分析食品微生物检验检测新技术论文_陈晓玲

分析食品微生物检验检测新技术论文_陈晓玲

广东长兴生物科技股份有限公司

摘要:在全球经济不断复苏回温的当今,人们的生活水平不断提升,然而,由于食品的生产过程中还存在诸多的问题和缺陷,近年来食品安全问题屡禁不止。相关部门在意识到食品安全的重要性后,需要加大对相关微生物检验技术的研发力度。基于此,本文对食品中各类微生物及其命名做了较为详细的介绍,以为相关技术的研发提供参考。除此以外,还对目前常用的微生物检验技术做了分析,希望能够给相关人士提供一定参考。

关键词:食品微生物检测;新技术;应用;

1食品微生物分类及命名

微生物并不是生物学分类学上的专门名词,而是对所有形体微小,单细胞的或个体结构较为简单的多细胞的、甚至没有细胞结构的低等生物的统称。其群体非常庞杂,种类繁多,包括细胞型和非细胞型两类。凡具有细胞形态的微生物称为细胞型微生物。细胞型微生物按细胞结构又分为原核微生物和真核微生物。食品微生物无特殊的分类系统。按照微生物分类系统,可将与食品密切相关的微生物分为细菌、酵母菌、霉菌和病毒。由于微生物种类繁多,很多微生物的亲缘关系(根据生物的外部性状、内部结构、生活特性等加以确定)尚未清楚,所以尚不能完全按照亲缘关系进行分类。

2各项新型微生物检验技术

2.1生理生化技术

生理生化技术是利用相关的生物知识,对待检测微生物在新陈代谢过程中,产生的一些具有特殊性质的分子和物质,进行深入的研究,根据这些特性对食品中的菌种进行区分。因此,这一技术也被成为代谢学技术。这一技术具体包括两种方法,即微量生化法和、ATP生物发光法。以下是这两种方法的详细说明。

2.1.1 ATP生物发光法

众所周知,在众多的生物体中,都包含一种较为活跃能量物质,即ATP。在待检测菌种中注入荧光素酶,这种酶会和微生物体内的ATP产生反应,并且发出荧光,根据荧光强度的差异性,对微生物内含有的菌种数量进行大致判断,这种检测方法被成为ATP生物发光法。这种方法具有操作简便易行、检测速度较快等优点。通常,这种方法被应用于酒类以及乳制品的微生物检测中。由于酒类和乳制品在人们的日常生活中较为常见,因此ATP生物发光法的应用是具有较强现实意义和作用的,应该引起足够重视。

2.1.2微量生化法

微量生化法是多种微生物检测技术的总称,具体包括放射测量法、电子阻抗法、微热量技法。这些方法被应用于不同的实际情况中。首先是电子阻抗法,这种方法依赖于计算机的强大计算能力,具有众多的优点,例如可重复多次检测、抗敏感的能力较强,而且反应速度很快,这一方法在酵母菌、大肠杆菌以及乳酸菌的数量检测方面的应用较多。其次是微热量技法,众所周知,微生物在生长的过程中,大多数都会发散不同程度的热量,根据生成的热量容量的差异性,可以对不同种类的微生物进行区分,这就是微热量技法。最后是放射测量法,顾名思义,放射测量法应用到了放射技术。所有微生物体内都含有碳水化合物,将含有放射性的标记物标记在这些物质上,微生物在生长过程中,形成的含放射性的碳水化合物在数量上具有明显的差异,通过对这些差异的分析和检测,可以对微生物的数量进行鉴定。

2.2分子生物学技术

2.2.1 PCR技术

PCR技术通过将聚合酶加入到DNA模板和相应引物的混合物中,放大和扩增目标DNA片段,以此判断菌种。凭借着较高的灵敏度、简便的操作和快速性,这种方法早在二十世纪末就被广泛运用,现在常用来检测乳酸菌、大肠杆菌和双歧杆菌等。

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2.2.2 qRT-PCR技术

qRT-PCR技术即实时荧光PCR技术,它比常规的PCR技术的特异性更强,而且产生的污染更小,被广泛用于致病菌、霉菌和酵母和乳酸菌的种类和数量检测。

2.2.3 PCR-DGGE技术

PCR-DGGE技术将PCR技术和变性梯度凝胶电泳分析技术相融合,选用精细的电泳,将存在一个碱基差异的DNA片段分离开,以此检验菌种菌量。对于一些不可培养的菌种十分适用,不但检测率高,而且可以多次重复,现阶段主要用于发酵食品的微生物检测研究。

2.3免疫学检测技术

免疫学检测技术的原理就是免疫学,以待测微生物的抗原和抗体之间的反应具有的特殊性质为切入点,对该微生物含有的具有这种特殊性质的基因所表达的产物进行深入的研究和分析,通过采集到的信息,对待测微生物的种类和数量做一个大致判断。这一技术根据应用的环境和领域不同,又细分为酶联免疫吸附技术和免疫磁性微球技术。除了这两种技术以外,还包括其他的技术,本文不再做过多介绍。这一类技术具有统一的优点,即检测的效率较高,检测结果也比较具有信服力。加强对这一技术的研发,能够有效促进微生物检测技术的发展。以下是对免疫磁性微球技术和酶联免疫吸附技术的详细介绍和说明。

2.3.1免疫磁性微球技术

免疫磁性微球技术是目前应用最广泛的一种微生物检验技术,这是因为该项技术具有众多突出的优势,同时应用的范围较广泛。肉类、水果、蔬菜以及牛奶等食品,是人们生活中最常见的食品,也是最基本的食品,其安全性对于人们生活的健康而言至关重要。在生产过程中,不可避免的会产生许多微生物和细菌,如果不能及时准确地判断含有的微生物是否对人体有害,就有可能造成严重的食品安全事故。免疫磁性微球技术是一项较为先进的新型检测技术,其原理是免疫学相关知识,在对常见食物的致病菌检验中,能够显示出免疫学反应的高度特异性,以及固化试剂的突出优点,例如,操作简便易行,所需的成本较低,同时检验速度快。

2.3.2酶联免疫吸附技术

在临床诊断中,由于常常需要对病原体的种类、数量进行详细的掌握,同时需要观察病人体内抗体以及相关酶活性的情况,因此一般会采用酶联免疫吸附技术。这是由于酶联免疫吸附技术的原理决定的。该项技术在实际应用时,能够结合抗原和抗体之间的特异性,同时利用酶反应的高效性,对所需要检查的微生物的种类进行掌握,而且还能检测出不同种类菌种的数量,为临床诊断提供了依据和相当的便利性。除此以外,酶联免疫吸附技术还可以与其他技术结合,应用于新的领域。

2.4质谱技术

质谱技术通常应用于对海产品中的细菌的检测。海产品是沿海地区城市人们最常食用的食物种类之一,其安全性是至关重要的。但由于其在海水里生长,不可避免地包含了众多腐败菌,如果未经过微生物检验直接食用,可能会造成较大的安全隐患。因此,利用质谱技术对海产品进行微生物检验,是很有必要的。质谱技术出现的时间相较其他技术而言较晚,是在科学技术取得较大进展,以蛋白质组学、转录组学和代谢组学理论等一系列新型理论相继出现,被人们称之为后基因这一时代被创造的。这一技术具有较高的科技水平,在检验过程中具有速度快、准确率高等优点。其工作原理是,先对待检测样品中各种各样的细菌进行种类区分,按照质谱上的不同显示,对微生物进行识别,在这一过程中,通过采集到的信息,形成光谱指纹图谱的提取峰表,其包含了检测到的各个菌类的信息,一些特征较为特殊的菌种,可以将这种特征作为区分的依据。质谱技术往往用来检验腐败菌,但在革兰氏阳性致病菌的检验方面也有应用。

结束语

综上所述,食品安全与人们的生活息息相关,关注食品安全成为一种社会发展的必然趋势。对食品中的微生物进行深入的分析和了解,有助于提高食品的安全性。在这一过程中,可以采用各种各样的新技术,例如分子生物技术、质谱技术以及生理生化技术等,都是目前广泛使用的微生物检验检测技术。为了提高检测结果的可靠性和准确性,需要对这些技术进行不断的改进和优化,合理进行利用,以保障食品的质量安全。

论文作者:陈晓玲

论文发表刊物:《基层建设》2019年第22期

论文发表时间:2019/11/20

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