一、不同浓度硒对大鼠尿氟排泄及氟致肾损害影响的研究（论文文献综述）
张晓峰[1]（2019）在《富硒和胆碱预混料对围产期奶牛生产性能的影响》文中进行了进一步梳理围产期是奶牛一个泌乳周期中最为关键的时期,也是奶牛能量代谢病高发的阶段。围产期奶牛因干物质采食量（DMI）减少,胎儿后期生长和开始泌乳对能量的需求增多,导致过度的体脂动员产生的非酯化脂肪酸（NEFA）在肝脏中难以全部氧化供能,再酯化为甘油三酯（TG）而沉积,最终引发脂肪肝,损坏肝功能,影响机体健康而降低生产性能,给奶牛养殖造成极大的经济损失。本试验选取96头2～4胎次的健康荷斯坦奶牛,采用完全随机区组设计,依据胎次、体况、年龄、预产期和上一胎次产奶量相近原则分成4组（每组24头）:对照组（Control）、低剂量组（LDG）、中剂量组（MDG）和高剂量组（HDG）。各组依次在TMR日粮基础中分别添加含硒和胆碱的预混料（护肝宝）为0、40、80和120g/头·d,预混料拌于晨饲TMR前1/3中,预试期从预产前21d至15d,正试期从预产前14d至产后28d。研究其对围产期奶牛生产性能、血液生化指标、疾病发生率,血液、肝组织和乳中硒含量、机体抗氧化能力、肝组织中关键抗氧化蛋白和脂质代谢蛋白的基因或蛋白表达的影响。结果表明:1、日粮中添加富硒和胆碱预混料,各组奶牛DMI、体重（BW）、体况评分（BCS）和分娩评分（CC）差异均不显着（P>0.05）;奶牛产乳量、4%乳脂校正乳（FCM）、乳脂肪、乳蛋白、乳糖、乳中固形物、乳中尿素氮含量影响均不显着（P>0.05）,但MDG和HDG组产奶量分别比Control组高1.8和1.6kg/d。添加富硒和胆碱预混料对提高产奶量有促进作用。2、日粮中添加富硒和胆碱预混料对围产期奶牛血液中血糖（Glu）、游离脂肪酸（NEFA）、β-羟丁酸（BHBA）、总胆固醇（TC）、血肌酐（Crea）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、碱性磷酸酶（ALP）、血钙（Ca）、磷（P）影响均不显着（P>0.05）。日粮中添加80和120 g/头·d的富硒和胆碱预混料,奶牛的血液甘油三酯（TG）、谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）和血清尿素氮（BUN）水平显着低于Control和LDG组（P<0.05）,且血液总蛋白（TP）水平显着高于Control和LDG组（P<0.05）。日粮中添加富硒和胆碱预混料能有效降低肝损伤,有效添加量为80g/头·d。3、日粮中添加80和120 g/头·d富硒和胆碱预混料（MDG和HDG）的奶牛,其血液、肝组织和乳中的硒显着高于Control和LDG组（P<0.05）,MDG和HDG组间无显着差异（P>0.05）。日粮中添加富硒和胆碱预混料能提高血液、肝组织和牛奶中的硒含量。4、与Control相比,日粮中添加40、80和120 g/头·d富硒和胆碱预混料（LDG、MDG和HDG）能显着降低肝组织中TG含量（P<0.05）;与LDG组相比,MDG和HDG组奶牛肝组织中的TG也显着下降（P<0.05）,但MDG和HDG组间无显着差异（P>0.05）。MDG和HDG组奶牛肝组织中总抗氧化能力（T-AOC）、总超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力均显着高于Control和LDG组（P<0.05）,而丙二醛（MDA）和过氧化氢（H2O2）显着低于Control和LDG组（P<0.05）,MDG和HDG组间抗氧化指标无显着差异（P>0.05）。日粮添加80 g/头·d富硒和胆碱预混料可有效提高奶牛机体的抗氧化能力,有效清除奶牛肝组织中的TG。5、日粮中添加富硒和胆碱预混料对围产期奶牛肝脏GPx1的mRNA相对表达量均显着高于对照组（P<0.05）,且随着添加量的增加相对表达量逐步增加,但各试验组间差异均不显着（P>0.05）。GPx4的mRNA相对表达量无显着性影响（P>0.05）。显着提高MTTP 和 ApoB100 的 mRNA 相对表达量（P<0.05）,MDG 和 HDG 组的 MTTP 和 ApoB100的mRNA相对表达量显着高于Control和LDG组奶牛（P<0.05）,但MDG和HDG组间异不显着（P<0.05）。结论:围产期奶牛日粮中添加80 g/头·d的富硒和胆碱预混料有一定的提高奶产量作用,能提高奶牛血液、肝组织和牛奶中的硒含量,促进肝组织中GPx1、MTTP和ApoB100的mRNA表达量,从而提高机体的抗氧化能力,促进奶牛机体健康。
常凯,王裕,庞文彪,高继萍,陈朝阳,宋国华[2]（2017）在《硒对氟致大鼠肾小管上皮细胞线粒体膜电位改变的拮抗作用》文中研究说明目的探究硒对氟致大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E细胞）线粒体膜电位改变的拮抗作用。方法实验共设4组:染氟组（5mg/L和20mg/L的氟化钠）、染硒组（0.0171mg/L和0.0342mg/L的亚硒酸钠）、硒干预组（氟化钠和亚硒酸钠联合干预）和对照组,按照分组干预NRK-52E细胞48 h。流式细胞仪检测其线粒体膜电位,超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）和总抗氧化力（T-AOC）测试盒测定酶的活性。结果与对照组比,随着氟化钠浓度的升高,染氟组NRK-52E细胞线粒体膜电位下降（P<0.05或P<0.01）且SOD、T-AOC、GSH-PX和CAT酶活性均降低（P<0.05或P<0.01）。与染氟组相比,相对应的硒干预组线粒体膜电位升高（P<0.01）。与20mg/L的染氟组比较,相对应硒干预组的SOD、T-AOC、GSH-PX和CAT酶活性均升高（P<0.05）。与0.0171 mg/L染硒组相比,相对应的硒干预组线粒体膜电位降低（P<0.01）且T-AOC、GSH-PX和CAT酶活性均降低（P<0.01或P<0.05）。5 mg/L加氟组与加硒组相比,线粒体膜电位显着变化（P<0.01）,但SOD、GSH-PX、CAT、T-AOC酶活性均无显着变化。20mg/L加氟组与加硒组相比,线粒体膜电位具有显着性差异（P<0.01）且SOD、GSH-PX、CAT、T-AOC酶活性均有显着性差异（P<0.01）。结论一定浓度的硒可以拮抗氟诱导大鼠肾小管上皮细胞线粒体膜电位下降,可能通过恢复抗氧化酶活性实现。
柯露露[3]（2017）在《内质网应激在不同钙营养条件下母鼠氟露后仔鼠脑细胞凋亡中的作用》文中研究指明氟是一种非金属化学元素,广泛分布在自然界中,也是人体必需的微量元素,它可通过水、空气和土壤等介质进入人体,造成人体长期过量摄入,在机体中积累,从而引起机体损伤,称为地方性氟中毒,主要表现在骨骼和牙齿上,临床上称为氟骨症和氟斑牙。人体过量氟会通过胎盘屏障进入子代机体,并在子代机体中积累,并透过血脑屏障影响子代脑发育。低钙膳食可能是氟中毒的主要诱发和促进因素之一,能引起内质网过度应激,增加脑细胞凋亡率,增强氟对神经毒性作用,而高钙膳食能明显减轻氟中毒引起的机体损伤。氟中毒对脑发育及其功能损伤的相关研究已较深入,膳食钙对氟中毒致骨相器官损伤影响的也有所报道,但膳食钙对氟中毒致非骨相器官,特别是对脑损伤影响却鲜有报道。本实验在实验室前期研究的基础上,探讨内质网应激在不同钙营养条件下氟暴露致仔鼠脑细胞凋亡中的作用及分子机理,探寻钙对母鼠氟暴露致仔鼠脑细胞凋亡影响的分子机理,评价饮食钙对氟中毒的干预作用,为地氟病的防治提供基础资料。实验时选择清洁级健康初断乳的SD雌性的大鼠共50只,雄性的大鼠共25只（供交配）,适应一周之后,随机分成5个组。对照组（Control）饮食自来水（水中氟含量<0.2 mg/L）联合常食饲料（钙含量0.79%）;高氟组（F）饮食100 mg/L的NaF溶液联合常食饲料;低钙组（LCa）饮食自来水联合低钙饲料（钙含量0.063%）;高氟低钙组（F+LCa）饮食100 mg/L的NaF溶液联合低钙饲料;高氟高钙组（F+HCa）饮食100 mg/L的NaF溶液联合高钙饲料（钙含量7%）。雄性大鼠饮用自来水,食用标准饲料（水中氟含量<0.2 mg/kg,钙含量为7～10 g/kg）;溶剂均为自来水。雌鼠染毒3个月后,以母鼠氟斑牙及血/尿氟含量作为亚慢性氟中毒动物模子复制成型的标准,之后以雄性和雌性比例为1:1合笼交配,取胎鼠、14天及28天日龄仔鼠进行相关的测试实验。实验各组均采用母/仔鼠体重和仔鼠血/尿氟、血/尿钙含量、凋亡情况、脑海马神经细胞内质网应激伴侣分子BIP、CHOP、CRT蛋白/基因及脑海马神经细胞相关凋亡信号通路分子Bcl-2、Caspasel2、JNK蛋白/基因表达水平作为观察指标。实验结果如下:（1）氟中毒动物模型的检测结果:氟暴露3个月之后观察母鼠切齿氟斑牙症状,跟对照组对比,F组与F+LCa组切齿外轮廓出现清晰黄色和白色相间条纹,氟斑牙症状显着,有白斑或者缺损;F+HCa组切齿外轮廓有轻微的黄色和白色相间条纹,氟斑牙症状较轻。跟对照组对比,F+LCa组的血氟的浓度显着性升高（p<0.05）,F组和F+LCa组母鼠尿氟浓度均极显着上升（p<0.01）,F+HCa组母鼠尿氟浓度显着性下降（p<0.05）。以上结果表明,母鼠氟暴露3个月以后,亚慢性氟中毒动物模型复制成型。（2）体重称量结果:跟对照组对比,LCa组和F+LCa组母鼠体重均极显着减少（p<0.01）,F组和F+HCa组母鼠体重均无显着性差异（p>0.05）;14日龄仔鼠F组、LCa组和F+LCa组得仔鼠体重均极显着减少（p<0.01）F+HCa组仔鼠体重无显着性差异（p>0.05）;28日龄仔鼠LCa组和F+LCa组仔鼠体重均极显着减少（p<0.01）,F组和F+HCa组得仔鼠体重均显着性减少（p<0.05）。（3）血氟/钙与尿氟/钙含量测定结果:跟对照组对比,F+LCa组血氟浓度均极显着增加（p<0.01）,14日龄雄鼠F组血氟浓度均显着性增加（p<0.05）,28日龄雄鼠F组血氟浓度极显着增加（p<0.01）;14日龄雄鼠和28日龄仔鼠LCa组和F+LCa组血钙的浓度均极显着减少（p<0.01）,14日龄雌鼠F+LCa组血钙含量显着减少（p<0.05）,28日龄雌鼠F+HCa组血钙含量显着性增加（p<0.05）,28日龄雄鼠F+HCa组血钙含量极显着增加（p<0.01）;各组仔鼠F组和F+LCa组尿氟含量均极显着增加（p<0.01）,F+HCa组尿氟含量显着性增加（p<0.05）;各组仔鼠LCa组和F+LCa组尿钙浓度均极显着减少（p<0.01）,14日龄雄鼠和28日龄仔鼠F+HCa组尿钙含量极显着增加（p<0.01）,14日龄雌鼠F+HCa组尿钙含量显着性增加（p<0.05）。跟F组对比,14日龄仔鼠F+LCa组血氟浓度均极显着增加（p<0.01）,28日龄仔鼠和14日龄雄鼠LCa组血氟含量显着性减少（p<0.05）;14和28日龄雄鼠F+LCa组血钙含量极显着减少（p<0.01）,14和28日龄雌鼠F+LCa组血钙含量显着性减少（p<0.05）,28日龄仔鼠F+HCa组血钙含量极显着增加（p<0.01）,28日龄仔鼠LCa组血钙含量显着性减少（p<0.05）;各组仔鼠LCa组尿氟含量极显着减少（p<0.01）,F+HCa组尿氟含量显着性减少（p<0.05）;各组仔鼠的LCa组和F+LCa组尿钙的浓度均极显着减少（p<0.01）,28日龄仔鼠和14日龄雄鼠F+HCa组尿钙含量极显着增加（p<0.01）,14日龄雄鼠F+HCa组尿钙含量显着性增加（p<0.05）。（4）相关氧化应激血液指标测定结果:与对照相比,14日龄雌鼠F+HCa组与各组仔鼠F组和F+LCa组血清中MDA含量均极显着上升（p<0.01）;各组仔鼠F组和F+LCa组血清中SOD、GSH-Px和T-AOC活力均极显着下降（p<0.01）;LCa组和F+HCa组仔鼠血清中T-AOC活力均显着性下降（p<0.05）。跟F组对比,14日龄的仔鼠和28日龄的雌鼠F+LCa组的血清中MDA的浓度均极显着上升（p<0.01）,28日龄仔鼠和14日龄雄鼠LCa组和F+HCa组的血清中MDA浓度均显着下降（p<0.05）;各组仔鼠F+HCa组血清中SOD、GSH-Px和T-AOC活力显着性上升（p<0.05）;F+LCa组血清中,28日龄仔鼠SOD、T-AOC和28日龄雌鼠GSH-Px与14日龄雌鼠SOD及14日龄雄鼠GSH-Px、T-AOC活力均显着下降（p<0.05）,14日龄雌鼠和28日龄的雄鼠GSH-Px的活力均极显着下降（p<0.01）;LCa组血清中,各组仔鼠T-AOC与28日龄仔鼠和14日龄雌鼠GSH-Px及14日龄仔鼠SOD活力均显着上升（p<0.05）,14日龄的雄鼠GSH-Px和28日龄雄鼠SOD活力均极显着上升（p<0.01）。（5）脑海马细胞凋亡检测结果:胎鼠和仔鼠对照组和LCa组脑海马组织凋亡细胞比较少见,F组和F+LCa组凋亡细胞显着上升,F+HCa组凋亡细胞跟F组的对比有减少的趋势。（6）PCR检测结果:跟对照组对比,F组与F+LCa组胎鼠和仔鼠BIP、CHOP、CRT、Caspase12及JNK基因表达水平均极显着上升（p<0.01）,Bcl-2基因表达水平均极显着下降（p<0.01）;F+HCa组胎鼠和仔鼠BIP、CHOP、CRT、Caspase12及JNK基因表达水平均显着性上升（p<0.05）,Bcl-2基因表达水平均显着下降（p<0.05）;LCa组胎鼠和14日龄雌鼠Bcl-2基因表达水平均显着下降（p<0.05）及Caspase12和JNK基因表达水平均显着性上升（p<0.05）,28日龄雄鼠的CRT基因表达水平均显着性上升（p<0.05）。跟F组对比,F+LCa组胎鼠和14日龄雌鼠及28日龄仔鼠BIP和CHOP基因与28日龄仔鼠Caspase12基因和28日龄雌鼠CRT基因表达水平均极显着上升（p<0.01）,胎鼠及仔鼠Bcl-2基因表达水平均显着下降（p<0.05）,胎鼠和14日龄雌鼠Caspase12和JNK基因及14日龄雄鼠Caspase12基因与28日龄的仔鼠JNK基因表达水平均显着性上升（p<0.05）;LCa组胎鼠和28日龄仔鼠的BIP、CHOP、CRT基因及14日龄仔鼠的Caspase12和JNK基因表达水平均显着性下降（p<0.05）,胎鼠和28日龄雄鼠Bcl-2基因表达水平均显着性上升（p<0.05）,14日龄仔鼠和28日龄14日龄的仔鼠和28日龄的雌鼠的Bcl-2基因表达水平全都极显着上升（<0.01）。（7）Western blot分析结果:与对照组相比,F组和F+LCa组,胎鼠和14日龄雌鼠BIP、CHOP和CRT蛋白、14日龄雄鼠和28日龄雌鼠的BIP和CHOP蛋白、28日龄雄鼠CHOP蛋白、胎鼠和14/28日龄雄鼠Caspase12和JNK蛋白、14日龄雌鼠的JNK蛋白及28日龄仔鼠的Caspase12蛋白表达水平均极显着上升（p<0.01）,胎鼠及仔鼠Bcl-2蛋白表达水平均极显着下降（p<0.01）;F+HCa组,胎鼠BIP、CHOP和CRT蛋白、14日龄雌鼠BIP和CRT蛋白、14日龄雄鼠BIP、CHOP和Caspase12蛋白、28日龄雌鼠BIP和Caspase12蛋白及28日龄雄鼠的CHOP蛋白表达水平均显着上升（p<0.05）,14日龄的雄鼠和28日龄的雌鼠Bcl-2蛋白的表达水平均极显着下降（p<0.01）。跟F组对比,F+LCa组的胎鼠和28日龄雄鼠BIP、CHOP和CRT蛋白、14日龄雌鼠CHOP和CRT蛋白、14日龄雄鼠BIP蛋白及28日龄雌鼠CRT、Caspasel2、JNK蛋白表达水平均显着上升（p<0.05）;LCa组胎鼠、14日龄仔鼠及28日龄雌鼠BIP和CHOP蛋白表达水平均显着下降（p<0.05）,胎鼠、14日龄雌鼠及28日龄雄鼠的Caspase12蛋白表达水平均显着下降（p<0.05）,胎鼠及仔鼠Bcl-2蛋白表达水平均极显着上升（p<0.01）及JNK蛋白表达水平均极显着下降（p<0.01）。综上所述,母鼠饮水型氟中毒会改变子代血/尿氟浓度,降低血液中相关氧化应激酶活性,增加丙二醛含量,使脑海马神经细胞内质网应激伴侣分子BIP、CHOP、CRT基因/蛋白升高,脑海马神经细胞相关凋亡信号通路分子Caspasel2、JNK基因/蛋白表达水平也升高Bcl-2基因/蛋白表达水平却下降,从而脑海马凋亡细胞增加,最终损伤子代脑细胞。结果提示,内质网应激在不同钙营养条件下母鼠氟暴露后仔鼠脑凋亡中起重要作用,食料高钙（钙含量7%）干预母鼠饮水型氟中毒致仔鼠脑细胞凋亡的分子机理可能是通过上调Bcl-2表达、下调BIP、CHOP、CRT、Caspase12及JNK表达,从而抑制氟暴露致大鼠脑细胞凋亡过度,而母鼠食用低钙饲料（钙含量0.063%）,同时饮用高氟水,会加重对仔鼠脑细胞产生毒性作用。
钱亚利[4]（2014）在《Nrf2-ARE通路在氟砷联合染毒大鼠肝毒性及硒干预作用中的调控机制》文中研究说明目的本研究通过动物实验探讨氟砷联合染毒及硒干预对大鼠肝脏的毒性效应,从肝功能改变、氧化应激并侧重核因子NF-E2相关因子-抗氧化反应元件（nuclear factor erythroid 2-related factor 2-antioxidant responsive element,Nrf2-ARE）通路相关蛋白角度探讨氟砷联合染毒大鼠肝毒性及硒干预作用对Nrf2-ARE通路的调控机制;并在剂量-效应关系基础上分析氟砷联合肝脏毒性的作用模式;为探寻氟砷联合暴露肝脏毒性的机制及其防治研究提供理论及科学实验依据。方法清洁级SD大鼠78只,随机分为13组,每组6只,雌雄各半。用氟化钠（NaF）、亚砷酸钠（NaAsO2）和亚硒酸钠（Na2Se03）溶于去离子水中灌胃染毒。分别为:对照组、低氟组（5mg/kg）、高氟组（20mg/kg）、低砷组（2.5 mg/kg）、高砷组（10mg/kg）、低氟低砷组、低氟高砷组、高氟低砷组、高氟高砷组、硒干预组（O.1mg/kg）、高氟+硒干预组、高砷+硒干预组、高氟高砷+硒干预组,连续染毒6个月。实验结束后,收集大鼠尿液、血清、肝脏样本,用于检测:①内剂量标志:尿氟（UrinaryFluorine,UF）、尿砷（Urinary Arsenic,UAs）;②靶剂量标志:肝氟（Fluorine in Liver,LF）、肝砷（Arsenic in Liver,LAs）;③血清肝功能指标:丙氨酸氨基转移酶（Alamine aminotransferase,ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（Aspartate aminotransferase,AST）、总蛋白（Total protein,TP）;④肝组织氧化损伤指标:丙二醛（malondialdehyde,MDA）、谷胱甘肽（glutathione,GSH）、髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）;⑤肝组织Nrf2-ARE通路相关指标:Nrf2、血红素氧化酶-1（hemeoxygenase-1,HO-1）、依赖还原型辅酶/Ⅱ醌氧化还原酶（NAD（P）H:quinineoxidoreductase-1,NQO1）。UF、LF 浓度测定采用氟离子选择电极法,UAs、LAs浓度测定采用氢化物-电感耦合等离子体发射光谱法（ICP-OES）,奥林巴斯AU400全自动生化分析仪检测血清中ALT、AST、TP,MDA、GSH、MPO、肝组织总蛋白浓度测定按试剂盒说明操作,肝组织Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达采用免疫组织化学技术。结果①光镜检查低氟组和低砷组大鼠肝细胞发生轻度水变性、液化坏死,高氟组、高砷组、低氟低砷组、低氟高砷组、高氟低砷组大鼠肝细胞上述病理改变程度较低氟组和低砷组加重,肝细胞轻度再生,高氟高砷组大鼠肝细胞水变性、液化坏死情况较上述各组进一步加重,轻度脂肪变,轻度再生;硒干预可使上述病变明显减轻。②F、UF、LF与ALT、AST为正相关关系（P<0.05或P<0.01）,与TP相关关系不明显（P>0.05）,As、UAs、LAs 与 ALT、AST 为正相关关系（P<0.05 或P<0.01）,与TP相关关系不明显;ALT、AST随着氟砷剂量的增加而升高（P<0.05或P<0.01）,氟砷暴露对TP的影响不明显（P>0.05）;ALT在低氟高砷、高氟低砷剂量组分别低于低氟组与高砷组及高氟组与低砷组之和,AST在低氟低砷、高氟低砷剂量组分别低于低氟组与低砷组及高氟组与低砷组之和,差异有统计学意义（P<0.05 或 P<0.01）;硒干预可使 ALT、AST 显着降低（P<0.05 或P<0.01）,对TP影响不明显（P>0.05）。③F、UF、LF与MDA为正相关关系（P<0.01）,与GSH、MPO为负相关关系（P<0.01）,As、UAs、LAs与MDA为正相关关系（P<0.01）,与GSH、MPO为负相关关系（P<0.01）;MDA浓度随氟砷染毒剂量的增加而升高（P<0.01）,GSH、MPO浓度随氟砷染毒剂量的增加而降低;MDA在低氟低砷、低氟高砷、高氟高砷剂量组分别低于低氟组与低砷组、低氟组与高砷组及高氟组与高砷组之和,MPO在高氟高砷剂量组低于高氟组与高砷组之和,差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;硒干预可使MDA显着降低（P<0.01）,GSH、MPO 显着增高（P<0.01）。④F、UF、LF 与 Nrf2、HO-1、NQO1 为正相关关系（P<0.01）,As、UAs、LAs 与 Nrf2、HO-1、NQO1 为正相关关系（P<0.01）;Nrf2、HO-1、NQO1随着氟砷剂量的增加而表达增强（P<0.01）;Nrf2在低氟低砷、低氟高砷、高氟高砷剂量组分别低于低氟组与低砷组、低氟组与高砷组及高氟组与高砷组之和,HO-1、NQO1在各氟砷联合染毒剂量组均低于各自氟砷单独染毒剂量组其浓度之和,差异有统计学意义（P<0.01）:硒干预可使Nrf2、HO-1、NQO1表达减弱（P<0.01）。结论在本实验条件下:①氟砷可致大鼠肝细胞出现水变性、液化坏死等病理变化,硒干预可拮抗氟砷所致病理变化。②氟、砷均可引起大鼠肝细胞功能异常和氧化损伤;氟砷在低氟高砷、高氟低砷剂量组合下对ALT的影响表现为拮抗作用,在低氟低砷、高氟低砷剂量组合下对AST的影响表现为拮抗作用,在低氟低砷、低氟高砷、高氟高砷剂量组合下对MDA的影响表现为拮抗作用,在高氟高砷剂量组合下对MPO的影响表现为拮抗作用。③氟、砷均可通过诱导大鼠肝脏Nrf2蛋白表达增加而促进Nrf2-ARE通路下游HO-1、NQO1蛋白表达增加,氟砷在低氟低砷、低氟高砷、高氟高砷剂量组合下对Nrf2表达的影响表现为拮抗作用,在低氟低砷、低氟高砷、高氟低砷、高氟高砷剂量组合下对HO-1、NQO1表达的影响均表现为拮抗作用。说明Nrf2-ARE通路参与了氟、砷及氟砷联合所致的大鼠肝脏损伤并在氟砷联合肝脏损伤的复杂作用模式中扮演重要作用。④硒可拮抗氟砷引起的大鼠肝细胞毒性与氧化损伤作用,硒通过拮抗氟、砷及氟砷联合大鼠肝脏Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达而参与Nrf2-ARE通路的负向调控,减轻氟砷对肝脏的毒性作用。
王颖莉[5]（2011）在《硒对实验性大鼠氟中毒的拮抗作用及其机制研究》文中认为目的：通过对饮用同一浓度氟化钠的大鼠饲以含有不同浓度的亚硒酸钠饲料,观察比较大鼠体重、尿氟浓度、血清GSH-PX活性、血清CAT活性、Hb含量、牙胚成釉细胞及smad3、shh表达水平的差异,探讨不同剂量硒对大鼠氟中毒的拮抗作用。方法：清洁级雄性SD大鼠60只,体重80g-110g,在贵阳医学院动物实验室适应性喂养一周后随机分为6组,即对照组、氟组、氟硒一组、氟硒二组、氟硒三组、氟硒四组。每组10只,分笼人工喂养,自由饮水、饮食。对照组饮蒸馏水饲普通饲料,实验组（氟组、氟硒一组、氟硒二组、氟硒三组、氟硒四组）饮含氟（F）45mg/L的蒸馏水,氟组饲普通饲料,氟硒一组饲含硒1.37mg/kg的饲料,氟硒二组饲含硒1.6mg/kg的饲料,氟硒三组饲含硒2.3mg/kg的饲料,氟硒四组饲含硒4mg/kg的饲料,实验2个月。每周观察大鼠的一般情况,称取大鼠体重。每隔2周每组8只大鼠收集24小时尿液,大鼠禁饮、禁食,参照《尿中氟的离子选择电极测定方法（WS/T30-1996）》测定尿氟含量及根据氟斑牙分级标准对大鼠氟斑牙进行分级。分别于实验1月末和2月末每组8只大鼠采取尾血,用氧化指标专用测试试剂盒测大鼠血清谷胱甘肽过氧化物酶和血清过氧化氢酶的活性及用氰化高铁Hb法测Hb含量。实验结束断头处死大鼠,将包含下切牙的部分下颌骨固定、脱钙、切片,运用免疫组织化学检测技术检测smad3、shh在分泌期成釉细胞中的表达并采用图像分析软件对免疫组化结果进行半定量分析。用SPSS17.0统计软件对所有结果进行统计检验。结果：实验第四周,氟组大鼠开始出现氟斑牙,随着染氟时间的延长,氟斑牙的症状逐渐加重,8周末氟组大鼠出现中度氟斑牙。实验第6周,氟硒组开始出现氟斑牙,到实验结束时,氟硒各组氟斑牙症状比氟组轻,氟硒三组与氟硒一组、氟硒二组、氟硒四组比较,差异有统计学意义（p<0.05）,氟硒四组氟斑牙症状略比氟组重。8周末,各组大鼠体重均增长,但实验组大鼠体重增长慢于对照组（p<0.05）；氟硒三组大鼠体重增长比氟组、氟硒一组、氟硒二组、氟硒四组快,差异有统计学意义（p<0.05）；各组大鼠尿氟浓度随着染氟时间的延长逐渐升高,除对照组外；实验组尿氟浓度在实验1月和实验2月均比对照组高（p<0.05）；氟组大鼠尿氟浓度低于氟硒一组、氟硒二组、氟硒三组；氟硒三组高于氟硒一组、氟硒二组（p<0.05）；从第四周开始,氟硒四组尿氟开始略低于氟组。通过氧化指标专用测试试剂盒对大鼠血清中GSH-PX和CAT活性检测,结果显示为：实验1月和实验2月,实验组血清GSH-PX活力均较对照组下降（p<0.05）；氟硒二组、氟硒三组高于氟组,他们之间的差异有统计学意义（p<0.05）。1月和2月差异无统计学意义（p>0.05）。血清CAT活性各组无显着性差异。Hb各组也无明显变化（p>0.05）。免疫组化结果为：对照组大鼠成釉细胞中smad3、shh为阳性表达,氟组大鼠成釉细胞中smad3、shh表达比对照组明显减弱（p<0.01）；氟硒组smad3、shh表达强于氟组,其中氟硒三组与氟组差异有统计学意义（p<0.05）。结论：1.过量氟能抑制大鼠体内抗氧化酶的活性,引起机体氧化损伤。硒能纠正自由基代谢紊乱,对高氟具有一定的拮抗作用。2.硒在一定的范围内才表现为对氟的拮抗作用,硒过量则表现为对氟有协同作用。3.硒通过恢复调控牙胚发育的信号转导因子smad3、shh的表达,促进牙胚发育。硒拮抗氟中毒作用的机制可能与调控牙胚发育作用的信号转导因子Smad3和Shh的表达有一定的关联。4.硒具有降低氟的毒性,减轻氟斑牙症状的作用,不同浓度的硒对氟中毒的拮抗作用存在差异,以2.3mg/kg硒对氟中毒的拮抗效果最好。
王桂芹[6]（2011）在《硒和VitC对高氟所致氧化应激、DNA损伤及Bcl-2蛋白表达影响研究》文中认为目的地方性氟中毒是世界上广泛分布的一种地方病,我国是该病流行最严重的国家之一。硒和维生素C联用对氟致毒性影响的研究至今还未见报道。本研究从硒和维生素C单独作用的基础上进行研究,通过探讨不同剂量硒和维生素C对高氟所致氧化应激、DNA损伤及Bcl-2蛋白表达影响,为下一步硒和维生素C联用对氟致毒性的研究提供依据。方法将健康大鼠随机分成空白对照组、高氟组、低硒组、中硒组、高硒组、低维生素C组、中维生素C组及高维生素C组。除空白对照组饮用自来水并灌胃蒸馏水外,其他组大鼠均饮用150mg/ml氟化钠（NaF）溶液并灌胃相应剂量的亚硒酸钠溶液（低硒组:4ug/ml亚硒酸钠溶液;中硒组:8ug/ml亚硒酸钠溶液;高硒组:16ug/ml亚硒酸钠溶液。）或维生素C溶液（低维生素C组:0.01g/ml维生素C溶液;中维生素C组:0.02g/ml维生素C溶液;高维生素C组:0.04g/ml维生素C溶液）。给药体积均为5ml/kg体重,每天1次,给药时间共一个月。给药一个月后处死大鼠,采集标本进行如下处理:1.采用离子电极选择法测定大鼠尿中氟离子浓度;测定肝、肾脏器系数;2.测定大鼠肝脏和肾脏氧化应激相关指标:采用硫代巴比妥酸（TBA）显色法测定丙二醛（MDA）含量;采用二硫双硝基苯甲酸（DTNB）法测定谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性;采用邻苯三酚自氧化法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性。3.采用单细胞凝胶电泳方法测定大鼠肝脏和肾脏细胞DNA损伤率。4.采用免疫组化方法观察肝、肾组织的Bcl-2蛋白表达水平。结果1.尿氟和脏器系数检测结果显示:饮用氟化钠溶液后各组尿氟浓度均升高,其中空白对照组和高氟组差异有统计学意义（P<0.05）,提示饮用氟化钠溶液促进了尿氟的排泄。中硒组、低维生素C组和中维生素C组与空白对照组间差异有统计学意义（P<0.05）,而与高氟组间差异无统计学意义（P>0.05）,提示中剂量的硒和低中剂量的维生素C均不能改善因饮用氟化钠导致的尿氟浓度的升高,低硒组和高氟组差异有统计学意义（P<0.05）,而与空白对照组无统计学意义（P<0.05）。各组间脏器系数差异无统计学意义（P>0.05）。2.肝肾组织氧化应激相关指标测定结果显示:与空白对照组和高氟组相比,各硒组和各维生素C组肝GSH-Px均有所升高,且有统计学意义（P<0.05）。肝MDA各组间差异无统计学意义（P>0.05）。与空白对照组组和高氟组相比,低硒组肝SOD显着升高且有统计学意义（P<0.05）。与空白对照组相比,高氟组肾GSH-Px显着升高并有统计学意义（P<0.05）。低维生素C组和高氟组间差异有统计学意义（P<0.05）。低硒组和中硒组与空白对照组间肾MDA差异有统计学意义（P<0.05）,高硒组和低维生素C组与高氟组间差异有统计学意义（P<0.05）。3.DNA损伤测定结果显示:肝组织高氟组与空白对照组相比细胞损伤率升高且差异有统计学意义（P<0.05）。低硒组、高硒组与高氟组的损伤率差异有统计学意义（P<0.05）。中硒组与空白对照组的损伤率差异有统计学意义,与高氟组无显着差异（P<0.05）。高维生素C组、中维生素C组与高氟组的DNA损伤率无显着性差异（P>0.05）。肾组织空白对照组与高氟组损伤率无显着性差异（P>0.05）。硒各剂量组的损伤率与高氟组的损伤率无显着差异（P>0.05）。维生素C各剂量组和高氟组细胞损伤率差异有统计学意义（P<0.05）。4.Bcl-2蛋白表达测定结果显示:各组间肝肾组织Bcl-2蛋白表达不明显,平均光密度值差异无统计学意义（P>0.05）。高氟组和空白对照组相比平均光密度值有所下降但无统计学意义。对于肝组织,随着硒和维生素C的剂量的增加,平均光密度值逐渐增加,但差异尚无统计学意义（P>0.05）。结论1.大鼠摄入高剂量氟后,尿氟浓度显着升高,说明染氟实验成功。低剂量的硒可以改善因饮用氟化钠导致的尿氟浓度的升高,对氟导致的肾损害具有保护作用。2.大鼠摄入高剂量氟后,肝组织脂质过氧化作用不明显,表明肝脏对氟所致过氧化作用有一定的代偿能力。3.大鼠摄入高剂量氟后,肝细胞发生了显着DNA损伤。低剂量和高剂量的硒对氟致肝脏细胞的DNA损伤起到了拮抗作用。各剂量组维生素C与氟化钠联用时产生了肾细胞毒性,其实验结果的产生机制有待进一步研究。推测可能与实验剂量和试验时间等有关。4.大鼠摄入高剂量氟后,肝肾Bcl-2蛋白表达虽有所降低但差异尚无统计学意义,提示该实验条件下氟化钠尚未对肝肾Bcl-2蛋白表达产生抑制作用。
王桂芹,赵新华[7]（2010）在《硒、维生素C对高氟诱导脂质过氧化影响的研究进展》文中认为我国是世界上地方性氟中毒比较严重的国家之一,大约有1亿人口受到不同程度的影响,因此地氟病的防治研究已引起许多研究者的关注。近年来的一些研究表明,硒和维生素C的摄入能影响高氟诱导的脂质过氧化。本文就硒和维生素C对高氟诱导脂质过氧化的影响及其作用机制进行综述,并对进一步的研究提出展望。
高利华[8]（2008）在《锌对氟致雄性大鼠生殖机能损伤的联合作用研究》文中研究指明近年来,随着国内外对地方性氟中毒研究的日益深入,氟中毒引起的非骨相系统尤其是生殖系统损害越来越受到人们的关注,人们发现高氟区男性不育率显着高于非高氟区,且高氟区居民的精子数量和质量也明显降低。以往的研究表明:氟可引起大鼠生精细胞发生凋亡。而适量的锌对氟引起的脂质过氧化和DNA损伤有明显的拮抗作用,可抑制细胞的凋亡。Bcl-2蛋白、Bax蛋白是细胞凋亡过程中重要的蛋白,Bcl-2基因属于凋亡抑制基因,是从滤泡性非霍杰金淋巴瘤细胞中分离出来的一种癌基因,Bax基因属于凋亡诱导基因。Bcl-2蛋白和Bax蛋白在细胞内以同源二聚体或异源二聚体形式存在,当bax基因过度表达时,同源二聚体Bax/Bax比例增加,促进细胞凋亡,当Bcl-2基因过度表达时,异源二聚体Bcl-2/Bax比例增加,抑制细胞凋亡,因此Bcl-2/Bax蛋白的比值被认为是决定细胞凋亡的重要因素。适量的锌是细胞凋亡抑制因子,可拮抗毒物引起的生精细胞凋亡。而有关锌对氟引起的生精细胞凋亡拮抗作用机制研究较少。本研究通过大鼠灌胃氟化钠建立氟中毒模型,同时给予不同浓度的锌制剂,通过对大鼠精子质量,血清激素水平,生精细胞Bcl-2蛋白、Bax蛋白表达等的检测,研究氟锌联合作用对大鼠生殖机能的影响,为氟中毒的防治提供理论依据。材料和方法1实验动物及剂量分组:4～5周龄雄性Wistar大鼠50只,体重68.5～92.5g,由河南省动物实验中心提供。饲养条件:室温20～24℃,相对湿度为30%～60%,12小时光照,饲养在不锈钢丝笼内,自由饮食。经观察1周无异常后,随机分为5组,即对照组、染氟组、氟加低锌组、氟加中锌组、氟加高锌组。对照组经口灌胃给予去离子水;染氟组经口灌胃给予25 mg/kgBw·d氟化钠溶液;氟加低锌组经口灌胃给予25 mg/kgBw·d氟化钠溶液+4 mg/kgBw·d硫酸锌溶液;氟加中锌组经口灌胃给予25 mg/kgBw·d氟化钠溶液+20 mg/kgBw·d硫酸锌溶液;氟加高锌组经口灌胃给予25 mg/kgBw·d氟化钠溶液+50 mg/kgBw·d硫酸锌溶液。2检测指标及其方法:染毒6周后,称重、麻醉抽取下腔静脉学并处死动物,取睾丸、附睾,称重计算脏器系数,进行精子数、活动精子率测定和畸形精子率的分析;用氟离子选择电极法测定睾丸中氟的含量;采用放射免疫法检测血清睾酮含量;检测睾丸中乳酸脱氢酶的活力;免疫组化法（ICH）检测生精细胞中Bcl-2蛋白、Bax蛋白的表达水平。3统计学处理:采用SPSS12.0软件包处理所得数据。对于数值变量资料采用单因素方差分析或秩和检验进行分析;各组间精子畸形率和活动率的比较采用x2检验和x2分割的方法。取α=0.05为显着性水准。结果1各剂量组大鼠初始体重、终体重、右侧睾丸、右侧附睾、右侧睾丸脏器系数、右侧附睾脏器系数差异均无统计学意义（P＞0.05）。2精子数:（1）氟加锌各剂量组与氟组比较:氟加锌各组精子数显着高于氟组,且差异有统计学意义（P＜0.05）。（2）染毒各组精子数与对照组比较:氟加中锌组与对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。氟组、氟加低锌组和氟加高锌组精子数均低于对照组,且差异有统计学意义（P＜0.05）。3精子活动率:（1）氟加锌各剂量组精子活动率与氟组比较:氟加中锌组和氟加高锌组高于氟组,且差异有统计学意义（P＜0.005）。氟加低锌组与氟组比较,差异无统计学意义（P＞0.005）。（2）染毒各组精子活动率与对照组比较:氟加中锌组与对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.005）。氟组、氟加低锌组和氟加高锌组均低于对照组,且差异均有统计学意义（P＜0.005）。4精子畸形率:（1）氟加锌各剂量组精子畸形率与氟组比较:氟加中锌组和氟加低锌组低于氟组,且差异有统计学意义（P＜0.005）。氟加高锌组与氟组比较,差异无统计学意义（P＞0.005）。（2）染毒各组精子畸形率与对照组比较:氟加中锌组与对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.005）。氟组、氟加低锌组和氟加高锌组均高于对照组,且差异有统计学意义（P＜0.005）。5睾丸氟测定:（1）氟加锌各剂量组睾丸氟与氟组比较:氟加中锌组低于氟组,且差异有统计学意义（P＜0.05）。氟加高锌组高于氟组,且差异有统计学意义（P＜0.05）。氟加低锌组与氟组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。（2）染毒各组睾丸氟与对照组比较:氟加中锌组与对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。氟组、氟加低锌组和氟加高锌组均高于对照组,且差异均有统计学意义（P＜0.05）。6血清睾酮:（1）氟加锌各剂量组血清睾酮与氟组比较:3组均高于氟组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。（2）染毒各组血清睾酮与对照组比较:氟加锌各剂量组均高于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。染氟组与对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。7睾丸乳酸脱氢酶活性:（1）氟加锌各剂量组睾丸LDH活力与氟组比较:氟加中锌组高于氟组,且差异有统计学意义（P＜0.05）。氟加低锌组和氟加高锌组与氟组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。（2）染毒各组睾丸LDH活力与对照组比较:氟加中锌组与对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。氟组、氟加低锌组和氟加高锌组均低于对照组,且差异均有统计学意义（P＜0.05）。8睾丸组织病理切片:对照组和氟加中锌组的生精小管界膜完整,上皮细胞有5～8层,管壁中可见不同发育阶段的生精细胞,生精小管形态结构完整,管腔中无脱落的细胞,可见大量成熟精子,支持细胞的数量和结构正常。氟组和氟加高锌组生精小管界膜剥脱,上皮细胞减少到2～3层,各级生精细胞数量减少,结构疏松,管腔中有脱落细胞,成熟精子的数量减少,支持细胞数量减少。氟加低锌组的各级生精小管界膜较完整,生精小管上皮细胞数量较氟组和高锌组有所增加,形态结构较正常,间质细胞的数量和结构也较正常,可见较多成熟精子。9睾丸生精细胞Bcl-2蛋白、Bax蛋白表达检测:9.1 Bcl-2蛋白:（1）氟加锌各剂量组Bcl-2蛋白表达水平与氟组比较:氟加锌组各剂量组均高于氟组,差异有统计学意义（P＜0.005）。（2）染毒各组Bcl-2蛋白表达水平与对照组比较:染氟组低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.005）,氟加高锌组和氟加中锌组高于对照组,且差异有统计学意义（P＜0.005）,氟加低锌组与对照组相比,差异无统计学意义（P＞0.005）。9.2 Bax蛋白:（1）氟加锌各剂量组Bax蛋白表达水平与氟组比较:氟加低锌组与氟组相比,差异无统计学意义（P＞0.005）,氟加中锌组低于氟组,差异有统计学意义（P＜0.005）,氟加高锌组高于氟组,差异有统计学意义（P＜0.005）,（2）染毒各组Bax蛋白表达水平与对照组比较:氟加低锌组和氟加高锌组高于对照组,且差异有统计学意义（P＜0.005）,氟加中锌组与对照组相比,差异无统计学意义（P＞0.005）,染氟组高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.005）。结论1锌可拮抗氟致大鼠生精细胞凋亡,其可能机制是通过提高生精细胞Bcl-2蛋白表达、降低Bax蛋白的表达进行。2锌对氟致大鼠生精细胞凋亡拮抗作用与剂量有关,中剂量锌（20mg/kgBw·d）拮抗作用较为明显,低剂量锌（4mg/kgBw·d）拮抗作用不明显,高剂量锌（50mg/kgBw·d）无拮抗作用甚至与氟产生协同作用。
侯小东[9]（2008）在《硒对氟致血管内皮细胞损伤的影响》文中进行了进一步梳理目的研究不同浓度氟对体外培养人脐静脉血管内皮细胞的损伤作用;不同浓度硒对体外培养人脐静脉血管内皮细胞生长的影响;不同浓度的硒对不同浓度氟造成的血管内皮细胞损伤的拮抗作用。为硒拮抗氟致动脉硬化的应用提供理论依据。方法人脐静脉血管内皮细胞（Human umbilical vein endothelialcells,HUVEC）置于37℃,5%CO2,饱和湿度条件下培养。待细胞处于对数生长期,进行实验。实验分组分为加氟组、加硒组、加氟加硒组。加氟组氟化钠（NaF）浓度分别为0、100、400、700、1000、2000μmol/L。加硒组亚硒酸钠（Na2SeO3）的浓度分别为0、50、100、500、1000、2000nmol/L。加硒加氟组氟化钠（400、700、1000、2000μmol/L）+亚硒酸钠（100 nmol/L）。连续培养48h后收集细胞培养液与细胞待用。瑞氏-吉姆萨染色（Wrigh-Giema staining）观测细胞形态,吖啶橙荧光染色（Acridine orang staining）测定细胞凋亡的情况。采用四唑盐（Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）比色法测定细胞活性;检测培养液中谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione Peroxidase,GSH-px）、超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（Malondialdehyde,MDA）的活性。检测培养液中诱导型一氧化氮合酶（Inducible nitric oxidesynthase,iNOS）、内皮型一氧化氮合酶（Endothelial nitric oxidesynthase,eNOS）的活性和浓度。采用酶联免疫吸附试验（enzyme linkedimmunosorbent assay,ELISA）测定培养液中的细胞粘附因子（Intercellularcell adhesion molecule-1,ICAM-1）和血管粘附因子（Vasular cell adhesionmolecule-1,VCAM-1）的表达。采用逆转录聚合酶连反应（Reversetranscription polymersade chain reaction,RT-PCR）为,测定iNOS-mRNA、eNOS-mRNA的表达。结果采用多组间比较采用方差分析,两两比较采用q检验。结果1氟对血管内皮细胞损伤作用1.1细胞形态学观察瑞氏-吉姆萨染色发现加氟组细胞随着氟剂量增加数量开始减少,形态变化明显;血管内皮细胞的数量随着浓度增大而减少,内皮细胞中出现似成纤维细胞样改变,,细胞间隙增大。随着NaF浓度增大,变形的细胞所占得比例越大。吖啶橙染色NaF浓度达到2000μmol/L时,细胞核有明显变形,聚集在细胞边缘,呈月牙形排列,并有少许荧光碎片1.2氟化钠对细胞生长的影响HUVEC给予NaF处理后48h后,MTT法测定细胞增值,在低浓度NaF,对细胞的生长几乎没有作用（P＞0.05）,当NaF浓度为700、1000μmol/L时,可以明显抑制细胞得生长（P＜0.05）。当浓度为2000μmol/L时抑制的作用更强。1.3氟对培养液中SOD、GSH-Px活性和MDA含量的影响氟的剂量为100μmol/L时,SOD、GSH-px、MDA的活性或者是浓度都没有显着变化（P＞0.05）。随着NaF浓度增大,SOD、GSH-px的活性明显的降低（P＜0.05）,而MDA的浓度则明显的升高（P＜0.05）。1.4氟对内皮细胞eNOS和iNOS表达的影响低浓度氟对eNOS影响不大（p＞0.05）,随着氟浓度增大eNOS的活性逐渐减弱（p＜0.01）。而iNOS的活性则随着氟浓度的增高逐渐的增强（p＜0.01）。RT-PCR检测细胞eNOS mRNA和iNOS mRNA水平的变化,HUVEC与低浓度氟作用以后,其eNOS和的RT-PCRiNOS产物没有明显变化,但在氟浓度增大后具有统计学意义（P＜0.05）。1.5检测培养液中ICAM-1和VCAM-1浓度当NaF浓度时,培养液中的ICAM-1和VCAM-1的浓度并没有显着变化（P＞0.05）。当氟浓度增大,在400-2000μmol/L时,培养液中两种粘附因子的浓度都明显的增大,统计学检验有显着的统计学意义（P＜0.05）。2硒对血管内皮细胞的影响通过研究硒对内皮细胞形态、细胞活性、培养液中SOD、GSH-px活性和MDA含量、内皮细胞eNOS和iNOS表达、内皮细胞的ICAM-1和VCAM-1表达的影响,确定硒在浓度为100nmol/L时对细胞明显有保护作用,从而确定硒的干预剂量为100nmol/L。3硒对氟造成血管内皮细胞损伤的干预作用3.1硒对氟造成细胞形态改变的影响细胞在加硒加氟的培养液中培养48 h后染色观察,氟浓度100-700μmol/L细胞形态正常;当加硒加氟组的氟浓度达到1000μmol/L时,出现零星成纤维样细胞,当加硒加氟组的氟浓度达到2000μmol/L时,与加氟组没有明显的改变,细胞形态变化较大,细胞核可见浓染致密并可见荧光碎片3.2硒对氟造成的细胞活性改变的影响MTT测定细胞活性在不同组细胞中加入不同浓度的氟和硒共同培养48h后,MTT结果显示,在氟（100-700μmol/L）+硒组时,细胞生长并不受到抑制（P＞0.05）。在氟（1000-2000μmol/L）+硒组时,细胞生长明显受到抑制（P＜0.05）。但是与只加氟相比,细胞增值都增高。3.3硒对氟造成内皮细胞培养液中SOD、GSH-PX活性和MDA浓度改变的影响与同剂量加氟组相比,在氟（400-1000μmol/L）+硒组SOD与GSH-Px在培养液中的活性明显的增高（P＜0.05）,而MDA浓度则明显的降低（P＜0.05）;氟（2000μmol/L）+硒组,SOD、GSH-Px活性和MDA浓度都没有明显的变化（P＞0.05）。3.4硒对氟造成内皮细胞NOS的异常表达的影响与同剂量加氟组相比,氟（400,700μmol/L）+硒组培养液中iNOS的活性明显的降低（P＜0.05）,而eNOS的活性则明显的增高（P＜0.05）;氟（1000,2000μmol/L）+硒培养液中eNOS和iNOS活性没有明显的变化（P＞0.05）。RT-PCR测定结果显示,与同剂量加氟组比较,氟（400-1000μmol/L）+硒组iNOS mRNA表达明显的降低（P＜0.05）,而氟（2000μmol/L）+硒组iNOSmRNA的表达没有明显的变化;氟（400,1000μmol/L）+硒组的eNOS mRNA表达明显增高（P＜0.05）,而氟（2000μmol/L）+硒组eNOS mRNA的表达没有明显变化。3.5硒对氟造成内皮细胞黏附因子异常表达的影响与同剂量加氟组比较,氟（400-1000μmol/L）+硒组培养液中ICAM-1和VCAM-1的浓度明显降低（P＞0.05）,氟（2000μmol/L）+硒组培养液中ICAM-1和VCAM-1的浓度则没有明显变化（P＞0.05）。结论1、高浓度氟可以使内皮细胞的形态发生改变,并且可以导致细胞的调亡;适量剂量硒可以拮抗氟化钠对细胞的损伤。2、氟可以使培养液中的GSH-Px,SOD活性降低,使MDA的含量增高;适量浓度的硒可以改善这种现象,使SOD、GSH-Px活性明显升高,MDA浓度下降。3、氟可以抑制eNOS mRNA的表达,使培养液中的eNOS活性降低;可以刺激iNOS mRNA的表达,使培养液中iNOS活性增强;适量浓度硒可以抑制氟对细胞eNOS和iNOS的刺激,使eNOS和iNOS的表达和活性趋于正常。4、氟可以激活内皮细胞的粘附因子的表达,使培养液中ICAM-1和VCAM-1的含量增高;适量浓度硒可以抑制氟对细胞黏附因子的刺激,使其在培养液中的浓度明显的低于只加氟的实验组
孙计桃[10]（2005）在《饲喂高氟水草绵羊服硒对体内元素沉积及抗氧化酶活性影响的研究》文中指出本论文以绵羊作为实验动物,以乌梁素海高氟沉水水草作为消化道氟源,通过绵羊消化代谢试验、饲养试验、屠宰试验进行不同剂量氟与不同剂量硒相互作用对日粮养分消化率的影响、抗氧化酶活性的影响及对绵羊体内氟沉积影响的试验研究,为乌梁素海水草的广泛使用及氟、硒毒性拮抗的适宜剂量提供依据,同时进一步探讨硒拮抗慢性氟中毒的可能机制。试验结果表明: 1. 35:65 精粗比比 30:70 精粗比更能减少绵羊氟、硒的沉积,促进钙、磷及纤维的消化吸收。 2. 日粮 36.39-54.27mg/kg 氟与 0.216-0.657mg/kg 硒作用,未出现氟中毒、硒中毒症状。 3. 日粮 0.3505mg/kg 硒与 53.18mg/kg 氟相互作用使 GSH-Px 活性上升,使 SOD活 性 与 对 照 组 差 异 不 显 着 。 54.27mg/k g 氟 降 低 了 抗 氧 化 酶 的 活 性 、0.557-0.657mg/kg 硒与 36.39mg/kg 氟作用也降低了抗氧化酶的活性。 4. 日粮硒含量 0.556mg/kg 硒与 36.39mg/kg 氟及 54.27 mg/kg 氟作用,减少了氟在体内的沉积。 5. 0.3505-0.522mg/kg 硒与 53.18 mg/kg 氟作用能够减少硒在体内的沉积。 6. 0.3005-0.606mg/kg 硒与水草氟作用促进钙磷的吸收。 7. 0.216-0.642 mg/kg 硒与 54.64mg/kg 氟作用并没有显着影响骨中的钙、磷含量,但减少了氟在组织中的沉积。 8. 0.606mg/kg 硒与 54.27mg/kg 氟、0.607 mg/kg 硒与 36.69mg/kg 氟作用会引起NDF 的消化率显着降低。
二、不同浓度硒对大鼠尿氟排泄及氟致肾损害影响的研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、不同浓度硒对大鼠尿氟排泄及氟致肾损害影响的研究（论文提纲范文）
（1）富硒和胆碱预混料对围产期奶牛生产性能的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号和缩略语 |
| 1 文献综述 |
| 1.1 围产期奶牛能量代谢病的研究进展 |
| 1.1.1 围产期的定义 |
| 1.1.2 围产期的能量代谢 |
| 1.1.3 围产期酮病和脂肪肝 |
| 1.1.4 其他方面 |
| 1.2 胆碱的研究进展 |
| 1.2.1 胆碱的生理作用 |
| 1.2.2 胆碱对产乳性能的影响 |
| 1.2.3 胆碱在其他动物方面的研究 |
| 1.3 硒的研究进展 |
| 1.3.1 硒的抗氧化性 |
| 1.3.2 硒对机体免疫机能的影响 |
| 1.3.3 其他作用 |
| 1.4 本研究的目的和意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 主要试剂 |
| 2.2 主要设备 |
| 2.3 试验动物与饲养管理 |
| 2.3.1 试验时间地点 |
| 2.3.2 试验动物 |
| 2.3.3 饲养管理 |
| 2.4 试验设计 |
| 2.5 样品采集与处理 |
| 2.5.1 基础TMR日粮的采集和处理 |
| 2.5.2 试验奶牛体重和体况 |
| 2.5.3 奶样的采集和处理 |
| 2.5.4 血液样品的采集与处理 |
| 2.5.5 肝脏活组织样品的采集与处理 |
| 2.6 相关指标的检测 |
| 2.6.1 TMR饲料检测 |
| 2.6.2 乳成分检测 |
| 2.6.3 生化分析 |
| 2.6.4 硒水平测定 |
| 2.6.5 肝组织中TG检测 |
| 2.6.6 肝组织中抗氧化指标的检测 |
| 2.6.7 Real-time PCR检测肝组织中GPx1、GPx4、MTTP和ApoB100的mRNA相对表达量 |
| 2.7 分析统计 |
| 3 试验结果与分析 |
| 3.1 试验奶牛的生产性能变化 |
| 3.1.1 试验奶牛DMI、BW、BCS和CC的变化 |
| 3.1.2 试验奶牛产乳量和乳品质的变化 |
| 3.2 试验奶牛的血生化指标变化 |
| 3.2.1 试验奶牛血液中能量代谢相关指标的变化 |
| 3.2.2 试验奶牛血液中非能量代谢相关指标的变化 |
| 3.3 试验奶牛血液、肝组织和乳中硒水平的变化 |
| 3.4 试验奶牛肝组织中TG水平和抗氧化能力的变化 |
| 3.4.1 试验奶牛肝组织中TG水平的变化 |
| 3.4.2 试验奶牛肝组织中抗氧化指标的变化 |
| 3.5 试验奶牛肝中关键抗氧化蛋白和脂质转运蛋白mRNA相对表达量的变化 |
| 4 讨论 |
| 4.1 富硒和胆碱预混料对围产期奶牛的生产性能的影响 |
| 4.1.1 富硒和胆碱预混料对围产期奶牛DMI、BW、BCS、CC的影响 |
| 4.1.2 富硒和胆碱预混料对围产期奶牛泌乳性能的影响 |
| 4.2 富硒和胆碱预混料对围产期奶牛的血生化指标的影响 |
| 4.2.1 富硒和胆碱预混料对围产期奶牛的血液能量代谢指标的影响 |
| 4.2.2 富硒和胆碱预混料对围产期奶牛的血液非能量代谢指标的影响 |
| 4.3 富硒和胆碱预混料对围产期奶牛血液、肝组织和乳中硒水平的影响 |
| 4.4 富硒和胆碱预混料对围产期奶牛机体肝组织中TG水平和抗氧化能力的影响 |
| 4.4.1 富硒和胆碱预混料对围产期奶牛肝组织中TG水平的影响 |
| 4.4.2 富硒和胆碱预混料对围产期奶牛肝组织中抗氧化指标的影响 |
| 4.5 富硒和胆碱预混料对奶牛肝中关键抗氧化蛋白和脂质转运蛋白mNRA相对表达量的影响 |
| 全文总结 |
| 本论文创新点 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士期间发表的学术性论文及着作 |
| 致谢 |
（2）硒对氟致大鼠肾小管上皮细胞线粒体膜电位改变的拮抗作用（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 细胞系来源及培养 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 细胞的分组及处理 |
| 1.4 线粒体膜电位的测定 |
| 1.5 氧化应激指标的测定 |
| 1.6 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 线粒体膜电位 |
| 2.2 氧化应激指标 |
| 3 讨论 |
（3）内质网应激在不同钙营养条件下母鼠氟露后仔鼠脑细胞凋亡中的作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 1 绪论 |
| 1.1 地方性氟中毒的研究概况 |
| 1.1.1 氟的理化性质及生物学效应 |
| 1.1.2 氟毒性的研究现状 |
| 1.1.3 氟中毒发病机制的研究进展 |
| 1.2 钙与氟中毒 |
| 1.2.1 钙的生物学效应 |
| 1.2.2 钙与氟中毒的研究进展 |
| 1.2.3 钙对氟中毒作用机制研究进展 |
| 1.3 研究意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 实验分组 |
| 2.3 实验器材及实验试剂 |
| 2.3.1 实验器材 |
| 2.3.2 实验试剂 |
| 2.4 试验方法 |
| 2.4.1 母鼠及仔鼠体重的称量 |
| 2.4.2 氟斑牙观测 |
| 2.4.3 血氟与尿氟的测定 |
| 2.4.4 血钙与尿钙的测定 |
| 2.4.5 仔鼠血液中氧自由基代谢水平及相关酶活性的测定 |
| 2.4.6 大鼠脑海马细胞凋亡检测 |
| 2.4.7 RT-PCR |
| 2.4.8 Western Blot检测 Bcl-2、Caspase12、JNK、BIP、CHOP、CRT蛋白的表达 |
| 2.5 数据统计分析 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 母鼠及仔鼠体重称量统计结果 |
| 3.2 母鼠氟斑牙发生情况 |
| 3.3 母鼠及仔鼠血/尿氟和血/尿钙的检测统计结果 |
| 3.3.1 母鼠血氟/钙和尿氟/钙的检测统计结果 |
| 3.3.2 仔鼠血氟/钙和尿氟/钙检测统计结果 |
| 3.4 仔鼠血液中氧自由基代谢水平及相关酶活性的测定结果 |
| 3.5 仔鼠脑海马CA3区细胞凋亡的检测结果 |
| 3.6 仔鼠脑海马神经细胞内质网应激伴侣分子基因/蛋白表达水平检测统计结果 |
| 3.7 仔鼠脑海马神经细胞相关凋亡信号通路分子基因/蛋白表达水平的检测统计结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
（4）Nrf2-ARE通路在氟砷联合染毒大鼠肝毒性及硒干预作用中的调控机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 英文摘要 |
| 致谢 |
| 缩略词表 |
| 附: 综述 |
| 参考文献 |
（5）硒对实验性大鼠氟中毒的拮抗作用及其机制研究（论文提纲范文）
| 主要英文缩略对照词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 实验一 硒对氟中毒大鼠体内氟代谢的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 实验二 硒对氟中毒大鼠体内抗氧化酶及血红蛋白的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 实验三 硒对牙胚发育的影响及其相关机制 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 全文小结 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（6）硒和VitC对高氟所致氧化应激、DNA损伤及Bcl-2蛋白表达影响研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 动物染毒实验 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第二部分 硒和维生素C 对高氟所致氧化应激影响研究 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 肝组织氧化应激水平变化 |
| 2.2 肾组织氧化应激水平变化 |
| 3 讨论 |
| 第三部分 硒和维生素C 对高氟致DNA 损伤影响研究 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 肝脏DNA 损伤率 |
| 2.2 肾脏DNA 损伤率 |
| 3 讨论 |
| 第四部分 硒和维生素C 对高氟致Bcl-2 蛋白表达影响研究 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 本研究的不足之处 |
| 结论 |
| 综述 氟中毒所致肝肾损伤及硒和维生素C 干预作用研究进展 |
| 参考文献 |
| 主要英文缩写词表 |
| 攻读硕士期间发表的论文 |
| 致谢 |
（8）锌对氟致雄性大鼠生殖机能损伤的联合作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 论文正文 锌对氟致雄性大鼠生殖系统损伤的联合作用研究 |
| 引言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 综述 锌、硒、维生素等对氟中毒拮抗作用研究进展 |
| 参考文献 |
| 缩写词 |
| 后记 |
（9）硒对氟致血管内皮细胞损伤的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| 英文摘要 |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 第一部分 氟对血管内皮细胞的损伤作用 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 第二部分 硒对脐静脉血管内皮细胞生长状态的影响 |
| 1 方法 |
| 2 结果 |
| 第三部分 硒对氟造成的血管内皮细胞损伤的干预作用 |
| 1 方法 |
| 2 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表论文目录 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 |
（10）饲喂高氟水草绵羊服硒对体内元素沉积及抗氧化酶活性影响的研究（论文提纲范文）
| 引言 |
| 试验一 饲喂高氟水草绵羊服硒对机体元素及抗氧化酶类影响的研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与讨论 |
| 2.1 水草氟与硒相互作用对日粮氟、硒消化率、沉积率的影响 |
| 2.2 不同剂量氟与硒相互作用对纤维消化率的影响 |
| 2.3 不同剂量氟与硒相互作用对日粮钙、磷消化率的影响 |
| 2.4 不同剂量水草氟与硒相互作用对酶的影响 |
| 2.5 不同剂量水草氟与硒相互作用对血氟、血硒含量的影响 |
| 3 结论 |
| 试验二不同精粗比对绵羊体内氟、硒及其它营养物质消化代谢的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与讨论 |
| 2.1 不同精粗比对饲喂高氟水草加硒绵羊粪氟、尿氟排泄及氟沉积率的影响 |
| 2.2 不同精粗比对饲喂高氟水草加硒绵羊硒消化率及沉积率的影响 |
| 2.3 饲喂高氟水草加硒绵羊在不同精料水平下对GSH-Px、SOD 活性的影响 |
| 2.4 饲喂高剂量水草加硒绵羊在不同精料水平下对钙、磷、纤维消化率的影响 |
| 2.4.1 不同精粗比对日粮钙、磷消化率的影响 |
| 2.4.2 不同精粗比对日粮纤维消化率的影响 |
| 3 结论 |
| 试验三 高氟与硒相互作用对绵羊生长及体内氟硒沉积影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与讨论 |
| 2.1 高剂量水草氟与硒相互作用对绵羊生产性能的影响 |
| 2.2 高剂量水草氟与硒相互作用对毛硒和骨、组织氟含量的影响 |
| 2.3 高剂量水草氟与硒相互作用对骨钙、骨磷沉积的影响 |
| 2.4 高剂量水草氟与硒相互作用对机体氟、硒沉积率的影响 |
| 3 结论 |
| 全文总体讨论与结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
四、不同浓度硒对大鼠尿氟排泄及氟致肾损害影响的研究（论文参考文献）
- [1]富硒和胆碱预混料对围产期奶牛生产性能的影响[D]. 张晓峰. 扬州大学, 2019(02)
- [2]硒对氟致大鼠肾小管上皮细胞线粒体膜电位改变的拮抗作用[J]. 常凯,王裕,庞文彪,高继萍,陈朝阳,宋国华. 实验动物与比较医学, 2017(03)
- [3]内质网应激在不同钙营养条件下母鼠氟露后仔鼠脑细胞凋亡中的作用[D]. 柯露露. 浙江师范大学, 2017(07)
- [4]Nrf2-ARE通路在氟砷联合染毒大鼠肝毒性及硒干预作用中的调控机制[D]. 钱亚利. 贵阳医学院, 2014(06)
- [5]硒对实验性大鼠氟中毒的拮抗作用及其机制研究[D]. 王颖莉. 遵义医学院, 2011(06)
- [6]硒和VitC对高氟所致氧化应激、DNA损伤及Bcl-2蛋白表达影响研究[D]. 王桂芹. 广东药学院, 2011(01)
- [7]硒、维生素C对高氟诱导脂质过氧化影响的研究进展[J]. 王桂芹,赵新华. 广东药学院学报, 2010(04)
- [8]锌对氟致雄性大鼠生殖机能损伤的联合作用研究[D]. 高利华. 郑州大学, 2008(03)
- [9]硒对氟致血管内皮细胞损伤的影响[D]. 侯小东. 山东大学, 2008(01)
- [10]饲喂高氟水草绵羊服硒对体内元素沉积及抗氧化酶活性影响的研究[D]. 孙计桃. 内蒙古农业大学, 2005(05)