（福建平潭综合实验区医院 350400）
摘要：目的 探讨福建平潭综合实验区妇女宫颈感染人乳头瘤（human pqpillomavirus. Hpv）基因型的分布情况。方法 以2015年7月13日至2017年2月27日为时间区间，以我院门诊及住院女性1646例为研究对象，取妇女宫颈脱落细胞，采用荧光PCR法，定性检测HPV检测，分析感染率、感染类型、年龄分布特征。结果 1646例女性中，HPV总感染例数143例，总感染率8.69%。混合型感染例数103例，感染率6.26%。16型感染例数25例，感染率1.52%。18型感染率为15例，感染率为0.91%。其中16型、混合型同时阳性的1例，16型、18型同时阳性1例，16型、混合型同时阳性2例，18型、混合型同时阳性1例，即多重混合感染共5例。其中30—49岁年龄段的感染率最高。结论 本区HPV总感染率8.69%，低于国内水平，且本地区妇女HPV感染主要分布于30—49岁性活跃期。
关键词：宫颈脱落细胞；人乳头瘤病毒（HPV）；感染率；16型；18型；混合型。
Genetic analysis of women's cervical infection in women's cervical infection in pingtan comprehensive experimental area of fujian province
Objective：to explore the distribution of the genotype of women's cervical infection in women's cervical infection in pingtan comprehensive experimental area of fujian province.
Methods：From July 13，2015 to February 27，2017 as the time interval，taking 1646 outpatient and inpatient women in our hospital as the research object，take the cervical exfoliated cells from women and detect the HPV by using the fluorescent PCR method qualitatively Infection rate，type of infection. Results：Of the 1646 women，the total number of HPV infections was 143 and the total infection rate was 8.69%. There were 103 cases of mixed infection and 6.26% infection rate. In 25 cases，the infection rate was 1.52%. The infection rate was 0.91% in 15 cases. 16 type，mixed type at the same time，positive in 1 case，16，18 positive 1 case at the same time，16 type，mixed type and positive in 2 cases，18 type，mixed type at the same time，1 case，namely the multiple mixed infection in 5 cases，The highest rate of infection was in the 30 to 49 years。
Conclusion：the total infection rate of HPV in this area is 8.6%，which is lower than the domestic level，and the HPV infection of women in this area is mainly distributed in the period of 30 to 49 years.
Keywords：cervical exfoliation cell；Human papilloma virus（HPV）；Infection rate；16 type；18 type；A hybrid.
人乳头瘤病毒是一种嗜粘膜和皮肤上皮性病毒，是导致宫颈上皮增生和宫颈癌的主要因素。至今为止，已经鉴定的HPV病毒约有100多种，约有30多种可以感染人的生殖道黏膜[1]。宫颈癌的发生和人乳头瘤病毒感染人体有密切的关系[2]。世界卫生组织的调查结果显示99.9%的宫颈癌患者可以检测到HPV感染；国际癌症研究协会（IARC）1995年宣布；HPV感染是宫颈癌的主要原因。在目前发现的约30多种可感染人生殖道黏膜的HPV中，一部分很容易导致宫颈癌的发生，称为高危型HPV；WHO及IRAC确认的14种高危型包括HPV16、18、31、35、39、45、51、52、56、58、59、66及68[3]。从HPV感染到发展成为宫颈癌发展成为宫颈癌一般需要经历数年到10年左右时间，提早检测高危型HPV进而积极治疗将有助于清除女性生殖道的持续感染，防止其向宫颈癌演变。早发现、早治疗，从而降低宫颈癌的发生率和死亡率。本文分析平潭综合实验区妇女宫颈感染人乳头瘤病毒状况，发现总感染率为8.6%，低于中国妇女以人群基础的HPV感染状况的流行病学调查结果显示HPV的总感染为16.1%[4]。HPV16型导致了全世界一半以上的宫颈癌[5]。而本地区的16型感染率为1.52%，且感染人群在30—39岁和40—49岁妇女，分别占总感染率的43.36%、34.97%。
1.资料与方法
1.1 一般资料
统计我院2015年7月开始开展HPV检测以来至2017年2月检测HPV总例数1646例。最小年龄20岁，最大年龄71岁，平均年龄46岁。
1.2 仪器与试剂
CobasZ480荧光PCR仪。上海透景生命科技股份有限公司提供的人乳头瘤病毒核酸检测与16/18型试剂盒，采用2+12型，即可具体分型16、18型和其它混合型12种（31、33、35、39、41、51、52、56、58、59、66、68）。严格按照试剂说明要求操作以及按《基因扩增实验室管理办法》执行操作。
1.3 方法
以统一标准取女性非经期宫颈脱落细胞，在采样前不对阴道进行冲洗，采用上海透景生命科技有限公司提供的专用宫颈刷采集标本，将宫颈刷置入宫颈，约2cm位置，于宫颈外口鳞状上皮、柱状上皮交界处，沿宫颈外口旋转3-4圈，然后取出，置入上海透景生命科技股份有限公司提供的配套细胞保存液中，按照保存液要求保存。
取洁净的1.5ml离心管，编号，加入对应的样品1000ul（取样品的时先震荡混匀!）14000转/分钟离心3分钟，吸弃上清液，每管各加200ul的上海透景配套DNA提取液，充分混匀，放100度干浴锅。干浴15分钟后关闭干浴锅电源，待离心管冷却后（以防取出时温度过高管盖爆开）取出，14000转/分钟离心5分钟备用。取PCR反应八联管，分别加入20ul的PCR反应液20ul和5ul提取后的上清液。加测阴阳性对照，盖紧盖子，再以2000转/分钟速离心10秒，使反应液体集中于PCR反应管的管底部并确保反应液无气泡，按试剂说明书在CobasZ480上设定好程序，进行PCR扩增，报告荧光选择：FAM，HEX/VIC，ROX，CY5。
1.4结果分析与判定
以1-5个循环的荧光信号为基线。使阈值线超过正常阴性对照扩增线（无规则的噪音线）的最高点，且ct为Undent（无ct值）。阴性对照ct均显示为Undet（无ct值）。阳性对照ct值均≦30.判定CY5通道的曲线为明显S型扩增曲线且ct值≤32则测试结果有效可进行其他通道后续分析，若通道ct值为Undet或ct值>32则该样本需重新检测。判定FAM，VIC，ROX通道的ct值为Undet或者ct值>30的样本为HPV阴性；判定曲线为明显的S型扩增曲线且ct≤30的样本为阴性。
1.5 统计方法
运用SPSS16.0统计学软件对各年龄组妇女感染HPV感染率进行数据统计分析，P≤0.05为差异具有统计学意义。
2结果
2.1 感染情况分析
统计2015年7月13日HPV开展以来至2017年2月27日我院门诊及住院女性宫颈脱落细胞HPV检测，共检测1646例。HPV总感染例数143例，总感染率8.69%。低于全国感染水平，混合型感染例数103例，感染率6.26%。16型感染例数25例，感染率1.52%，18型感染率为15例，感染率为0.91%。其中16型、18型、混合型同时阳性2例，18型、混合型同时阳性1例，即多重混合感染共5例。
2.2 年龄分布情况
不同年龄组HPV感染分布情况
2.3 各年龄组占总感染率比较
运用SPSS16.0统计学软件对各年龄段进行分组比较，显示30—39岁、40—49岁感染率高，分别占37.77%、40.56%，P>0.05无统计意义。20—29岁、30—39岁占总感染率11.19%、37.77%，P<0.05有统计意义。得出结论，平潭综合实验区HPV感染主要在30—39岁、40—49岁年龄段性活跃期，和性接触传染直接相关。
3讨论
HPV持续感染是引起宫颈癌的必要不充分条件，其中HPV16和HPV18型感染是导致宫颈癌最主要的因素[5]。引发HPV的原因极为复杂，每个地区HPV感染率、各不相同，基因型分布也存在一定差异。我国大规模多中心的流行病学研究显示，宫颈鳞癌中最常见的HPV型分别为HPV16和18型，分别占76.7%和7.8%，随后依次HPV52（2.2%），HPV58（2.2%）和HPV（2.1%），将HPV风险分层管理有助于提高宫颈癌的筛选效率。由于HPV16和HPV18的高致癌风险，对HPV16、18型阳性人群的筛选和临床转诊十分必要。而致癌风险较小的另外几种高危型别，检测结果为阳性的通常处理办法为定期复查，笔者认为无需对12种型别进行分型检测，因而对本地区采用透景2+12高危HPV检测，经济，实用。
目前，针对HPV感染者，多予以宫颈癌预防疫苗控制，以降低其转化为宫颈癌的风险。因此尽早诊断、预防，并指导临床采取针对性预防措施十分必要。荧光PCR检测特异性较好。在研究中笔者对我院门诊、住院女性应用荧光PCR检测予以HPV检测，分析平潭综合实验区妇女的HPV感染情况，考虑到HPV16、18型是最有致癌风险的基因型，本次研究以HPV16、18型研究为主，在此基础上将感染严重的混合型纳入研究，分析感染率以及年龄分布情况，以期为临床防治提供科学指导。至于HPV感染以及分型和宫颈病变和宫颈癌的关系，还有待后续研究。
经本次数据分析显示，本地区HPV总感染率8.69%，而我国感染率为16.1%，提示平潭综合实验区妇女HPV感染率低于平均水平，发生风险低。另外研究发现该地区30-49岁年龄段的感染率最高，明显高于其他年龄段，提示这一年龄段女性为该地区HPV感染的高危人群。关于HPV感染人群，国内外研究指出各地区的年龄流行特征各不相同，综合来看各种基因型HPV感染年龄分布特征呈现出“单峰曲线”、“双峰曲线”两种形式，众多研究者指出25岁以下、55岁以上为HPV感染的高危年龄。但本次研究结果显示平潭综合实验区妇女HPV感染年龄分布特征有其自身特点，发现其感染者集中于30-49岁之间，对于其原因，仍需要进一步分析，知道该地区应针对性控制HPV感染。
整体来看，平潭综合实验区HPV感染情况并不十分严重，可能与近年来的防控措施有关，但是仍不可掉以轻心，需加强防控，最大限度降低HPV感染率及其向宫颈癌转化的风险。研究显示30-49岁为该地区HPV感染的多发年龄，因此在防治过程中要重点关注这一年龄段女性。
HPV诊断能有效、准确鉴别宫颈癌前病变，因此控制HPV感染的关键在于加大筛查力度、定期检测，一般认为筛查年龄应该从21岁开始，21岁以下HPV感染发生率很低，而55岁女性进入绝经期，也增加了宫颈癌变的发生风险，因此筛查范围必须囊括老年女性。本次研究显示30-49岁妇女为该地区HPV感染的多发年龄，因此应重点对这一年龄段女性进行筛查，推广、普及这一年龄段女性的HPV筛查。对于发生HPV感染的患者，尽早予以宫颈癌疫苗控制，以降低宫颈癌的发生率。这样能够提升HPV感染的防治效果，保证女性的身心健康。
综上，平潭综合实验区妇女HPV感染率相对低于我国平均水平，感染年龄集中在30-49岁，应作为控制重点人群。
参考文献
[1]The current status of development of prophylactic vacclnes against human papllomavirus infection Report of a techicalmeeting，Geneva，16—18 February 1999，World Health Organization
[2]Carcinogeniaitg of human Papillomavirus，Upcoming meetings June 7-14，2005，WHO Intemational Agency for Research on Cancer
[3]Muigerk，HowleyPM，Human Papillomavirus immortalization and transformation functions[J]，Virus Res 2002；89；213-228
[4]李霓，代敏，中国妇女人乳头瘤病毒感染的多中心横断面研究[J]，中华疾病控制杂志，2008（05）；411-415
[5]史娅萍，朱宇宁，周丽琴等，人乳头瘤状病毒基因型在宫颈疾病中的分布特点[J]，中华检验医学杂志，2007，30（9）；1009-1012
论文作者:任淑珍,刘启元,高巧珍
论文发表刊物:《航空军医》2017年28期
论文发表时间:2018/2/6
标签：感染率论文; 宫颈癌论文; 平潭论文; 宫颈论文; 例数论文; 阳性论文; 年龄论文; 《航空军医》2017年28期论文;