侯春燕1，2 刘娟2，3 付翔杰2，3 杨国荣4 瞿家权2，4 谭潭2，3（通讯作者）
1.郴州市第一人民医院南院耳鼻喉科；2.南华大学转化医学研究所；
3.郴州市第一人民医院检验科；4.郴州市第一人民医院肿瘤内科 湖南郴州 423000
【摘 要】目的：了解羊齿天门冬根茎提取物对抑制人鼻咽癌细胞体外侵袭转移的作用。方法：选择处于生长期的人鼻咽癌细胞，使用MTT法进行检测羊齿天门冬根茎乙酸乙酯部位对人鼻咽癌细胞体外侵袭转移的影响。结果：和对照组进行对比，在乙酸乙酯浓度为0.1μg/mL差异明显（P＜0.05）。同时乙酸乙酯浓度为0.3、1.0、3.0、10.0μg/mL的时候差异明显（P＜0.05），而且具有较强的依赖性，其IC50为1.04（μg/mL）。结论：羊齿天门冬根茎乙酸乙酯部位对人鼻咽癌细胞体外侵袭转移具有明显的抑制作用。
【关键词】百合科；乙酸乙酯部位；骨肉瘤；细胞增殖；环氧化酶２
羊齿天门冬是比较常见的药用植物，并且常常选择其块根进行碾碎进行入药，近年来经过大量研究分析羊齿天门根部所含有的乙酸乙酯部位对抑制人鼻咽癌细胞扩散具有重要的作用[1]。为了验证羊齿天门冬根茎乙酸乙酯部位的作用，本文调制不同浓度的羊齿天门冬根茎乙酸乙酯溶液，并且将其应用与人鼻咽癌细胞当中，了解其发生的变化。现报道如下。
１、材料与方法
1.1材料
1.1.1受试物
选择优质的羊齿天门冬根茎药材进行试验，并且经过医学院进行鉴定为羊齿天门冬干燥根茎。在将药材碾碎之后，配比为药材10倍量的浓度为90%乙醇进行浸提三次，每次的时间为四个小时，然后合并浸提液，获得黄褐色乙醇初提取物（AF-E）。所得浓缩液使用乙酸乙酯进行提取，从而获得淡黄色结晶乙酸乙酯部位（AF-A）。最后将乙酸乙酯部位提取物使用二甲基亚砜（DM-SO）进行溶解后，将其配置成1ｇ/ｍＬ的溶液，放在-２０℃冰箱中进行储存。
1.1.2细胞
人鼻咽癌细胞由某医学院肿瘤所无偿捐赠，并且人鼻咽癌细胞在温度为37摄氏度、二氧化碳浓度为5%的实验室条件下开展实验，然后使用含有浓度为10%的小牛血清在RMPI-1640培养液当中进行培养。最重要的要保障研究所使用的细胞还处于生长期，具有较高的活性。
1.2方法
选择处于生长期的人鼻咽癌细胞，并且将细胞的浓度调节为１.0×103/180μL接种到规模为96孔的培养板当中，并且在每个孔当中加入20μL的浓度为300μg/mL的AF-A工作液，使孔中的溶液浓度达到100.0μg/mL，然后给对照组的每个孔当中放入相同量的浓度为0.02%DMSO的完全培养基，使用顺氯胺铂（DDP）当做阳性对照组，培养基当中的溶液浓度为３μg/mL。每组设置三个复孔，放在培养箱当中进行孵育48个小时之后，加入MTT液20μL/孔，再接着进行培养四个小时，在进行离心五分钟之后，添加100μL/孔的DMSO液。最后使用570nm波长进行测量液体的吸光度值（Ａ值）。根据IR＝（１-实验组Ａ均值／对照组Ａ均值）×100%这个公式进行计算细胞的活性。
1.3统计学方法
把研究是数据输入SPSS22.2软件包，使用统计学原理进行分析，所需要进行计算的数据使用例数（n）表示，计算结果使用百分数（%）显示，如果出现P＜0.05的情况，则什么统计具有意义。
2、结果
经过对羊齿天门冬根茎乙酸乙酯部位的作用进行分析得出，乙酸乙酯部位对人鼻咽癌细胞体外侵袭转移具有抑制作用。和对照组进行对比，在乙酸乙酯浓度为0.1μg/mL，具有明显的差异，有统计学意义（P＜0.05）。同时乙酸乙酯浓度为0.3、1.0、3.0、10.0μg/mL的时候，具有明显的差异，有统计学意义（P＜0.05），而且具有较强的依赖性，其IC50为1.04（μg/mL），具体内容如表1所示。
表1 羊齿天门冬根茎乙酸乙酯部位对人鼻咽癌细胞体外侵袭转移的影响
３、讨论
我国具有较久的中药渊源，许多植物均被人们用于治疗各种疾病。随着我国出现鼻咽癌的人数越来越多，人们发现在我国有许多的药用植物当中，存在许多可以抑制肿瘤的的药物，对控制肿瘤患者的病情具有重要的作用[2]。经过大量研究可知，从百合科天然植物当中提取的大蒜素、白藜芦醇，具有较好的抗肿瘤活性的作用。同时属于百合科的植物的羊齿天门冬，其根茎当中所含有的乙酸乙酯，经过提取，应用到患者身上，具有缓解疼痛、抑制肿瘤、对抗炎症的作用。经过近几年研究显示，乙酸乙酯不但可以具有与非甾体抗炎药一样缓解疼痛、对抗炎症的作用，其也与人鼻咽癌细胞侵袭具有密切的关系[3]。人们经过不断进行试验之后发现，乙酸乙酯可以有效控制人鼻咽癌细胞的活性，稳定患者的病情，因此在临床上也开始使用乙酸乙酯进行治疗鼻咽癌细胞体外侵袭转移的情况。
经过本次研究发现，和对照组进行对比，在乙酸乙酯浓度为0.1μg/mL，具有明显的差异，有统计学意义（P＜0.05）。同时乙酸乙酯浓度为0.3、1.0、3.0、10.0μg/mL的时候，具有明显的差异，有统计学意义（P＜0.05），而且具有较强的依赖性，其IC50为1.04（μg/mL），从而可以知道羊齿天门冬根茎乙酸乙酯部位不同浓度对人鼻咽癌细胞体外侵袭转移的抑制作用也会有所不同，但是也可以明显看到乙酸乙酯对抑制肿瘤明显的效果。
综上所述，在对羊齿天门冬根茎乙酸乙酯部位进行有效筛选，可以乙酸乙酯部位明显具有人鼻咽癌细胞活性作用，可以有效提高肿瘤治愈的几率，维护患者的安全。
参考文献：
[1]李明勇，李蓉，吴科锋，梁念慈.半边旗提取物5F对人鼻咽癌CNE-2Z细胞生长的抑制作用[J].时珍国医国药.2015（02）：452-453.
[2]王丹云，刘佳，印明柱，李雪婷，娄阁，刘运铎，陈秀玮.白桦酯醇诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡及作用机制的研究[J].肿瘤.2016（04）：121-122.
[3]孔霞，顾帝水，陈锦，黄培春.口虾蛄提取物对人鼻咽癌细胞P53、COX-2和VEGF表达的影响[J].中国病理生理杂志.2015（02）：88-89.
第一作者：
侯春燕（1983-），女，河南信阳人，汉族，医学硕士，耳鼻喉科主治医师，主要研究方向：鼻咽癌临床及基础研究。通讯作者：谭谭（1981-），男，湖南祁阳人，医学硕士，助理研究员，研究方向：鼻咽癌癌变机理及靶向治疗。
基金项目：本课题受湖南省卫生厅科研课题（B2010－127）、（B2011－135）和郴州市第一人民医院科研课题（（N2010-025），（N2010-024））资助。
论文作者:侯春燕1，2,刘娟2，3,付翔杰2，3,杨国荣4,瞿
论文发表刊物:《航空军医》2016年第12期
论文发表时间:2016/7/20
标签：乙酸乙酯论文; 鼻咽论文; 癌细胞论文; 天门冬论文; 羊齿论文; 根茎论文; 浓度论文; 《航空军医》2016年第12期论文;