摘 要：CytoDiff 试剂盒是专门为HematoFlowTM血球流式术平台而研发的试剂盒，它包含了5色6抗体的组合试剂，可以快速将全血中9类白细胞进行精确分类，从而将精确的免疫抗体诊断方法引入传统的血液检测领域，使HematoFlowTM血球流式成为最新、最先进的血液分析平台。对疾病的诊断与鉴别、疗效评估、预后判断等非常重要，对机体亚健康状态的诊断及发生相关疾病的评估，具有重要意义。
关键词：CytoDiff ；白细胞分析 ；临床应用
一．HematoFlowTM血球流式的发展历程：
从1949年贝克曼库尔特公司研发出人类历史上第一台血液分析仪开始，历经70余年，随着电子、光学、自动化、化学分析、计算机等各个学科的飞速发展，如今的全自动血细胞分析仪已经是各级医院最常见的检验仪器，它提供了血液分析分类的第一级筛检的工作，降低了人工劳动的强度，大大提高了临床血液学检验的质量和效率。而且随着各种设备方法学和组件的精密度的提高，现在的高级全自动血液分析仪甚至可以提供原始细胞、未成熟粒细胞、异形淋巴细胞等等报警旗标信息，进一步的为显微镜复检提供支持。但第一级筛检毕竟不能完成全部的检测任务，人工镜检复核依然不可替代。全自动血液分析仪检测结果中大约25%-30%出现的旗标的结果或异常结果，依然必须人工镜检来完成最后的人工校正和结果确认。人工镜检需要经过多年训练的高技能检验医生来操作，且受主管因素、计数数目、样本情况、规则不同等因素的影响，结果差异很大，实际上，很多医院的复检率并不达标，必然会造成很多假阳性和假阴性的结果，影响临床后续治疗。
基于这种困惑血液学检测的实际现象和需求，贝克曼库尔特公司创造性的将全自动血液分析仪（DxH 800/LH 700系列）与世界上第一台激光五色的流式细胞仪—FC 500有效结合，使用专利的CytoDiff TM试剂盒检测，用CXP软件系统进行分析，从而将精确的免疫抗体诊断方法引入传统的血液检测领域，研发出HematoFlowTM血球流式术这一最新最先进的血液分析平台。它的主要优势有：高通量，高精密度，提高了周转效率和复检标准，降低了复检的时间和人力成本，而且很容易操作和掌握。采HematoFlowTM血球流式术平台成功的降低了70%手工复片镜检率，大大降低实验室人力负担，实际上，由于采用了高度集成智能化的CXP软件操控流式部分，可以很快的使操作人员掌握，同时又将检测的准确性和速度得到提升，成为高端血液实验室的必然之选。
二．检测的原理
CytoDiff 组合试剂中的特异性抗体可与白细胞膜上相应的抗原决定簇相结合，经过孵育，裂解（固定）等步骤后，在流式细胞仪上进行分析，通过射门策略可将分析中的白细胞进一步分为9类，结果以阳性细胞的百分比表示。
三．试剂组成
CytoDiff 试剂盒是专门为HematoFlowTM血球流式术平台而研发的试剂盒，它包含了5色6抗体的组合试剂，可以快速将全血中9类白细胞进行精确分类。它使用的单抗有：CD36-FITC、CD2-PE、CD294（CRTH2）-PE、CD19-ECD、CD16-PC5、CD45-PC7等6种，可以特异性的分类白细胞的报告类型为下表所列：
CytoDiff™试剂盒抗体组成 (5-Colors, 6-Markers)
四.CXP软件自动射门进行智能精确分析，检测技术的射门流程
1. CytoDiff CXP软件分析流程
2.CytoDiff检测对白细胞分类的拓展（16个白细胞亚群）
五．双平台系统优势
外周血淋巴细胞绝对计数方法分为单平台和双平台2种，以往普遍认为单平台FCM干扰因素较少，建议作为首先方法【1】但HULTIN等的研究结果显示，基于样本溶血免洗、CD45设门的FCM和全自动血细胞分析的双平台法测得的T细胞绝对值的室间变异系（coefficent of variation,CV）低于单平台FCM[2]。还有研究证明，即使是基于前向散射信号（forward scatter,FSC）/侧向散射信号（side scatter,SSC）射门，双平台FCM绝对计数的室内CV亦明显 低于单平台FCM，在外周血T细胞绝对计数中，双平台FCM的随机误差略小于单平台FCM，结果重复性较好，用于临床检测时更稳定，对变化反应更敏感。
六.HematoFlow TM血球流式术的临床应用
HematoFlowTM血球流式术的推出，使未成熟粒细胞，原始细胞，异常淋巴细胞等细胞类型可以得到迅速准确的分类和确认，为临床决策和治疗争取了宝贵时间，对临床治疗过程中的指导和提示作用也有显著意义。
目前，越来越多的临床研究表明HematoFlowTM及CytoDiff TM在淋巴细胞减低症患者有很好的确诊价值[3] 。检测淋巴细胞亚群绝对值的流式细胞术（flow cytometry,FCM）正逐渐成为临床判断预后和指导治疗的重要方法⑴，尤其是在人类免疫缺陷病毒（humanimmunodeficiency virus,HIV）感染者的病情判断和治疗监测中必不可少，但在经济欠发达地区，则期望探寻更经济有效的方法。还有研究者发现在HIV治疗过程中，由CytoDiff TM所检测出的某类白细胞亚群与不同分期阶段的HIV患者的感染发生率密切相关。这一系列研究使得HematoFlow TM及CytoDiff TM已经成为血液学检测中最为前沿的临床诊断及治疗工具，服务于全世界所有的临床与实验室医生，已经成为国际血液分析整体解决方案中的趋势和核心组成部分。
参考文献
[1]吴丽娟，刘霞，赵文利.流式单平台和双平台计数定量检测外周血淋巴细胞亚群的实验研究【J】.国际检验医学杂志，2012,33（2）：143-145.
[2]胡晓蕾，周灵玲，赵志钢.单平台与双平台流式细胞术T细胞亚群绝对计数的比较【J】.检验医学2016,31（7）：593-598
[3]屈晨雪，王建中等，快速流失细胞术分类计数外周血白细胞生物参考区间的建立和验证，中华医学杂志2015年7月14日第95卷第26期.
论文作者:李巧清 陈艳芝 张思荣 张永清 刘璐 何丽萍
论文发表刊物:《中国医学人文》2017年第1期
论文发表时间:2017/5/18
标签：白细胞论文; 流式论文; 血球论文; 细胞论文; 血液论文; 淋巴细胞论文; 平台论文; 《中国医学人文》2017年第1期论文;