李岚[1]2003年在《人甲状腺肿瘤褪黑素及褪黑素受体的表达、改变及意义》文中认为人甲状腺肿瘤褪黑素及褪黑素受体的表达、改变及意义 褪黑素(Melatonin,MLT)是松果体主要在黑暗中分泌的一种神经内分泌激素，具有脂溶性及水溶性，化学名为5—甲氧基—N—乙酰色胺。继往认为它的作用仅是调节生物体的生理周期性节律。近年来，随着对褪黑素研究的不断深入，人们逐渐发现它还具有很多其他的生理功能，包括调节生殖系统、免疫系统功能，调节睡眠及情绪，影响心血管及内皮功能及抗氧化、抗毒性、抗肿瘤等重要的生理、药理作用。MLT广泛的生物学作用主要由其高亲和力受体介导，MLT受体(MR)为G蛋白耦联受体(GRCP)，根据1998年IUPHAR会议将MR分为mt_1、MT_2、MT_3叁种亚型，在哺乳动物(包括人类)表达的MR主要是mt_1、MT_2两种亚型。虽然已经明确了如此多的重要的生理作用，但褪黑素及其受体在人体内的组织器官分布及与生物体疾病的发病关系远未完全明确，这成为对褪黑素作用机制研究的障碍并成为褪黑素领域的研究重点之一。 已经有报道褪黑素能调节哺乳动物甲状腺轴功能，影响体内甲状腺激素水平，因而研究甲状腺是否存在褪黑素受体，对于阐明褪黑素调节甲状腺功能的机制就显得非常重要。肿瘤是生物体在各种致瘤因素作用下，局部组织细胞在基因水平失去对其生长的正常调控，导致异常增生而形成的新生物。虽然肿瘤的病因及发病机制仍未阐明，但肿瘤病人的免疫功能低下、识别和清除突变细胞的免疫监视功能丧失，导致恶性肿瘤发生的理论已得到共识。动物及临床研究显示MLT对于多种肿瘤细胞具有抑制作用，但MLT与内分泌腺肿瘤间研究尚未见报道。本研究运用多种实验技术和方法，旨在阐明以下几个问题：1．成人甲状腺肿瘤患者与非肿瘤患者外周血褪黑素的表达量有无差别?是否可将外周血褪黑素作为检测甲状腺肿瘤的“标志物”?2．成人甲状腺肿瘤患者肿瘤组织与外周血褪黑素的表达量有无差别?3．成人甲状腺组织内是否存在褪黑素受体?所表达的褪黑素受体属于mt_1还是MT_2亚型?各亚型存在于甲状腺细胞的细胞内、细胞外或二者均有?4．成人甲状腺肿瘤组织内是否存在褪黑素受体及其亚型?5．甲状腺肿瘤组织褪黑素受体与正常甲状腺组织表达量有无差别?如 l 中文摘要果有，是 mt；还是 MTZ亚型？有何差别？其最终目的是为研究褪黑素与甲状腺肿瘤的发病机制的关系及将来褪黑素用于肿瘤防治提供依据。 本研究的主要研究方法和结果：第一部分：方法：选择非肿瘤甲状腺良性疾病患者 10例为对照（包括甲状腺炎 2例，Graves病 7例，单纯性甲状腺肿 1例）及甲状腺肿瘤患者20例于清晨4：00—6：00抽取外周血，离心后取上清；同时取肿瘤患者手术标本，加入生理盐水稀释后匀浆取上清，按照ELISA试剂盒说明测定外周血及肿瘤组织MLT浓度。结果：1．甲状腺肿瘤组组织匀浆上清MLT浓度较自身外周血明显增高门 余倍～40o余倍人其中甲状腺腺癌组O＜o刀5＼甲状腺腺瘤组O＜0刀1），甲状腺腺癌加腺瘤组O＜0刀1卜2．各组组织匀浆上清＊u浓度：甲状腺腺癌组高于腺瘤组O阿刀5），和瘤旁组织组中功力1人 甲状腺腺瘤组高于瘤旁组织组，但无统计学差异；3．各组外周血MLT浓度：甲状腺腺癌组中有二例低于对照组平均值，5例高于对照组平均值；甲状腺腺瘤组有10例低于对照组平均值，3例高于对照组平均值；但腺癌组及腺瘤组与对照组相比均无统计学差异。第M部分：方法：取20例本院甲状腺肿瘤（腺瘤及腺癌）及13例瘤旁组织手术标本，经固定、脱水、包埋后制成组织切片，采用SP法组化染色，一抗为鼠抗人ltl和MTZ受体单克隆抗体。结果发现，经过MTZ受体抗体处理的切片，甲状腺细胞膜、细胞浆、细胞核均有棕褐色阳性染色，其中甲状腺腺癌组呈强阳性（＋＋＋），而甲状腺腺瘤及瘤旁正常组织组呈较弱阳性（上～十人经过ltl受体抗体处理的切片，甲状腺细胞膜、细胞浆、细胞核均有较弱棕褐色阳性染色，叁组均为（上～十）。第叁部分：方法：取5对甲状腺肿瘤（腺瘤及腺癌）及瘤旁组织手术标本，腺瘤与腺癌组按性别、年龄、取样时间等因素配对（以排除影响MR的因素）。抽提甲状腺肿瘤及瘤秀组织总RNA，以ltl、MTZ受体引物进行扩增、逆转录、电泳，用RT—PCR半定量分析褪黑素受体亚型mRNA表达的改变。结果：人甲状腺腺瘤、腺癌及瘤旁正常甲状腺组织均有［ti、MT。受体表达。甲状腺腺瘤组It［、MTZ受体亚型表达量与正常甲状腺组织无差异（P＞0刀5）。甲状腺腺癌组＊n受体亚型表达量较正常甲状腺组织明显增加（P＜0刀5），＞h受体亚型表达量无差异（P＞0刀5）。说明成人甲状腺肿瘤组织中存在Iii、MTZ受体亚型。其中腺癌MTZ高表达，与免疫组化结果相同。 结论：甲状腺肿瘤患者肿瘤部位的MLT水平较自身外周血明显增高，但外 一3一
李岚, 徐尔理, 张征, 魏巍, 刘志民[2]2007年在《褪黑素与褪黑素受体在成人甲状腺肿瘤中的表达及其意义》文中进行了进一步梳理目的:研究甲状腺肿瘤患者褪黑素(MLT)与褪黑素受体(MR)表达的改变及意义。方法:取甲状腺肿瘤(腺瘤及腺癌)组织及腺瘤旁1cm正常组织匀浆及自身外周血,用ELISA方法检测MLT浓度改变,以免疫组化SP法检测MR蛋白改变,RT-PCR半定量分析MR亚型mRNA表达的改变。结果:ELISA方法显示,甲状腺肿瘤组织匀浆上清MLT浓度较自身外周血明显增高;甲状腺腺癌组高于腺瘤组和瘤旁组织组;甲状腺腺瘤组高于瘤旁组织组,但无统计学差异;各组外周血MLT浓度无统计学差异。免疫组化方法显示,成人甲状腺腺癌细胞膜、细胞质和细胞核中MT2亚型蛋白均呈棕褐色强阳性染色(+++),较腺瘤及瘤旁正常甲状腺组织染色强度明显增加;mt1受体蛋白亚型表达无差异。RT-PCR结果显示,人甲状腺腺瘤、腺癌及瘤旁正常甲状腺组织均有mt1、MT2受体表达,甲状腺腺瘤组mt1、MT2受体亚型表达量与正常甲状腺组织无差异,甲状腺腺癌组MT2受体亚型表达量较正常甲状腺组织明显增加,mt1受体亚型表达量无差异。结论:成人甲状腺肿瘤组织中MLT浓聚,存在mt1、MT2受体亚型,其中腺癌的细胞膜、细胞质、细胞核内MT2呈高表达。提示MLT与甲状腺肿瘤有一定关联,可能主要通过MT2受体发挥抗甲状腺腺癌作用。
李岚, 刘志民, 刘会敏, 何金[3]2003年在《人甲状腺肿瘤组织褪黑素受体改变及意义》文中提出目的:探讨成人甲状腺肿瘤及瘤旁正常组织褪黑素受体表达的改变及意义。方法:取成人甲状腺肿瘤(腺瘤及腺癌)组织及瘤旁正常组织,抽提总RNA,合成mt1、MT2受体引物,用RT—PCR半定量分析褪黑素受体亚型mRNA表达的改变。结果:人甲状腺腺瘤、腺癌及瘤旁正常甲状腺组织均有mt1、MT2受体表达。甲状腺腺瘤组织mt1、MT2受体亚型表达量与正常甲状腺组织无差异
李岚, 刘志民, 刘会敏, 何金[4]2003年在《人甲状腺肿瘤组织褪黑素受体改变及意义》文中研究指明为研究成人甲状腺肿瘤及瘤旁正常组织褪黑素受体(MR)表达的改变及意义 ,取成人甲状腺肿瘤 (腺瘤及腺癌 )组织及瘤旁正常组织 ,抽提总RNA ,合成mt1、MT2 受体引物 ,用RT PCR半定量分析MR亚型mRNA表达的改变。结果发现 ,人甲状腺腺瘤、腺癌及瘤旁正常甲状腺组织均有mt1、MT2 受体表达 ;甲状腺腺瘤组mt1、MT2 受体亚型表达量与正常甲状腺组织无差异 (P >0 0 5 ) ;甲状腺腺癌组MT2 受体亚型表达量较正常甲状腺组织明显增加 (P<0 0 5 ) ,mt1受体亚型表达量与正常甲状腺组织无差异 (P >0 0 5 )。结果表明 ,成人甲状腺肿瘤组织中存在mt1、MT2 受体亚型 ,其中腺癌MT2 高表达 ,提示MT2 与甲状腺腺癌的发病机制有一定关联
邹俊杰, 李岚, 阮晔, 何金, 刘志民[5]2006年在《甲状腺滤泡细胞癌组织褪黑素受体表达的研究》文中研究说明目的研究成人甲状腺滤泡细胞癌及癌旁正常甲状腺组织褪黑素受体(MR)表达的改变及意义。方法选取第二军医大学长征医院2004年2月至2005年6月手术的成人甲状腺滤泡细胞癌组织及癌旁正常组织,用放射配体结合法检测肿瘤组织MR表达,用逆转录-聚合酶链反应半定量分析MR亚型mRNA表达的改变。结果甲状腺滤泡细胞癌组织125I褪黑素(Mel)特异结合Scatchard分析结果为最大结合容量(Bmax)(0.63±0.07)fmol/mg,平衡解离常数(Kd)值为(45.3±9.3)pmol/L;正常甲状腺组织Bmax(0.58±0.04)fmol/mg,Kd值为(43.5±8.2)pmol/L。甲状腺滤泡细胞癌及瘤旁正常甲状腺组织均有mt1、MT2受体表达;甲状腺滤泡细胞癌MT2受体亚型表达量比正常甲状腺组织显着增加(P<0.05)。结论褪黑素受体亚型MT2与甲状腺滤泡细胞癌的发生发展有一定关联。
佚名[6]2003年在《《解放军医学杂志》2003年(第28卷)主题词索引 (按汉语拼音字母顺序排列)》文中指出数字和字母9 顺维甲酸 9 顺维甲酸对肺鳞癌细胞生长、分化及凋亡的作用 (张世国等 ) 2 8(1) :731 型人免疫缺陷病毒 中国汉族人SDF1 β编码区新多态性位点初步研究 (刘明旭等 ) 2 8(4 ) :30 5Caspase 1 Caspa
张艳姣, 石勇铨, 刘志民, 阮晔, 刘颖[7]2005年在《Graves病及正常甲状腺组织褪黑素受体亚型表达差异的研究》文中研究指明用RT-PCR半定量分析结果显示,Graves病甲状腺组织及甲状腺腺瘤瘤旁正常甲状腺组织(各5例)均存在褪黑素受体亚型mt1mRNA的表达,未检测到MT2亚型。手术时经药物控制甲状腺功能已正常的Graves病与甲状腺机能仍亢进的Graves病甲状腺组织mt1表达量无差异(P>0.05);Graves病甲状腺组织mt1表达量较正常甲状腺组织明显增加(P<0.01)。提示褪黑素的免疫调节作用可能通过mt1介导,Graves病发病可能与mt1亚型激活有关。
佚名[8]2003年在《中华内分泌代谢杂志2003年第19卷主题词索引》文中研究表明说明 :(1)本索引主题词按数字、英文字母、汉语拼音字母顺序排列 ;(2 )文题、作者后括号内数字为期号 ,最后为起始页码。数字和字母1 1 β 羟类固醇脱氢酶 1 1 β 羟类固醇脱氢酶与2型糖尿病 (陈娜 ,姚兵 ) (3) :2 4 51型糖尿
赵艳红[9]2009年在《褪黑激素受体基因在内蒙古绒山羊皮肤毛囊中的表达》文中提出内蒙古白绒山羊是世界名贵的珍惜物种,其绒纤维是举世公认的“纤维宝石”。通过前人研究,发现褪黑激素能够促进绒毛生长,但其信号通路及调控机理尚不清楚。因此,本研究以内蒙古绒山羊为研究对象,利用RT-PCR、荧光实时定量RT-PCR和原位杂交等技术,探讨褪黑激素受体MTNR1a、MTNR1b和RORα在内蒙古绒山羊2、4、8、10、12月份及埋植褪黑激素后皮肤毛囊中mRNA水平的表达,寻找褪黑激素促进绒毛生长的信号通路及调控机理,通过研究得到结果如下:1、克隆了MTNR1a外显子序列,该序列由1081个核苷酸组成,预测编码345个氨基酸。核苷酸和氨基酸序列与GenBank中其他哺乳动物该基因序列的同源性均较高。2、RT-PCR结果表明:MTNR1a mRNA在内蒙古绒山羊皮肤组织中不表达,而在下丘脑中表达;MTNR1b mRNA在皮肤及下丘脑组织中均不表达;RORαmRNA在皮肤组织中表达。3、原位杂交结果显示,MTNR1a mRNA在皮肤组织中不表达,而在下丘脑组织中呈广泛表达;RORαmRNA在皮肤毛囊中表达,2月份在绒干上有较强的阳性表达信号,在毛干上没有表达信号;4月份集中在毛囊的内根鞘、髓质和绒干上有表达信号;在8月份的毛干皮质部和外根鞘处有较强的表达信号;10月份在毛干和绒干上有表达信号;12月份在毛干和绒干的外根鞘部有表达信号。4、实时荧光定量RT-PCR结果表明,RORαmRNA在内蒙古绒山羊皮肤2、4、8、10、12月份均有表达;在2月份的表达量最高,4月份下降,之后8月份、10月份在逐渐升高,10月份基本达到2月份水平,12月份降到全年最低点,呈动力学变化。5、埋植褪黑激素皮肤组织RORαmRNA表达信号集中在毛干和绒干的外根鞘上;表达水平较正常组织要低。本研究在内蒙古绒山羊皮肤毛囊中检测到了RORαmRNA的表达,并且不同月份表达量存在动态变化,揭示了褪黑激素促进绒毛生长的作用途径可能是通过核受体RORα来发挥其功能的,为进一步研究褪黑激素受体与产绒性能之间的关系,阐明褪黑激素作用途径及调控机理,实现人工调控绒毛生长打下良好的基础。
亢晓彬[10]2010年在《成人肝癌组织褪黑素受体的表达和结合特性》文中研究指明目的:观察成人肝癌和癌旁组织有无褪黑素受体(melatonin receptor,MR)的表达及其细胞分布特点,明确MR两种受体亚型(melatonin receptor 1,MT1和melatonin receptor 2,MT2)在成人肝癌和癌旁组织细胞表达的差异性及其意义,为揭示褪黑素(melatonin,Mel)在肝癌发生发展中的作用提供依据。方法:成人肝癌手术病例切除标本常规石蜡包埋后切片,免疫组化法检测肝癌和癌旁组织MT1和MT2的表达及其细胞内分布特点;取成人肝癌和癌旁组织匀浆提取总RNA,采用RT-PCR半定量法分别分析MT1和MT2基因mRNA在肝癌和癌旁组织表达的差异性;制备成人肝癌和癌旁组织的膜蛋白,采用放射性配体结合实验法(radioligand binding assay of receptor,RBA)检测MR特异性结合和动力学特性。结果:1. MR在成人肝癌和癌旁组织的表达成人肝癌和癌旁组织石蜡切片免疫组化法结果显示,成人肝癌细胞细胞膜、细胞质和细胞核中MR两种受体亚型MT1和MT2蛋白均呈聚集性颗粒状棕褐色阳性染色,但主要表达在细胞膜和细胞质,细胞核中表达最少;癌旁组织染色强度明显低于癌组织,棕黄色阳性染色结果呈弥散性分布,也主要表达在细胞膜和细胞质,细胞核中表达最少,分布特点同癌组织类似。2.成人肝癌和癌旁组织MR受体亚型MT1和MT2的mRNA表达的差异性提取成人肝癌和癌旁组织的总RNA,RT-PCR半定量分析结果表明,成人肝癌和癌旁组织均有MT1和MT2表达,但癌组织MT1和MT2的mRNA表达水平均明显高于癌旁组织(P<0.05)。3.放射性配体结合法分析MR的结合特性125I标记的褪黑素(125I-Mel)在成人肝癌和癌旁组织的膜蛋白上存在特异结合位点,肝癌组织和癌旁组织MR特异性结合最大结合容量(Bmax)分别为0.29±0.07 pmol·g-1和1.16±0.28 pmol·g-1,癌组织明显低于癌旁组织(P<0.05);平衡解离常数(Kd)值分别为48.7±6.5 pmol·L-1和26.5±4.6 pmol·L-1,两组无明显差异(P>0.05)。动力学分析表明该特异性结合为可饱和和可逆性结合。结论:1.本文首次发现,成人肝癌和癌旁组织均有MR表达,包括其两种亚型MT1和MT2。2. MR在肝癌和癌旁组织表达具有差异性,其mRNA的表达也具有明显的差异性。3.成人肝癌和癌旁组织表达的MR结合特性为:可饱和性和可逆性,其结合特性为低结合容量和高亲和力。
参考文献：
[1]. 人甲状腺肿瘤褪黑素及褪黑素受体的表达、改变及意义[D]. 李岚. 第二军医大学. 2003
[2]. 褪黑素与褪黑素受体在成人甲状腺肿瘤中的表达及其意义[J]. 李岚, 徐尔理, 张征, 魏巍, 刘志民. 临床肿瘤学杂志. 2007
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[6]. 《解放军医学杂志》2003年(第28卷)主题词索引 (按汉语拼音字母顺序排列)[J]. 佚名. 解放军医学杂志. 2003
[7]. Graves病及正常甲状腺组织褪黑素受体亚型表达差异的研究[J]. 张艳姣, 石勇铨, 刘志民, 阮晔, 刘颖. 中华内分泌代谢杂志. 2005
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[9]. 褪黑激素受体基因在内蒙古绒山羊皮肤毛囊中的表达[D]. 赵艳红. 内蒙古农业大学. 2009
[10]. 成人肝癌组织褪黑素受体的表达和结合特性[D]. 亢晓彬. 安徽医科大学. 2010