姜涛
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【摘 要】目的：肾脏的急慢性炎症与肾脏疾病的进展密切相关，本研究拟通过基因芯片技术及病理学方法探讨姜黄素对内毒素脂多糖（LPS）所致肾脏炎症的保护作用的机制。方法：SPF级昆明种小鼠9只，鼠龄6～ 8周，体重20～ 25 g。小鼠分为3组：（1）正常对照组：腹腔注射生理盐水；（2）模型组（LPS组）：腹腔注射LPS（5 mg/kg）；（3）治疗组（姜黄素+ LPS）：动物先腹腔注射姜黄素（1 mg/kg或5 mg/kg）3 d，然后腹腔注射LPS 1 mg/kg或5mg/kg。于处理后6 h取材，切取部分肾组织用10%甲醛固定，HE染色，进行病理学观察。部分肾组织用于MCP- 1 mRNA检测。将肾小管上皮细胞（HK- 2细胞）培养于KSF培养液中，设正常对照组给予正常培养液，LPS刺激组（1 ng/ml，100 ng/ml和10μg/ml），LPS刺激+姜黄素（5μmol/ L和50μmol/ L）处理组，分别培养4 h和24 h后收集细胞，应用Real- time PCR检测各组细胞MCP- 1的表达。ELISA检测细胞培养上清液中MCP- 1的表达。EMSA检测肾小管上皮细胞NF-κB的活性。结果：肾组织基因表达谱显示，符合LPS刺激后基因表达水平上升，并经姜黄素治疗后表达水平下降的共有148个Affy IDs（A组），而呈相反趋势的有133个Affy IDs（B组）。在前组的差异基因中，统计筛选得21个Gene Ontology（GO）的功能节点（P≤ 0.01）。在生物过程角度方面，其中富量最高的为调节巨噬细胞活化和巨噬细胞活化相关基因。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆在细胞定位角度方面，有4个GO的功能节点（P≤ 0.01），在分子结构角度方面，有7个GO的功能节点（P≤ 0.01）。在B组中，在生物学过程角度方面，有2个GO的功能节点（P≤ 0.01）；在细胞定位角度方面，有1个GO的功能节点（P≤ 0.01）。研究还发现了姜黄素抑制内毒素所致肾脏炎症作用机制的信号通路及可能的靶位基因。结论：早期给予姜黄素治疗，能明显改善LPS诱导的小鼠肾脏趋化因子MCP- 1的表达，从而发挥其肾脏损伤的保护功能；而体外研究表明姜黄素可抑制LPS所诱导的肾小管上皮细胞MCP- 1表达，其作用可能与抑制细胞NF-κB的活性有关。
【关键词】肾脏炎症；脂多糖；姜黄素
肾脏炎症状态是许多急慢性肾脏病的主要病理改变之一。绝大多数肾小球疾病进展都表现为肾脏功能进行性下降伴肾小球硬化，小管间质纤维化。革兰阴性细菌产生的脂多糖（LPS）是重要的致炎因子，可激活核因子-κB（NF-κB）[1]等，并刺激分泌一系列炎症因子如单核细胞趋化蛋白- 1（MCP- 1）[2]、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）[3]、IL- 1β和IL- 6等，导致血管通透性升高，炎症细胞浸润等。如果我们能够在基因水平上定位抗纤维化的靶标，就能更好的干预肾脏纤维化的进程。姜黄素是从中药姜黄中提取的一种酚类物质。研究证明，姜黄素作用广泛，具有清除氧自由基、抗纤维化、抗细胞增殖、抗炎等性质，且长期应用无明显毒性。本研究利用腹腔注射LPS诱导肾脏炎症的动物模型，以及LPS刺激肾小管上皮细胞，观察LPS对肾脏及肾小管上皮细胞表达MCP- 1的作用，并进一步研究姜黄素对此的拮抗作用。
1材料与方法
2结果
2.1基因芯片检测结果
2.2腹腔注射LPS对肾组织的影响
2.3 LPS对HK- 2细胞的影响
参考文献：
论文作者:姜涛
论文发表刊物:《中国医学人文》(学术版)2016年1月第2期
论文发表时间:2016/5/9
标签：姜黄论文; 肾脏论文; 炎症论文; 肾小管论文; 细胞论文; 腹腔论文; 基因论文; 《中国医学人文》(学术版)2016年1月第2期论文;