质有效进样5ul，进行55次平行测定，结果显示，四种物质的峰面积与其进样的浓度具有很好的线性关系。
3.2.2方法的稳定性、重复性以及回收率分析 选取相同批次的5份供试品，采用相关的方法对其进行测定，对重复的RSD进行有效计算，结果显示，在24h内，试品溶液的稳定性良好，且实验具有良好的重复性[4]。
3.4 杜仲样品测定
将2g的杜仲药材粉末进行称重，再去爱最优色谱条件下进行测定，结果分别在200nm，220nm，260nm，280nm的波长条件下进行有效测定。这种波长能够对各种化合物的含量进行精准的测定。
4.讨论
本实验采用多波长高效液相色谱法对杜仲3类有效成分进行有序的测定，在一定程度上可根据相同的色谱条件下采用不同的波长对其进行测定，对其多个成分进行同时测定，能够提高检测的效率和相关的精准度，且与相关的要求相符[3]。同时，进行进行方法学的考察，提取条件的优化，色谱条件的优化，最终确定其提取条件，在选定的色谱条件下，峰形较好。最后试验利用多长波同时检测的方法对其样品中四种物质的成分进行含量的测定，其结果精准可靠。能为杜仲内治疗的控制提供条件和相关的依据。
【参考文献】
[1]郑英,周兰,许亚玲,等.黔产杜仲叶不同采收期化学成分变化规律研究[J].世界最新医学信息文摘,2018,18(34):27-29.
[2]王慧彪,娄磊.小针刀联合杜仲散薰蒸治疗跟痛症疗效观察[J].中医药临床杂志,2018,10(5):917-919.
[3]陈转艮,丁少波,梁淑贞,等.关于杜仲3类有效成分检测中应用多波长高效液相色谱法测定的结果分析[J].中国实用医药,2017,20(1):193-194.
论文作者:加米拉·巴依木拉提
论文发表刊物:《医药前沿》2020年1期
论文发表时间:2020/2/24
标签：杜仲论文; 色谱论文; 波长论文; 甲醇论文; 高效论文; 溶液论文; 对其论文; 《医药前沿》2020年1期论文;