云南省肿瘤医院(昆明医科大学第三附属医院)650000
【摘要】目的:对肺癌血液EGFR(表皮生长因子受体)突变检测的结果及临床意义进行分析。方法:将2017年10月至2018年10月我院收治48例肺癌患者的血浆与其中30例相对应的肿瘤组织中对NDA进行提取,经PCR扩增及基因测序的方法对EGFR基因突变进行检测,分析检测结果。结果:①肿瘤组织突变类型与血浆游离DNA EGFR基因突变类型相同。②男性与女性突变率比较并无差异(P>0.05);有无吸烟史突变率比较并无差异(P>0.05);在病理分型中,腺癌突变率高于鳞癌、腺鳞癌、大细胞癌及小细胞癌突变率,数据差异显著(P<0.05)。结论:肿瘤组织突变类型与血浆游离DNA EGFR基因突变类型相同且腺癌突变发生率比较高。血液EGFR突变检测在肺癌中发挥着重要的作用,为临床的治疗提供科学依据,降低医疗风险的发生,保证患者治疗质量。
【关键词】肺癌;血液;EGFR突变
因受到各种因素的影响,导致肺癌的发病率呈逐年上升的趋势,虽然经过治疗可控制病情的发展,但是预后效果并不是很理想,缩短了患者的生存时间[1]。目前临床治疗肿瘤以分子靶向药物为主,有学者指出,影响靶向药物治疗的重要因素是肺癌组织中EGFR酪氨酸激酶编码区基因突变,与治疗的效果有着直接的关系,因此检测EGFR突变有着重要的意义[2]。此次研究旨在分析肺癌血液EGFR突变检测的结果及临床意义,数据资料报告如下。
1研究资料与方法
1.1研究资料
将2017年10月至2018年10月我院收治48例肺癌患者作为本次研究对象,其中男性33例,女性15例,年龄45~73岁,均值(59.0±6.6)岁。在其中30例患者提供了手术切除的肿瘤组织。
1.2方法
1.2.1血浆标本及血浆循环DNA的提取
通过静脉抽取外周血,为5ml,然后将其放在抗凝离心管内,做离心处理,时间约10min,取出上清血并置于离心管中,进行离心处理,时间约10min,将上清血(1.5ml/管)在-80℃的环境下保存。在解冻之后严格按照流程提取DNA,然后溶于双蒸水内,通过紫外分光光度计对DNA的纯度与含量进行测定,然后在-20℃的环境下保存。
1.2.2组织样本的采集与DNA的提取
肺癌组织在手术离体后经过一定的处理在-80℃的环境下保存。取30mg癌组织,置于Eppen-dorf管中,严格按照试剂盒说明书对DNA进行提取,通过紫外分光光度计对DNA的纯度与含量进行测定,A280/A260应在1.80之上,DNA浓度维持在50ng/uL。
1.2.3EGFR外显子19,21特异性PCR与基因测序
将肺癌患者循环DNA与癌组织DNA产物作为模板,扩增EGFR因子19,21外显子。PCR扩增经Taq Master聚合酶5uL,模板DNA2uL,上下游引物分别为0.2u/L,使用双蒸水将其补充到10uL。对扩增产物进行EB染色摄影处理,针对阳性扩增条带样本通过柱层析分离纯化后对基因进行测序。
1.3观察指标
比较肿瘤组织与血浆EGFR基因突变的关系与EGFR突变与患者数据资料之间的关系。
1.4统计学分析
本次研究数据经过SPSS19.0进行总汇处理,用率(%)来代表计数资料,进行χ2检验,P<0.05为数据差异有统计学意义。
2结果
2.1肿瘤组织与血浆EGFR基因突变的关系
在30例肿瘤组织中,共8例患者为EGFR突变;7例患者为19外显子突变,其中6例患者为del E746-A750,1例患者为L747-S752;1例患者为21外显子突变,均为L858R。由此可知,肿瘤组织突变类型与血浆游离DNA EGFR基因突变类型相同。
2.2EGFR突变与患者数据资料之间的关系
男性与女性突变率比较并无差异(P>0.05);有无吸烟史突变率比较并无差异(P>0.05);在病理分型中,腺癌突变率高于鳞癌、腺鳞癌、大细胞癌及小细胞癌突变率,数据差异显著(P<0.05)。详情数据见下表1。
3讨论
在肺癌分子靶向治疗中,对EGFR酪氨酸酶抑制剂予以了大量的研究报告,通过研究发现,在EGFR酪氨酸酶抑制剂治疗的过程中,只有一部分患者对药物有反应,对TKI敏感的肺癌患者基本都有EGFR基因体细胞突变[3]。临床中检测EGFR基因突变的来源以手术切除癌组织为主,但是却不适用于晚期肺癌患者,分析其原因为获取癌组织标本比较困难,虽然通过纤维支气管镜活检可获取组织标本,但是对患者造成的创伤也是比较大的,获取的癌组织也并不是很理想[4]。所以,经组织标本可以对EGFR基因突变进行检测,在评估EGFR酪氨酸酶抑制剂靶向药物的治疗中发挥着重要的意义。
经研究证实,肿瘤组织突变类型与血浆游离DNA EGFR基因突变类型相同且腺癌突变发生率比较高。总而言之,血液EGFR突变检测在肺癌中发挥着重要的作用,为临床的治疗提供科学的依据,同时也降低了医疗风险的发生,保证患者的治疗质量。
参考文献
[1]黄健,王于理,代平等.胸水、血液EGFR基因突变检测在非小细胞肺癌治疗中的应用价值[J].山东医药,2018,58(6):61-63.
[2]浙江省抗癌协会抗癌药物专业委员会专家组.浙江省非小细胞肺癌血液EGFR基因突变检测专家共识[J].浙江医学,2016,38(4):233-236,290.
[3]沈才路.液体标本在非小细胞肺癌EGFR突变检测中的应用[J].国际检验医学杂志,2018,39(16):1947-1950.
[4]潘志文,朱静,徐笑红等.肺癌血液EGFR突变检测结果及临床意义分析[J].检验医学与临床,2017,14(Z1):265-267.
论文作者:姜明兴
论文发表刊物:《健康世界》2019年第05期
论文发表时间:2019/6/21
标签:突变论文; 肺癌论文; 患者论文; 组织论文; 血浆论文; 酪氨酸论文; 基因突变论文; 《健康世界》2019年第05期论文;