李雪松[1]2003年在《大鼠弥漫脑损伤模型制作及伤后凋亡相关蛋白表达的研究》文中研究指明目的：改进Marmarou法制作大鼠不同程度弥漫性脑损伤模型。观察大鼠中度弥漫性脑损伤后不同时间、不同脑区，凋亡相关基因bcl-2、bax和caspase-3在蛋白质水平表达变化，探讨弥漫性脑损伤后细胞凋亡分子生物机制。 方法：使用改进后的Marmarou致伤装置，以不同冲击力(80cm×450g、120cm×450g和180cm×400g)打击大鼠头部分别制作轻、中、重度弥漫性脑损伤动物模型，观察不同程度损伤后动物神经系统体征、生命体征、感觉运动功能及脑组织病理形态学变化。应用免疫组化方法检测大鼠中度弥漫性脑损伤后不同时间、不同脑区Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白的表达，应用流式细胞仪定量检测伤后不同时间海马区细胞凋亡。 结果：(1)与假手术组相比，不同程度损伤后大鼠神经系统体征、生命体征及感觉运动功能均明显改变，病理学检查证实各致伤组动物均有弥漫性脑损伤，而且随损伤冲击力增加以上各种表现变化程度呈加重趋势。(2)与对照组相比，大鼠中度弥漫性脑损伤后6～12小时大脑皮质Bcl-2蛋白表达下降，于伤后24小时达到最低(P＜0.05)，7天时恢复至打击前水平；伤后6～24小时Bax蛋白表达上升，48小时达到最高(P＜0.05)，7天时仍高于对照组；伤后12小时Caspase-3蛋白轻微表达，24小时表达上升，72小时达到最高(P＜0.01)，7天时仍保持较高水平。海马区Bcl-2蛋白于伤后6小时表达上升(P＜0.05)，12小时表达下降，48小时达到最低(P＜0.05)，7天时仍低于对照组；伤后海马区Bax和Caspase-3蛋白的表达变化与大脑皮质区相似，但其变化程度更明显；Bcl-2和Bax蛋白表达值的均数比(Bcl-2／Bax)与Caspase-3蛋白表达值呈负相关。伤后大脑皮层下白质及丘脑区各蛋白表达变化不明显。(3)与对照组相比，伤后12～48小时海马区细胞凋亡明显增加(P＜0.01)，72小时达到峰值(P＜0.01)，7天时仍明显高于对照组(P＜0.01)；伤后海马区细胞凋亡与Bcl-2／Bax表达比下降及Caspase-3表达上升有关。 结论：(1)改进后的大鼠不同程度弥漫性脑损伤模型稳定、实用、重复性好；中度打击伤组动物死亡率低且病理变化典型，适合动态研究弥漫性脑损伤后的病理生理变化。(2)中度弥漫性脑损伤后，不同脑区存在凋亡相关蛋白表达变化，以海马区最明显。(3)细胞凋亡与弥漫性脑损伤后继发性脑损害有关，bcl-2和caspase基因族重要成员参与了伤后神经细胞凋亡，bcl-2和bax表达比(Bcl-2／Bax)下调可能参与激活caspase-3基因，进而诱导细胞凋亡。提示从不同水平促进抑凋亡基因bcl-2表达，并同时抑制促凋亡基因bax和caspase-3表达，可能有助于减轻弥漫性脑损伤后继发性脑损害。
陈含笑[2]2011年在《大鼠闭合性颅脑损伤后BDNF、COX2、PDGF-B的表达变化的实验性研究》文中指出目的：研究闭合性性脑损伤后脑源性神经营养因子(BDNF),环氧合酶2(COX2)和血小板衍生生长因子(PDGF-B)的表达时序性特点及其意义。方法：健康Wistar大鼠85只,雌雄不分,按照改良的Marmarou损伤模型将其随机分为正常对照组(n=5),假损伤组(n=5),死后损伤组(n=5)和损伤组(n=45)(损伤组分成伤后1h、3h、6h、12h、1d、3d、5d、7d、14d等九个时间组,每组n=5)。用免疫组化SP法检测BDNF, COX2, PDGF-B在脑组织中各时间组表达情况。通过建立大鼠闭合性性脑损伤模型,运用光学显微镜观察脑组织形态学的改变,利用免疫组织化学染色法(SP法)对对照组及伤后不同时间组内脑细胞中的BDNF、COX2、和PDGF-B蛋白进行检测,并作统计学分析。结果：BDNF伤后1h明显增高,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),于3h达高峰,后逐渐下降,3d基本降至正常；COX2免疫阳性表达在脑损伤后1-3h升高,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),12h达高峰,5d后基本恢复正常水平；PDGF-B伤后1h增加,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),3-5d出现表达高峰,14d时仍高于正常。叁种蛋白的死后损伤组与生前损伤组相比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论：1)检测BDNF、COX2与PDGF-B蛋白的表达可用于生前伤和死后脑损伤的鉴别。2)大鼠闭合性脑损伤后,BDNF、COX2和PDGF-B的表达均上调,且各自呈一定的时序性变化规律,可望为法医学颅脑损伤时间的推断提供实验依据。
参考文献：
[1]. 大鼠弥漫脑损伤模型制作及伤后凋亡相关蛋白表达的研究[D]. 李雪松. 暨南大学. 2003
[2]. 大鼠闭合性颅脑损伤后BDNF、COX2、PDGF-B的表达变化的实验性研究[D]. 陈含笑. 新疆医科大学. 2011