崔东焕 刘汇 王宇 南善姬(通讯作者)
（延边州食品药品检验所 吉林 延吉 133001）
【摘要】 目的：建立消瘀散结胶囊中丹皮酚的含量测定方法。方法：采用HPLC法，色谱柱为Dimersions C18（4.6×250㎜,5μm）；流动相为甲醇-水（50:50）；流速为0.8mL/min；检测波长为274nm；柱温为35℃。结果：丹皮酚浓度在2.03?g·mL-1～101.50?g·mL-1范围内呈良好的线性关系，r=1.000,平均加样回收率为99.3%（n=6），RSD为0.42%；方法精密度试验RSD值为0.35%。结论：所建立的方法稳定性强、重复性好，为评价和控制消瘀散结胶囊的质量提供了可靠的方法。
【关键词】消瘀散结胶囊；丹皮酚；HPLC；含量测定
【中图分类号】R927.2 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2016）24-0314-02
Determination of Paeonol Content in Xiaoyusanjie Capsules by HPLC
Cui Donghuan Liu Hui Wang Yu N an Shanji（Corresponding author）
Yanbian Prefecture Institute for Food and Drug Control,Jilin Yanji,133001,China
【Abstract】 Objective To establish a high performance liquid chromatography (HPLC) method for the content determination of paeonol in Xiaoyusanjie Capsules. Methods The chromatographic column wsa the Dimersions C18 column (250×4.60 mm,5μm ).The mobile phase was methanol-water (50:50) with a flow rate of 0.8 mL/min.The detection wavelength was 240 mm and the column temperature was 35℃.Results Paeonol showed the good linear relation within the range of 2.03 ～ 101.50 ?g·mL-1(r=1.000).The average recovery rate was 99.3%,RSD was 0.42%(n=6);the precision RSD was 0.35%.Conclusion The method is stable and reproducible,which provides a reliability method for the quality evaluation and control of Xiaoyusanjie Capsules.
【Key words】 Xiaoyusanjie Capsules;Paeonol;HPLC;Content determination
消瘀散结胶囊是由牡丹皮，当归，丹参，桃仁，丹参，茯苓等13味药材组成的复方制剂。具有活血化瘀，行气止痛，清热利湿等功能。可用于治疗盆腔炎，下腹坠痛，腰骶酸痛，带下增多，经闭痛经等症。其中牡丹皮为方中君药。从牡丹皮中分离得到的生物活性物质丹皮酚具有显著的改善血液流变学，将脂质，抑制脂质过氧化，抗肿瘤，抗炎，镇痛等药理活性。该法具有分离效果好，简便，灵敏度高等优点，能够较好的控制该产品的质量，可用于本品的质量控制。
1.仪器与试药
高效液相色谱仪：岛津 LC-2010 AHT型高效液相色谱仪（包括：四元汞，真空在线脱气机，紫外-可见光检测器， LC-SOLUTION色谱数据工作站,自动进样系统）；CQX25-06型超声波清洗器。
丹皮酚对照品（供含量测定用，批号 110708-200505）由中国药品生物制品检定研究所提供；消瘀散结胶囊（批号分别为 20091001、20100101、20100301）由吉林省敦化市中医院提供；甲醇为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。
2.溶液的制备
2.1 对照品溶液的制备
精密称取丹皮酚对照品10.15mg,置50ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含0.203mg的储备液；再精密吸取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml含丹皮酚0.0203mg）。
2.2 供试品溶液的制备
取本品内容物约0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20ml,称定重量，水浴回流30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液即得。
2.3 阴性样品溶液的制备
按处方组成及该制剂工艺，制备缺牡丹皮的阴性样品，按照“3.2”项下的方法，制成缺牡丹皮的阴性样品溶液。
3.色谱条件与系统适应性试验
色谱柱：Diamonsil C18(4.6×250㎜,5μm)；流动相：甲醇-水（50:50）；流速：0.8ml/min；检测波长：274nm；柱温：35℃。分别精密吸取“2”项下的三种溶液各10?l，注入液相色谱仪，按上述色谱条件进行测定。结果阴性样品在丹皮酚对照品相同保留时间位置上未见色谱峰，说明处方中的其他成分对丹皮酚测定无干扰，结果见图1。
4.线性关系考察
分别精密量取上述对照品储备液0.1ml、0.5ml、1.0ml、2.0ml、2.5ml、5.0ml,置10ml的量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含丹皮酚2.03μg、10.15μg、20.30μg、40.60μg、50.75μg、101.50μg的对照溶液。按上述色谱条件，分别进样10μ1，测定峰面积，并以浓度为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y）绘制标准曲线，得回归方程为Y=67182X+4489,相关系数r=1.000。结果表明，丹皮酚浓度在2.03?g·mL-1～ 101.50?g·mL-1范围内，与峰面积呈良好的线性关系。
5.精密度试验
按上述色谱条件，精密吸取上诉对照品溶液连续进样6次，每次10μl，测定丹皮酚峰面积，测得RSD为0.35%。结果表明精密度良好。
6.重复性试验
取同一批供试品（批号 20100301），精密称取6份，按供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，计算丹皮酚含量，RSD为1.03%。结果表明该方法重现性良好。
7.稳定性试验
取“6”项下的供试品溶液，分别在0，2，3，5，8，9h进样，峰面积平均值为1107466，RSD为0.29%。结果表明供试品溶液在9h内稳定。
8.加样回收率试验
采用加样回收法，取9份已知含量的供试品（批号 20100301，含量为 1.30mg·g-1）0.15g,精密称定，分别精密加入丹皮酚对照品甲醇溶液（6μg·ml-1、9.0μg·ml-1、12μg·ml-1）20ml，按“2.2”项下的方法制备供试品溶液，进样测定，计算回收率。结果显示，低、中、高3个加入量的平均回收率（n=9）为99.58%，RSD=0.38%。结果表明该方法回收率良好。
10.结论
本文采用HPLC 法，通过确定检测波长，对流动相、提取方法、提取时间及提取溶剂进行了选择，并进行了方法学考察。结果表明，在该条件下，用HPLC法测定消瘀散结胶囊中丹皮酚含量，具有预处理简单，专属性强，精密度、重现性、回收率好等优点，可用于消瘀散结胶囊的质量控制。
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论文作者:崔东焕,刘汇,王宇,南善姬(通讯作者)
论文发表刊物:《医药前沿》2016年8月第24期
论文发表时间:2016/9/6
标签：溶液论文; 精密论文; 丹皮论文; 甲醇论文; 色谱论文; 牡丹皮论文; 胶囊论文; 《医药前沿》2016年8月第24期论文;