（扬子江药业集团江苏紫龙药业有限公司；江苏常州213000?）
摘要：目的：采用顶空气相色谱法测定奥扎格雷原料药中乙腈的残留量。
方法：色谱柱：Agilent DB-624 30m×0.32m×1.8μm；柱温：40℃保持6分钟；检测器：氢火焰离子化检测器（FID），检测器温度为250℃；进样口温度：200℃；载气：氮气；进样方式：顶空进样，顶空瓶平衡温度为80℃，平衡时间为20分钟；定量环温度为85℃，传输管温度为110℃；分流比：20:1。
结果：乙腈在8.59879μg/ml~85.98790μg/ml范围内线性关系良好，乙腈的平均回收率在96%，RSD值为4.7%；奥扎格雷原料药中未检测乙腈残留。
结论：本方法稳定、简便、准确，灵敏度高，适用于奥扎格雷原料中乙腈的测定
关键词：顶空气；相色谱法测定；奥扎格雷；乙腈
奥扎格雷[1]为血栓素A2(TXA2)合成酶抑制剂，具有抗血小板凝聚和扩张血管的作用。依据本品的合成工艺路线，在合成过程中使用的有机试剂为乙腈，根据《中国药典》2015版四部[2]残留溶剂测定法的规定，乙腈系人用药品注册技术要求国际协调会（ICH）限制使用的第二类溶剂，需对其进行残留量检测，以便加以控制。本文建立了顶空气相色谱法测定奥扎格雷原料中乙腈的残留量。
1 仪器和试药
Agilent 7890B型气相色谱仪
奥扎格雷原料药来自A厂家（批号为180921、180922、180923），乙醇（批号：20181009），氢氧化钠（批号：20180514），乙腈（批号：20140512）。
2 方法与结果
2.1 溶液的配制
2.1.1.内标溶液的制备
取乙醇适量，精密称定，置量瓶中，加超纯水稀释至刻度，摇匀作为内标贮备液。
2.1.2.供试品溶液的制备
取本品约2.0g，精密称定，置量瓶中，精密加内标贮备液1.00ml，加2mol/L NaOH水溶液稀释至刻度，摇匀。精密量取2.00ml，置20ml顶空瓶中，密封，作为供试品溶液。
2.1.3.对照品溶液的制备
取乙腈适量，精密称定，置量瓶中，加超纯水稀释至刻度，摇匀，作为标准贮备液。精密量取上述标准贮备液及内标贮备液各5.00ml，置50.0ml量瓶中，加超纯水稀释至刻度，摇匀。精密量取2.00ml，置20ml顶空瓶中，密封，作为对照品溶液。
2.2 色谱条件
色谱柱：Agilent DB-624 30m×0.32m×1.8μm；2.2.2.柱温： 40℃保持6分钟；检测器：氢火焰离子化检测器（FID），检测器温度为250℃；进样口温度：200℃；载气：氮气；进样方式：顶空进样，顶空瓶平衡温度为80℃，平衡时间为20分钟；定量环温度为85℃，传输管温度为110℃；分流比：20:1。
2.3 系统适用性试验
精密量取空白溶液、对照品溶液2.00ml各两份置于顶空瓶中，密封。分别进样1次，空白溶液获得的色谱图与对照品溶液主峰相应的保留时间处应无共流出峰，空白溶液不干扰本品乙腈的测定。
2.4 线性关系的考察
取乙腈适量，精密称定，置量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，作为标准贮备液。分别精密量取上述标准贮备液0.4 ml、1 ml、1.6 ml、2.0 ml、2.4 ml、3.0 ml、4.0 ml各置20.0ml量瓶中，再分别精密加入2.00ml内标贮备液，加溶剂稀释至刻度，摇匀，分别制成20%、50%、80%、100%、120%、150%、200%浓度水平的对照品溶液。精密量取上述对照品溶液2.00ml置顶空瓶中，密封，分别进样一次。以对照品浓度X（μg/ml）为横坐标，测得乙腈的回归方程，结果见表1。结果表明，乙腈在一定浓度范围内呈现良好的线性关系。
2.5 精密度试验
精密量取“2.1.2.”项下对照品溶液2.00ml，分别置六只顶空瓶中，6针对照品溶液与内标物的校正因子的比值的RSD为3%，试验结果表明精密度好。
2.6 灵敏度试验
取“2.1.2.”项下对照品溶液用溶剂逐步稀释，直至定量限峰高为基线噪声的8-12倍为止，结果得到乙腈的定量限为100ng。
2.7 回收率试验
从对照品溶液浓度100%水平考察，水平平行配制9份准确度溶液。每个准确度溶液的回收率均在80%-120%，结果见表2。
2.8 溶液稳定性
精密量取对照品溶液2.00ml于顶空瓶中，分别于约0、2、4、6、8、12、16、24小时进样，记录色谱图。对照品溶液放置24小时内，计算每个时间点测得乙腈与内标物质校正因子比值的RSD均未超过5%，表明溶液是稳定的。
2.9 样品的测定
取供试品溶液，按色谱条件进行测定，三批奥扎格雷原料中的乙腈均未检出。
3 讨论
3.1 程序升温的选择
曾选择恒温控制，但因乙腈和内标物质未能分离，导致系统适用性中分离度不高，小于1.5，不能满足法规要求，故调整为程序升温。
3.2 进样方式的选择
Agilent7890B的进样方式有两种，顶空进样和直接进样，由于奥扎格雷的水溶性不佳，所以最终选择顶空进样。
3.3 小结
《中国药典》2015版药典四部中对于乙腈的检测控制量为0.041%。本品三个批号按照该法测定结果均未检出，说明奥扎原料工艺稳定可行。本文建立的方法稳定、简便、准确、灵敏度高，适用于奥扎格雷原料中乙腈的测定。
参考文献：
1 明宝钢，张琳琳.顶空气相色谱法测定奥扎格雷钠中残留溶剂[J].实用药物与临床，2017,20（2）：215-217
2 中国药典[S].2015版.四部.105-109,59
论文作者:宋人杰 石小磊,黄皆竣,蒋红梅
论文发表刊物:《医师在线》2019年4月8期
论文发表时间:2019/7/1
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