四川福森特司法鉴定所 610041
摘要：法医无证学是司法鉴定与自然科学结合的学科，从DNA鉴定理论基础研究后我国在该方面有了一定提升。现阶段，法医物证为一些研究提供了多种技术与研究形式，尤其是个体判断与亲子鉴定，广泛应用在法医物证学中。此外，DNA指纹技术也在法医无证学中有一定应用，例如：案件审理等。
关键词：DNA鉴定技术；法医物证学；应用方法
法医物证学应用在DNA鉴定技术中即是将遗传学作为理论支撑，把生物检测中DNA分子作为研究对象且对个体判断与亲子鉴定等问题进行分析。接下来，笔者结合实践研究，就DNA鉴定技术在法医物证学的应用进行简要分析。
一、DNA鉴定技术分型研究
DNA、STR分型技术、minsSTR技术、单核苷酸多态分型技术、线粒体DNA等都在法医物证学中得到了有效应用，特别是在刑事案例侦查中有着重要作用，是科学取证的途径之一。其中，DNA、STR分型技术原理为结合短串联重复序列作为遗传标志，经过高分辨率的凝胶电泳分离得到基因进而展开科学分析，获取DNA样本随后增加PCR且把电泳分离。最后，展开基因分析。minsSTR技术则是对微量或严重降解生物展开检测，利用降低的STR位点增多片断让增扩的片断大小维持在100bp就能够有效提升等位基因检出率。据调查显示，在讲解DNA样本分析中，将其作为常规方式的STR基因座检验展开科学补充。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆而minsSTR技术在具体利用时也存在较大局限性，例如：在构件复合增扩体系过程中通常仅能把较少的基因座增扩。同时，minsSTR引物与传统引物融合范围中存在较多的碱基的缺少，进而与传统STR分型结果有着明显差别。
此外，单核苷酸多态性分型技术作为第三代遗传标记，相对于传统的STR基因座对此，扩增产物较短。所以，存在PCR阻碍与高度讲解问题使得样本分析具有较大困难，突变率较低，将其应用于法医物证中多是经过群体灾难进行个体判断。目前，SNPs检验技术涵盖：变性梯度凝胶电凝、引物延伸技术与飞行时间质谱技术等。不过，无论使用任何一项技术全部都需要用到复杂的设备，一些与实验室设备有着明显差别，从而造成该项检测技术的大范围应用，并且目前SNP检测技术应用也不断增多。线粒体DNA在细胞质内的主要遗传形式为母系遗传方式，各细胞内含有上百个线粒体且其环状结构不容易受到降解DNA分子外切核酸酶影响，不容易降解，在法医物证学中多是通过微量及缺乏核DNA检测中。而线粒DNA也可以利用中属鉴定形式。结合部分对mtDNAHVI及细胞色素b片断片复合扩增鉴定人与动物混合学痕种属的应用价值。不过，线粒体DNA有着异质性，能够出现两种或以上的对mtDNA。所以，将其应用在法医物证学内个体判断与亲子鉴定上并不稳定，结果有待进一步证实。
二、多位点DNA指纹技术
在侦查办案中DNA指纹技术应用较为常见，检测材料包含：精液、阴道分泌物、血液、毛发等多种核细胞。通过DNA指纹图技术操作较为繁杂，流程复杂，各环节操作对结果有一定影响。想要确保结果准确还应满足以下几点要求：第一，确保有充足的高分子量DNA，其参数控制在1.8左右且保证其质量。提取时，注意力量控制，防止发生DNA大分子断裂问题。第二，对于限制性内切酶消化DNA具有一定繁杂性，违规操作容易污染DNA导致DNA被剪切，进而改变DNA片段长度，其结果也是错误的。因此，酶与样品、缓冲液体应均匀。体系内对于甘油浓度应在5%以下，否则容易发生抑制酶解，保持在30微升即可。第三，DNA琼脂糖凝胶电泳分离过程中，凝胶板厚度应低于4mm。把凝胶板放置在4℃环境下30min，有利于样品加样。不过，若电泳超出室内温度，热量挥发缓慢则会造成凝胶变形使得电泳迁移率变快，降低分离效果。通常会提升降低电压与电流，把电泳时间延长。第四，真空转移保证高效与迅速。转移时，通过玻管在胶表层轻轻滚动把胶布底的泡沫去除，操作一定要轻缓，防止谱带变形，转移通常应保持1.5h。第五，注意标记效率，确保杂交成功率。通过非同位素探针标记属于生化工程，把探针溶液稀释，热变形5min后放进冰浴内，通过等体积标记试剂且把所有物质放入混合，做好水浴反应。第六，在非同位素杂交膜洗脱过程中也要做好质量控制，对其背景清晰度，在更换溶液过程中通过滤纸把膜吸收干净。最后，把X线片冲洗，显影液应保证新鲜性，使用频率至少10次以上，显影条件保持在20℃左右。
强奸案中进行DNA指纹图检验，在搜集现场检验材料后准备检测，将精子提取出来，若DNA酶解不开可能存在几点因素：第一，与DNA溶液浓度不准确；第二，混合斑载体内有布料或泥土物质，带有小分子在DNA内。伴随着大分子DNA沉淀融入DNA溶液内，其物质对酶具有一定抑制效果导致酶解不开。通常把溶液均匀摇动且保证DNA量获得有效解决。对于酶解不完全条件下至今未有详细的解决方法。据调查显示，DNA指纹图谱带有漂移状态，两个样品DNA谱带形状有一定差别且谱带之间有一定距离，迁移率也会有所不同。在亲子鉴定中应给予高度重视，不可有任何偏差。
相同样品不同酶解时间检测时，对于不完全酶解与完全酶解的DNA样品，指纹图谱也有一定不同。不完全酶解谱带较多并存在较多不稳定带，这与酶解时间有着一定关系。在酶解时间不充足时，一些酶切位点并未辨别与切割，片段超出安全酶解。所以，现实操作时应对酶解时间有一定控制，约4h是其正常酶解时间，不过其DNA量提高时可以适时增加时间，保证酶解效果。
结语：
现阶段，DNA鉴定技术受一些因素影响，例如：应用仪器试剂等影响。DNA鉴定技术在法医物证学中常见应用STR分型技术、DNA、minSTR技术与单核苷酸多态性分型技术、线粒体DNA等形式，推动法医物证学提升。
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论文作者:钟倩,孙贝蕾,代瑶
论文发表刊物:《健康世界》2018年7期
论文发表时间:2018/6/11
标签：法医论文; 技术论文; 物证论文; 鉴定论文; 有一定论文; 电泳论文; 线粒体论文; 《健康世界》2018年7期论文;