合肥市食品药品检验中心 安徽合肥 230001
【摘 要】目的 比较6种不同剂型六味地黄制剂中丹皮酚和马钱苷的溶出度。方法 采用桨法测定溶出度，溶出度以桨法测定，转速75转/分，溶出介质为 500mL 0.1mol/L盐酸溶液。实验数据按威布尔分布模型处理。结果 6 种不同剂型的六味地黄制剂的体外溶出度有显著差异，其中，T50最大的是最小的156倍。结论不同剂型的六味地黄制剂的体外溶出度存在较大差异，应根据临床需要选择合适剂型。
【关键词】溶出度；六味地黄；丹皮酚；马钱苷
Study on the dissolution of six different formulations of Liuweidihuang
Abstract：OBJECTIVE To study and compare the dissolution of paeonol and loganin in six different formulations of Liuweidihuang．METHODS Paddle method was used to determine the dissolution. The rotation speed was 75 r/min and the dissolution medium was 500 ml of 0.1 mol/L Hydrochloric acid solution. The experimental data was fitted by using the Weibull distribution model. RESULTS There were significant differences in the in vitro dissolution performance of six different formulations of Liuweidihuang.Maximum T50 in which，dissolution parameters was 156 times of the minimum．CONCLUSION Different formulations of Liuweidihuang differed significantly from one another in dissolution．The appropriate dosage forms should be selected according to the clinical Application.
Key words：Dissolution；Liuweidihuang；Paeonol；Loganin
六味地黄方是滋补肾阴的代表方，由熟地黄、山茱萸、山药、丹皮、茯苓、泽泻6味药组成，具有显著的增强免疫、抗衰老、抗疲劳、抗低温、耐缺氧、降血脂、降血压、降血糖、改善肾功能、促进新陈代谢及较强的强壮作用，被誉为补肾方药之祖【1】。由于用途广泛、疗效确切，现在国内已有近900个六味地黄不同剂型的批准文号【2】，如丸剂（蜜丸）、浓缩丸、硬胶囊剂、片剂、软胶囊剂、滴丸等。但不同剂型的六味地黄制剂的溶出度比较研究尚未见报道。现采用高效液相色谱法对六味地黄水蜜丸、浓缩丸、片剂、胶囊剂、软胶囊和滴丸中丹皮酚和马钱苷在0.1mol/L盐酸溶液中的溶出度进行测定并将其溶出曲线进行比较，以期为该类药品的质量控制和临床用药提供依据。
1 仪器与试药
2695型全自动高效液相色谱仪配DAD检测器（美国沃特世），BS210S型电子天平（上海梅特勒一托利多仪器有限公司），BT25S型电子天平（赛多利斯科学仪器北京有限公司），RCZ-8B自动溶出度仪（天津大学无线电厂），丹皮酚对照品（批号：110708-201407）、马钱苷对照品（批号：111640-201005）由中国药品生物制品检定所提供；六味地黄丸（水蜜丸）（A厂，批号15031843；B厂，批号150304；C厂，批号140803），六味地黄丸（浓缩丸）（D厂，批号14071132；E厂，批号201412021；F厂，批号150307），六味地黄胶囊（G厂，批号20140305；H厂，批号150102；I厂，批号140526），六味地黄片（J厂，批号540306；K厂，批号20141103；L厂，批号150104；），六味地黄软胶囊（M厂，批号141207；N厂，批号14171558；O厂，批号150306），六味地黄滴丸（P厂；批号140901、150302、150401）。乙腈为色谱纯；其余试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1色谱条件【3】：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（色谱柱Hypersil ODS2 C18柱，250mm×4.6mm）；流动相A为乙腈，B为0.03%磷酸溶液，梯度洗脱0～5min，A（5%→8%）；5～20min，A 8%；20～35min，A（8%→20%）；35～45min，A（20%→60%）；45～55min，A 60%；流速：1.0mL/min；柱温：40 ℃；马钱苷检测波长为240nm，丹皮酚为274nm。
2. 2 对照品溶液的制备：取马钱苷对照品10.37mg，丹皮酚对照品5.24mg，精密称定，加50%甲醇制成每1mL含马钱苷20.74?g和丹皮酚52.40?g的溶液，即得。
2. 3 供试品溶液的制备：
2.3.1 含量测定溶液的制备：取水蜜丸、浓缩丸、滴丸制剂，研细，混匀，取约相当于饮片约1g的供试品，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加人50%甲醇25ml，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。取六味地黄胶囊10 粒，除去囊壳，混匀其内容物并研细，精密称定相当于1粒胶囊内容物的重量，同法制备胶囊供试液。取软胶囊10粒，用针扎囊壁，挤出内容物，取相当于1粒软胶囊的重量，精密称定，同法制备软胶囊供试液。取六味地黄片10片，除去包衣，研细，混匀，精密称定相当于1片的重量，同法制备片剂供试液。
2.3.2 溶出度试验溶液的制备：参照中国药典二部附录XC溶出度测定法第一法，以500ml的0.1mol/L盐酸溶液为溶出介质，转速75转/分钟，温度37.5±0.5℃。分别取水蜜丸15粒、浓缩丸8丸、片剂1片、胶囊剂1粒、软胶囊1粒和滴丸10丸各6份，精密称重后，投入转篮中，于5、15、30、60、90、120min取样，取样后补充相应体积的同温的溶出介质，经0.45?m微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。
2.4 线性关系考察 精密吸取对照溶液2、5、10、20、50?l，分别进样，计算峰面积，以进样量（?g）为横坐标X，峰面积为纵坐标Y，绘制标准曲线，得到回归方程及相关系数，结果显示马钱苷和丹皮酚分别在0.0415～1.037?g和0.1048～2.620?g范围内与峰面积呈良好线性，见表1。
表1 线性关系考察结果
2.5 稳定性试验
取2.1.3.2项下溶出时间为45分钟时的供试品溶液，分别在0、2、4、6、8、12 h 时进样，计算丹皮酚的RSD为1.86%，马钱苷的RSD为2.69%。
2.6 精密度试验
在2.1.1色谱条件下，精密吸取2.1.2项下对照品溶液20?l注入液相色谱仪，连续进样5次，丹皮酚的RSD为0.42%，马钱苷的RSD为0.58%。
2.7 重复性试验
取同一批次六味地黄丸样品5份，分别按照含量测定方法测定，测得，丹皮酚的RSD为0.92%，马钱苷的RSD为1.43%。
2.8 回收率试验
精密量取2.1.3.1项下已知含量的供试品溶液6份，置50ml容量瓶中，分别加入对照品溶液5ml，加甲醇稀释到刻度，精密吸取20?l注入液相色谱仪，按照2.1.1色谱条件测定，计算，丹皮酚的回收率分别为100.23%、98.34%、98.84 %、101.81%、98.54%、99.05%，平均回收率为99.30%，RSD为1.0%。
2.9 结果
2.9.1 溶出试验结果：取2.3.2项下供试品溶液，精密吸取20?l注入液相色谱仪，记录色谱图，测定丹皮酚和马钱苷的累计溶出率。
表1 不同厂家样品中丹皮酚溶出度参数
表4 马钱苷平均累计溶出率（%）
3 讨论
3.1 溶出度实验已作为一种控制药品内在质量的重要指标，广泛应用于药品的研发、生产和监督检验中。评价溶出曲线相似性的方法有很多种，可分为非模型依赖法和模型依赖法，前者包括有f２因子法、溶出效率法、相似等效限法等，后者包括Weibull模型、Logistic模型、Higuchi模型等【4】。本文选择Weibull模型对溶出曲线进行评价比较，结果显示同一剂型不同厂家产品差异不明显，而不同剂型之间有显著性差异，T50最大的是最小的156倍之多。
3.2 在溶出方法的选择上，一般而言，片剂适合桨法，而胶囊剂或漂浮的制剂适合转篮法。但本实验目的是比较不同剂型的溶出性能，故需统一样品的溶出条件，因软胶囊崩解后，基质易粘连在转篮上不易溶出，故采用桨法。对于易漂浮的胶囊剂，采取加沉降篮的方法利于溶出。
3.3本实验根据药品说明书，单次服用剂量、药品规格以及药典关于丸剂溶散时限等的规定，选取溶出试验的样品量，分别选取水蜜丸15粒、浓缩丸8丸、片剂1片、胶囊剂1粒、软胶囊1粒和滴丸10丸，结果显示样品溶出良好，且溶出结果在文中的色谱条件中均可准确定量。
综上所述，随着制药工业技术的发展，为了满足不同的临床需要，中成药制剂的剂型也在更加多样化。文中考察比较了市售不同剂型的六味地黄制剂的溶出度，结果显示溶出性能差异显著，临床用药应根据病因选择合适剂型，如治疗急症时，应选用溶出度较大的剂型，药物迅速显效，治疗慢性病时，选用溶出度小的剂型，让药物缓慢奏效。同时，各生产厂家在产品设计及生产上应充分考虑主要活性成分的在多种条件下的溶出性能，努力提高药品内在品质和临床疗效。
参考文献：
[1]吴昆仑，吴眉．六味地黄丸汤药理研究及临床应用新进展[J].中成药，2005，27（11）：15-18.
[2]国家食品药品监管总局.数据查询［EB/OL］.http：//app1.sfda.gov.cn/datasearch/face3/base.jsp?tableId=25&tableName=TABLE25&title=国产药品&bcId=124356560303886909015737447882
[3]国家药典委员会.中国药典[s]. 北京：中国医药科技出版社，2015：705-706.
[4]陈贤春，吴清，王玉蓉，等.关于溶出曲线比较和评价方法[J].中国医院药学杂志，2007，27（5）：662-664.
论文作者:郑正,许倩,汪海宣
论文发表刊物:《中国蒙医药》2017年第10期
论文发表时间:2017/9/11
标签：批号论文; 剂型论文; 溶液论文; 地黄论文; 精密论文; 丹皮论文; 制剂论文; 《中国蒙医药》2017年第10期论文;