（1.岳阳市中医医院 湖南 岳阳 414000）
（2.湖南中医药大学针灸推拿学院 湖南 长沙 410007）
【摘 要】目的：观察电针刺激颈夹脊旁开1寸对神经根型颈椎病大鼠局部神经组织内炎症细胞因子含量的影响。方法：8周龄Wistar大鼠50只，随机平均分成模型组，电针颈夹脊穴组，电针颈夹脊旁开1寸组，芬必得75mg/kg/d组及假手术组，建立神经根型颈椎病大鼠模型，以相应方法治疗7天后处死，取材并制作局部神经组织匀浆，取上清液以ELISA法测定其中IL-1β、IL-6的含量。结果：治疗结束后，模型组大鼠局部神经组织内细胞因子IL-1β、IL-6水平较假手术组明显升高（P＜0.01），且电针颈夹脊旁开1寸组大鼠受损的脊髓及神经组织中IL-1β及IL-6的含量较其余组别低（P＜0.01）。结论：电针刺激颈夹脊穴旁开1寸能显著降低局部神经根受损后所致的神经组织炎性细胞因子的高水平表达。
【关键词】神经根型颈椎病；针刺颈夹脊穴旁开1寸；炎性细胞因子IL-1β；IL-6
【中图分类号】R681.5+4 【文献标识码】B 【文章编号】1003-5028（2015）8-0867-02
Expression of inflammatory cytokines in the model of cervical spondylosis of nerve root type by acupuncturing 1 inch of Cervical JiaJi point.
【ABSTRACT】Objective：To observe the effect of electric acupuncturing 1 inch of Cervical JiaJi point on the content of inflammatory cytokines in the local nerve tissue of rats with nerve root type cervical spondylosis。Methods：50 male 8-week-old Wistar rats were randomly divided into model group, electro acupuncture at Cervical Jiaji points group,electro acupuncture at 1 inch of Cervical JiaJi point group, Fenbid 75mg/kg/d group and sham operation group, the establishment of rat model of cervical spondylosis of nerve root type, with the corresponding method of treatment after 7 days and made by tissue homogenate supernatant was measured by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) for determination of the content of IL-1, IL-6.Results：At the end of the treatment, the levels of IL-1 and IL-6 in the model group were significantly higher than those in the sham operation group (P < 0.01), and the content of IL-6 and IL-1 in the electro acupuncture at 1 inch of Cervical JiaJi point group were lower than those in the other groups (P < 0.01).Conclusion：Electro acupuncturing at 1 inch of Cervical JiaJi point can significantly reduce the high level expression of inflammatory cytokines induced by local nerve root injury.
【KEY WORDS】nerve root type cervical spondylosis; acupuncturing 1 inch of Cervical JiaJi point; Inflammatory cytokines IL-1 beta, IL-6
神经根型颈椎病占颈椎病人群总患病率的50％一60％[1]，其主要症状是颈神经根性疼痛、麻木、上肢无力等，其发病可能与脊神经根，特别是背根神经节受到机械压迫和炎症刺激，以致发生慢性损伤有关。本实验旨在探讨电针刺激夹脊穴旁开1寸对根痛性神经根型颈椎病模型大鼠的炎性细胞因子表达的影响，为从分子生物学角度，明确电针针刺夹脊旁开1寸对于神经根型颈椎病在治疗上的作用原理，为电针刺激夹脊穴旁开1寸临床治疗神经根型颈椎病提供实验依据。
1 材料与方法
1.1动物与造模
选择8周龄Wistar大鼠50只，体重200±20g。大鼠在标准动物饲养间饲养，温度23±2℃，湿度50%~70%，12h明暗交替。适应性饲养1周后，将大鼠随机分为造模组和假手术组，其中造模组和假手术组样本量为4:1；按高曦等[2]报道的方法制作模拟颈神经根型损伤大鼠。将大鼠用10%水合氯醛按照12.sml/kg腹腔麻醉后，俯卧位，固定于手术台上，颈部下方垫备一个厚度约l.0cm的棉垫，使大鼠的颈椎后突，便于操作，常规备皮、消毒、铺巾，以第七颈椎棘突为标记。以颈7为中心，沿棘突纵行逐层切开皮肤、皮下组织、颈部筋膜，切口约为2cm，用眼科显微子钝性分离棘突两侧的肌肉，暴露棘突及左侧椎板，用眼科剪刀剪断颈7左侧横突及椎板，显露出左侧颈7神经根。其中造模组应仔细分离神经根与周围的组织，将浸有福尔马林的定量滤纸片放在颈7神经根肩上，逐层缝合，关闭切口。假手术组在剪断椎板后即逐层缝合，关闭切口。所有操作均在无菌条件下进行，术后每只大鼠腹腔注射青霉素1万u，常规饲养，其中术中及术后大鼠死亡3只。
1.2模型评价
按张军等[3]的模型评价标准，造模鼠建立后，大鼠动作表现不活跃。如在有外在的异常惊动时，只能用右上肢及双下肢缓慢爬行，左上肢紧贴胸前，不敢触地，肘关节、腕关节不活动，第2、3趾紧缩。同时，用棉签轻触C7神经根分布区，模型鼠表现为，身体迅速躲闪，并持续不断地嘶叫。假手术组大鼠行为较手术前无明显异常改变。可认为造模成功。
1.3动物分组和处理
待造模成功后，将造模组各随机平均分为4组，分别是模型组，电针颈夹脊穴组，电针颈夹脊旁开1寸组，芬必得75mg/kg/d组。模型组：每日绑缚于平板上15分钟。电针颈夹脊穴组：每日绑缚于平板上，并针刺双侧夹脊穴，根据中国针灸学会实验针灸研究会制定的动物针灸穴位图谱[4]，取双侧C6、C7“夹脊”(位于大鼠颈椎棘突间旁开约0.5cm处)，常规消毒穴区皮肤，选用华佗牌28号0.5寸不锈钢毫针，直刺进针，进针深度0.3一0.6cm，小幅度提插捻转后，针柄接G6805-l 电针仪，波型:密波，频率:75Hz，电流强度:2.5mA[5]，双侧电针刺激，共两组电针。每日1次，每次15min。电针颈夹脊旁开1寸组：每日绑缚于平板上，针刺大鼠双侧C6、C7颈椎棘突旁开1.5cm处，常规消毒穴区皮肤，选用华佗牌28号0.5寸不锈钢毫针，直刺进针，进针深度0.3一0.6cm，小幅度提插捻转后，针柄接G6805-l 电针仪，波型:密波，频率:75Hz，电流强度:2.5mA，双侧电针刺激，共两组电针。每日1次，每次15min。芬必得75mg/kg/d组：每日绑缚于平板上15分钟，每日根据体重灌喂芬必得，75mg/kg。假手术组：同模型组，每日绑缚于平板上15分钟。以上4组均按如上方法连续治疗7天。
1.4取材及指标检测
动物于造模并电针及药物干预后7天用10%水合氯醛过量麻醉致死，其中造模组将放置有浸有福尔马林的定量滤纸片处的脊髓及神经根在4℃以下生理盐水制成20%组织匀浆，假手术组按上述方法取相同节段神经组织经行组织匀浆制作；按照ELISA试剂盒说明书方法测定神经组织中IL-1β，IL-6，结果以每毫克蛋白所含细胞因子量（pg）来表示，即pg/mg pro。
2 结果
实验数据用SPSS17.O软件进行统计学处理。数据以均数±标准差( ±s)，多组间比较用单因素方差分析(ANOVA)。结果见表-1
3 讨论
神经根型颈椎病的危害：颈椎病是现代社会中的常见病和多发病，发病年龄多集中在40-80岁之间，颈椎的退化从20岁即开始出现，且衰老的趋势不可逆转，不良的生活习惯加剧了颈椎退化的过程。颈椎病的分型中，以神经根型颈椎病最为多见，表现为根性痛，上肢肌力减弱及麻木，这些症状常常严重影响人们的日常工作和生活。近20年来实验数据表明，细胞因子在外周炎性疼痛和损伤性神经病理痛的产生和持续中起到重要作用，如IL-1，IL-6等，这些细胞因子可由突出的椎间盘合成并释放，也可以有脊髓，和神经节合成.而这些细胞因子被认为在中枢痛敏感和神经痛的维持过程中具有重要作用[6]。目前临床上常用于治疗颈椎病的保守疗法有常规针灸，电针，拔罐，腹针，穴位注射，推拿，牵引，手法复位等，其中电针在镇痛等方面优于其他疗法[7]。颈夹脊旁开1寸[8]是多年的临床经验总结，它较传统的夹脊穴距颈椎棘突的距离更远，位于颈部肌肉丰厚处及临床上多数压痛点及圆形或条索状阳性反应点[9]。针刺夹脊旁开1寸可以直接作用于因炎性渗出而黏连的软组织，使其局部血液循环得到改善，黏连松解，痉挛解除，从而使得受到物理和化学双重压迫的神经根得到恢复。本研究表明，针刺颈夹脊穴和夹脊穴旁开1寸均能降低神经根型颈椎病大鼠受压神经组织局部的炎性细胞因子（IL-1β，IL-6）的水平，且数据提示电针刺激颈夹脊旁开1寸在抗炎方面较传统的电针刺激夹脊穴有一定优势，因此这种取穴方法确有疗效且值得推广。
参考文献：
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课题项目：
湖南省科技厅课题资助项目：2013SK3095，国家临床重点推拿科/国家十二五重点学科资助项目，国家重点学术流派张氏正骨流派资助项目
作者简介：
蒋学余（1971-）男，主任医师/教授，研究方向：针灸推拿治疗颈椎病及相关疾病机理研究。
通讯作者：
常小荣（1956-）研究方向：针灸推拿治病机理研究。
论文作者:蒋学余1,田园1,张洁1,李艳红1,吴卫国1,陈绍
论文发表刊物:《河南中医》2015年8月供稿
论文发表时间:2015/11/24
标签：电针论文; 神经论文; 颈椎病论文; 大鼠论文; 细胞因子论文; 模型论文; 针刺论文; 《河南中医》2015年8月供稿论文;