闫峰宾[1]2006年在《固始鸡重组白细胞介素-2作为免疫增强的研究》文中指出本研究通过原核系统表达了固始鸡重组IL-2蛋白，经过镍亲和层析柱纯化后，分别与鸡新城疫灭活苗和鸡痢疾志贺氏菌灭活苗同时免疫鸡群，以检测其对疫苗的免疫增强效果。共分三个试验。 试验一 将低温保存的基因工程表达菌pET28a-GSIL-2／BL_(21)(DE_3)复苏后，经过IPTG诱导，表达了固始鸡重组IL-2蛋白。SDS-PAGE电泳结果显示：目的蛋白分子量为18kD左右，薄层扫描分析表明表达量占菌体总蛋白的18％；经超声波裂解菌体，离心初步分离，目的蛋白主要以包涵体形式存在，但在细胞裂解上清中也有一定含量。将包涵体经过初步分离、变性、镍亲和层析柱纯化、复性，并对纯化的目的蛋白进行生物学活性检测。MTT试验结果表明：重组IL-2对经ConA活化的鸡脾淋巴细胞具有明显的体外增殖作用，这表明重组IL-2具有一定免疫增强作用。 试验二 固始鸡重组IL-2作为免疫增强剂对鸡新城疫灭活苗免疫效果的影响。5日龄200只鸡随机分为5组，每组40只鸡(公母各半)，即空白对照组，新城疫疫苗组，新城疫疫苗+IL-2(10ug)组，新城疫疫苗+IL-2(50ug)组，新城疫疫苗+IL-2(250ug)组。所有免疫组均于8日龄分别免疫接种相应疫苗，18天后各组均取10只鸡用于动物攻毒保护试验，并进行免疫器官指数、血清抗体效价和外周血T淋巴细胞亚群的测定，试验结果表明：重组IL-2蛋白增强了新城疫疫苗的免疫效果，提高了血清中抗体水平、T淋巴细胞CD3~+、CD4~+、CD8~+亚群水平、CD4~+／CD8~+的比值和各免疫器官指数，且部分指标差异达到显著水平(P＜0.05)，促进鸡免疫器官的生长发育，增强鸡的免疫功能。 试验三 固始鸡重组IL-2作为免疫增强剂对鸡志贺氏菌灭活苗免疫效果的影响。5日龄200只鸡随机分为5组，每组40只鸡(公母各半)，即空白对照组，鸡志贺氏菌苗组，鸡志贺氏菌苗+IL-2(10ug)组，鸡志贺氏菌苗+IL-2(50ug)组，鸡志贺氏菌苗+IL-2(250ug)组。所有免疫组于21日龄分别免疫接种相应疫苗，20天后各组均取10只鸡用于动物攻毒保护试验，并进行免疫器官指数、血清抗体效价和外周血T淋巴细胞亚群的测定，试验结果表明：重组IL-2蛋白增强了鸡志贺氏菌苗的免疫效果，提高了血清中抗体水平、T淋巴细胞CD3~+、CD4~+、CD8~+亚群水平、CD4~+／CD8~+的比值和各免疫器官指数，且部分指标差异达到显著水平(P＜0.05)，促进鸡免疫器官的生长发育，增强鸡的免疫功能。 本研究结果表明，固始鸡重组IL-2蛋白可作为免疫增强剂代替其他佐剂来使用，且很少量的IL-2蛋白就能发挥增强免疫效果的作用，为开发生产天然的免疫增强剂提供了新的途径。
李宏梅[2]2000年在《重组鸡白细胞介素-2作为免疫增强剂的研究》文中认为本研究通过真核表达系统表达了重组鸡白细胞介素-2（IL-2），观察其表达动态、保存条件，研究了作为免疫增强剂与法氏囊灭活苗联合应用的效果和对柔嫩艾美耳球虫感染雏鸡免疫系统的影响。分四个实验。 实验一 重组鸡白细胞介素-2的真核表达及表达动态：用重组穿梭质粒pSV·3PORTⅠ转染COS-7细胞瞬时表达重组鸡IL-2，以淋巴细胞增殖试验检测表达产物IL-2生物学活性及表达动态。结果表明：表达产物具有IL-2生物学活性，能使活化的淋巴细胞增殖，转染后在72 hr IL-2的活性开始升高，在96 hr达到最高。 实验二 重组鸡白细胞介素-2的保存条件：在不同温度下放置不同时间并检测其生物学活性。结果表明：在-20℃能保存较长时间并保持较高的生物学活性，可达7个月。 实验三 重组鸡白细胞介素-2作为免疫增强剂与法氏囊灭活苗联合使用的效果：试验设对照组和IBDV灭活苗接种组及IBDV灭活苗加IL-2组，对接种后鸡脾淋巴细胞淋转水平及攻毒后法氏囊病理变化进行比较，结果表明：加重组鸡IL-2能增强法氏囊灭活苗的免疫保护作用，淋转水平大幅度提高，病理变化减少率达20％。 实验四 重组鸡白细胞介素-2对柔嫩艾美耳球虫感染雏鸡细胞免疫的影响。试验设对照组、不同剂量卵囊感染组和不同剂量卵囊感染加IL-2组，在首次感染的基础上攻虫，对首次感染后和攻虫后不同时间的盲肠扁桃体和脾淋巴细胞的淋转水平和IL-2诱生活性进行检测，同时结合盲肠病变记分和粪便卵囊记数对结果进行分析。结果表明，首次感染后，单纯感染组盲肠扁桃体淋巴细胞淋转水平持续受抑制。各卵囊感染组脾淋巴细胞淋转水平在第4天均下降。1、2万卵囊感染组盲肠扁桃体淋巴细胞在感染后第4天（裂殖生殖阶段）能诱导产生较高水平的IL-2，随后产生IL-2能力不如对照组。1万组除第6天外，2、5万组除第4天外，脾淋巴细胞IL-2诱生活性均低于对照组。 辛宏构 丞用渴白翩回介承o作为免疫均强剂的研究感染的同时注射IL毛使1、人3万卯羹感染组盲肠扁桃体淋转水平分别在第4、6、9天高于单纯感染组：使＊2万卵羹感染组脾淋巴细胞淋转水平明显升高；任盲肠扁桃体淋巴细胞产生IL·2的堕体水平高于卵羹感染组和对照组；使】万卵羹感染组腴淋巴细胞产生o 的能力稍增强。攻虫后不同感染组盲肠扁桃体和脾淋转水平均出现下降趋势。盲肠扁桃体淋巴细胞！L－2 ＄生活性在第耳天高于对照组，而第9天较仇 脾淋巴细胞IL－2诱生活性在第一天下降，第9天升高．加tuZ后能提高盲祸扁桃体淋巴细胞淋转水平，但不显示剂坦的差异性：脾淋巴细胞淋转水平高于单纯感染组，第9天高于对照组。盲肠扁桃体淋巴细胞IL－2 f生在攻虫后第4天后增强，高于对照组：ILZ对脾淋巴细胞IL．2诱生活性没有显示增强作用。本实验结果说明：1．加入重组鸡几工可以使首次感染和攻虫后1万、2万卵羹感染组的病变记分和粪便中卵囊排出量明显降低。2．球虫感染雏鸡后引起脾和盲肠扁桃体淋巴细胞免疫抑制，随感染剂量的加大，免疫抑制程度加深。3．重组IL．2能提高首次感染盲肠扁桃体和脾淋巴细胞淋转水平，提高首次感染盲肠扁桃体1卜2诱生活性：从而改善球虫首次感染引起的脾和盲肠扁桃体免疫抑制。4．重组IL－2能提高攻虫后盲肠扁桃体和脾淋巴细胞淋转水平，对攻虫有免疫保护作用。
邢明伟, 曾祥伟, 侯志军, 柴洪亮, 华育平[3]2010年在《我国集约化家禽养殖中鸡白细胞介素-2的应用前景分析》文中研究指明鸡白细胞介素-2(IL-2)是由激活的T细胞分泌产生的糖蛋白,具有显著的免疫增强作用,不仅在T、B细胞的生长与分化和NK细胞的激活等方面发挥重要作用,而且与其他细胞因子一起发挥免疫功能,是一种能影响机体免疫反应各个方面的调节因子,因而在疾病的治疗上发挥着重要作用。我国集约化家禽养殖集现代遗传育种、饲料饲养、疾病防疫、环境控制等先进技术于一体,鸡IL-2的应用可实现有效的组装配套与综合利用。
余宁[4]2013年在《重组鸡IL-18复合免疫增强剂对新城疫疫苗免疫增强作用的研究》文中认为白细胞介素-18是一种重要的细胞因子，具有多种生物学活性，在介导细胞免疫、抵御病毒感染、抗肿瘤方面起着非常关键的作用。植物血凝素和2-脱氧葡萄糖分别在刺激淋巴细胞增殖、直接抑制病毒繁殖方面有着显著的效果，在畜禽病毒性疫病治疗方面已有广泛应用。新城疫疫苗免疫失败以及隐性感染使得非典型新城疫常有发生，给养殖业造成了巨大的经济损失。本试验以植物血凝素和2-脱氧葡萄糖的有效剂量和常用剂量，配合不同剂量重组鸡白细胞介素-18，配制成复合免疫增强剂，联合新城疫疫苗免疫雏鸡，研究其对新城疫疫苗的免疫增强效果。应用新城疫弱毒苗对7日龄雏鸡首免，5h后使用不同比例配方的复合免疫增强剂分别经口服、肌肉注射途径免疫雏鸡，分开饲养；21日龄先后用新城疫中等毒力疫苗和复合免疫增强剂二免。首免后每隔7d，每组随机取10只鸡，无菌心脏采血，分离淋巴细胞测定其淋巴细胞转化率；分离血清，ELISA检测试剂盒测定血清中白细胞介素-2和γ-干扰素含量；血凝和血凝抑制试验测定血清中新城疫抗体水平；雏鸡颈椎脱臼处死，称量并记录体重，解剖取其脾脏和法氏囊并称量记录，计算其免疫器官指数；35日龄时使用新城疫F48强毒株对各组剩余雏鸡经点眼滴鼻攻毒，观察并记录鸡群状态和死亡率。结果显示，肌肉注射含重组鸡白细胞介素-18蛋白的复合免疫增强剂能够显著提高鸡血清中γ-干扰素和白细胞介素-2水平，随白细胞介素-18蛋白量的增加，其表达水平有升高趋势，且以注射后第7d-14d表达含量最高，分别为43ng/L和70ng/L，至少在28d仍能维持较高水平；经口服途径免疫，含鸡白细胞介素-18重组菌的复合免疫增强剂也能显著提高鸡血清中γ-干扰素和白细胞介素-2水平，免疫后第7d，其表达水平最高，分别为50ng/L和62ng/L，之后稍有下降，随IL-18重组菌量的增加，γ-干扰素和白细胞介素-2表达水平变化不大。复合免疫增强剂经肌肉注射、口服途径均能显著提高新城疫疫苗免疫鸡群的淋巴细胞转化率、抗体水平和免疫器官指数，且肌肉注射效果较口服效果好，随白细胞介素-18蛋白量的增加，淋转率和抗体水平均有升高趋势，平均抗体滴度在二免7d左右达到最高值10.2(log2)，对免疫器官的早期发育具有显著的促进效果，对脾脏中期发育也有促进作用，能够明显提升免疫鸡群对新城疫强毒株的抵抗力。试验结果表明，由重组鸡白细胞介素-18、植物血凝素和2-脱氧葡萄糖组成的复合免疫增强剂，在诱生白细胞介素-2和γ-干扰素、促进淋巴细胞增殖和转化、提高新城疫抗体水平、促进免疫器官发育、提升对新城疫毒株的抵抗力方面，能够显著增强新城疫疫苗的免疫效果，为新型免疫增强制剂和抗病毒制剂的生产、应用提供了理论基础。
许健, 樊拥军, 李龙, 万旺军, 李建荣[5]2004年在《鸡白细胞介素2在毕赤酵母细胞中的表达》文中认为目的 利用Pichia酵母真核细胞表达系统表达重组鸡白细胞介素 2 (IL 2 ) ,为大量制备鸡IL 2奠定基础。方法 将ConA激活的鸡脾脏T淋巴细胞中扩增得到的我国地方品种萧山鸡IL 2基因 ,克隆入pPIC9载体中构建重组质粒。将重组质粒电转化毕赤酵母GS115感受态细胞 ,甲醇诱导蛋白质表达。结果 SDS PAGE和Westernblot均在 30ku处检测到特异条带。结论 表明重组鸡IL 2基因在毕赤酵母GS115中获得表达
刘仲藜, 王琳雅, 覃嘉兴, 赵金, 平迪[6]2019年在《猪白细胞介素-2重组乳酸菌对小鼠小肠结构影响的研究》文中进行了进一步梳理为了评价猪白细胞介素-2重组乳酸菌(porcine interleukin-2 recombinant lactic acid bacteria,PIL-2-RLAB)对小鼠小肠结构的影响,试验用磷酸缓冲液(PBS)、乳酸菌(LAB)、PIL-2-RLAB分别灌胃21只4周龄小鼠1周,记录各组小鼠体重增长变化并绘制增重曲线,颈椎脱臼法处理小鼠并取十二指肠进行H.E.染色制作组织切片,显微镜下观察肠绒毛形态变化,测量肠绒毛长度(深度),观察肠上皮细胞形态结构。结果表明:LAB和PIL-2-RLAB均可加快小鼠体重增长,显著促进肠绒毛生长(P<0. 05),改善肠上皮细胞结构的完整性。说明PIL-2-RLAB有改善肠组织内部结构,增强机体免疫力的作用,或许可用于动物肠道疾病的防治。
周红潮, 王慧, 张旭, 时坤, 李建明[7]2019年在《药物抗牛病毒性腹泻病毒的研究进展》文中研究表明目前,牛病毒性腹泻病毒(BVDV)感染尚无特异性的预防疫苗、治疗方法和抗病毒药物,开发针对牛病毒性腹泻的新型有效药物势在必行。然而,药物抗BVDV的作用机制及靶点不够明确,应用于治疗动物疾病是否有效没有针对性研究,一直以来是制约开发更多的抗BVDV药物的瓶颈问题。文章总结了BVDV侵染细胞机制、药物抗BVDV作用途径,对药物抗BVDV作用进行阐述,以期为药物抗BVDV作用机制研究提供参考,为开发更多有效、低毒、无耐药性的药物提供思路与借鉴。
参考文献：
[1]. 固始鸡重组白细胞介素-2作为免疫增强的研究[D]. 闫峰宾. 河南农业大学. 2006
[2]. 重组鸡白细胞介素-2作为免疫增强剂的研究[D]. 李宏梅. 南京农业大学. 2000
[3]. 我国集约化家禽养殖中鸡白细胞介素-2的应用前景分析[J]. 邢明伟, 曾祥伟, 侯志军, 柴洪亮, 华育平. 东北农业大学学报. 2010
[4]. 重组鸡IL-18复合免疫增强剂对新城疫疫苗免疫增强作用的研究[D]. 余宁. 河南科技大学. 2013
[5]. 鸡白细胞介素2在毕赤酵母细胞中的表达[J]. 许健, 樊拥军, 李龙, 万旺军, 李建荣. 西安交通大学学报(医学版). 2004
[6]. 猪白细胞介素-2重组乳酸菌对小鼠小肠结构影响的研究[J]. 刘仲藜, 王琳雅, 覃嘉兴, 赵金, 平迪. 黑龙江畜牧兽医. 2019
[7]. 药物抗牛病毒性腹泻病毒的研究进展[J]. 周红潮, 王慧, 张旭, 时坤, 李建明. 黑龙江畜牧兽医. 2019
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