张勇，杨洪林，姚鹏飞，李志英
（广东华医大司法鉴定中心，广东 广州 510410）
[摘要]目的：分析STR分型技术在亲子鉴定中的作用价值。方法：选择6对生物学父子（12人次），并随机选择12名无关个体，采取STR分型技术检测分析24人次之前的关系。结果： 6对生物学父子的累积亲权指数均大于1×104，累积非父排除概率均为0.9999，6对无关个体组成的假设父子的累积亲权指数均小于1×10-4，累积非父排除概率均为0.0000。结论：STR分型技术在亲子鉴定可以较准确判断亲子之间关系，对于亲子鉴定、刑侦案件等审查具有积极意义，国家需要不断出台相关法律保护受检者的隐私权。
[关键词] STR分型技术；亲子鉴定；亲权指数；非父排除概率
亲子鉴定是指应用生物学、遗传学以及法医学等方法对人类的遗传标志物进行检测从而分析出不同个体之间的血缘关系[1]。从古代的“滴血认亲”到现代DNA水平的遗传标记，亲子鉴定技术获得飞速发展。目前需要进行亲子鉴定的项目主要包括抱养认亲、刑事案件侦查、移民需要以及出生证明信息不全等，STR分型结果很大程度上对于案件的突破等具有协助作用，因此运用STR分型技术进行亲子鉴定时需要严格按照相关法律法规和方法技术进行检测。
STR（Short Tandem Repeat，短串联重复序列）遗传标记具有很高的序列长度多态性，其原理是运用PCR扩增技术，将人类染色体上特异性较高的基因片段特异性筛选出来，在通过毛细管电泳技术将筛选出来的DNA片段进行分型检测，以获得较高的个体识别力[2]。根据以上情况，本次笔者分析STR分型技术在亲子鉴定中的作用价值，旨在为后续DNA技术临床应用提供数据参考。
1.材料与方法
1.1 仪器设备与试剂
检测主要仪器有医用高速离心机（TG20M），PCR仪（ABI 9700），超净工作台（SW-CJ-ID）、3130XL 电泳仪（ABI）等。主要试剂有Chelex-100，Microreader™ 21 Direct ID System（阅微基因）等。
1.2 受检对象
2017年11月选取6对生物学父子（12人次）的STR分型结果，同时随机选择12名无关个体的STR分型结果，人员年龄10-45岁，平均（32.2±10.9）岁，并随机的两两组合为假设父子6对。所有受检者均来自广东华医大司法鉴定中心的正常案件当事人，并取得运用受检者STR分型结果进行统计研究的同意说明。本次研究方案经过我中心相关部门的一致认可，符合伦理道德法规要求。
1.3方法
1.3.1 样品采集
用指尖采血法将受检者血液样品采集到FTA血卡，编号后送至实验室。
1.3.2 检测方法
用Chelex-100法提取血样DNA，然后用Microreader™ 21 Direct ID System试剂盒进行PCR扩增，反应体系为4μl mix，2μl primer，0.2μl酶，2.8μl ddH2O，1μl 模板DNA，总体积10μl。PCR扩增分别为95℃预变性5min； 95℃ 5s、61℃ 20s、72℃ 15s，28个循环；72℃ 30min；4℃保存。同时设立阳性对照和阴性对照。待PCR扩增完成后在AB3130XL电泳仪上进行DNA分型。
1.3.3 检测指标
Microreader™ 21 Direct ID System试剂盒所检测的STR基因座分别为D19S433、D5S818、D21S11、D18S51、D6S1043、D3S1358、D13S317、D7S820、D16S539、CSF1PO、Penta D、D2S441、vWA、D8S1179、TPOX、Penta E、TH01、D12S391、D2S1338、FGA、Amelogenin共21个位点。
1.4 统计分析
电泳结果用GeneMapper软件处理分析，得出受检者的DNA分型结果后计算每一对生物学父子和假设父子的累积亲权指数和累积非父排除概率。
2.结果
6对具有生物学亲子关系父子的累积亲权指数和累积非父排除概率见表1，10对假设父子的亲权指数和累积非父排除概率见表2。
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3.讨论
由于STR分型技术具有较高的多态性和特异性，其DNA分型结果包含有丰富的遗传信息，并且遵循孟德尔遗传学定律，可以比较稳定的遗传给后代，因此这该种技术在亲子鉴定和刑侦案件中被广泛使用[3]。STR分型技术开辟了一条生物分子检验学的领域，使得个体识别以及亲子鉴定在同一水平，该方法获得的结果更加科学严谨和具有说服力，并服务于法律和社会。例如在父母不在的情况下，通过亲属之间的鉴定可以确定其之间的生物学关系；在强奸案中，可利用STR分型技术识别犯罪嫌疑人的身份，并视为案件的有效证据可被采纳。运用FTA血卡采集的血样DNA可在常温下长期保存[4]，同时 STR分型结果长期有效，使得STR分型技术在户口登记、财产继承纠纷、强奸案判断、个体识别、医院抱错婴幼儿、儿童拐卖以及婚外生育子女等问题上成为有效的解决方法。在本次的研究结果中，6对生物学父子的累积非父排除概率达0.9999，累积亲权指数均大于1×104（>10000），6对假设父子的累积非父排除概率为0.0000，累积亲权指数均小于1×10-4（<10000），判断准确率为100%，这一结果足以证明该项技术的可靠性。
虽然STR分型技术广泛应用于亲子鉴定和个体识别等案件，但作为新型的鉴定技术，其存在的伦理问题也是不可回避的。他涉及当事人隐私、孩子尊严、家庭利益、婚姻破裂等，特别是在未婚生育的情况下，应该充分保护当事人的隐私和孩子的尊严。
STR分型技术在亲子鉴定中具有较高的利用价值，可以较准确的判断受检者之间的生物学关系[5]，对于认亲和强奸等案件均具有积极的作用，但国家需要出台更多的政策和法律法规来进一步规范亲子鉴定中可能出现的问题。最后，随着亲子鉴定技术的不断发展和完善，其检测方法也会不断的简单化、规范化和标准化，相信STR分型技术将会更好的服务于法律、社会和科学研究。
参考文献
[1]Bady P, Diserens A C, Castella V, et al. DNA fingerprinting of glioma cell lines and con-siderations on similarity measurements，Neuro-oncology, 2012 (6)．
[2]王文波,王兰,王馨,等.抗CD20人鼠嵌合单抗N糖的毛细管电泳分析[J].中国新药杂志.2015(20).
[3]Williams M D, Temple M A, Reising D R. Augmenting bit-level network security usingphysical layer RF-DNA fingerprinting//Global Telecommunications Conference (GLOBECOM2010)．2010 IEEE. IEEE, 2010．
[4]刘琳,项林平,胡志敏,等. FTA卡血样快速直接PCR扩增方法比较初探[J].中国法医学杂志, 2014(03).
[5]李成涛,郭宏,赵珍敏,等. 亲权鉴定中常用STR 基因座的基因组学和遗传学分析[J].法医学杂志, 2008, 24(3): 214-220.
论文作者:张勇，杨洪林，姚鹏飞，李志英
论文发表刊物:《医师在线》2018年6月上第11期
论文发表时间:2018/9/26
标签：技术论文; 亲子鉴定论文; 父子论文; 生物学论文; 概率论文; 个体论文; 指数论文; 《医师在线》2018年6月上第11期论文;