两种方法检测血清甲胎蛋白的比较研究论文_钟晶 尚鹏程 朱玛 曾崇亮

钟晶 尚鹏程 朱玛 曾崇亮(成都市公共卫生临床医疗中心 检验科 成都 610066)

【摘要】目的:通过对本实验室内使用的化学发光法和电化学发光法系统对血清中甲胎蛋白(AFP)含量进行测定比对,探讨二者间结果是否具有可比性。方法:根据美国国家实验室标准委员(NCCLS)的EP9-A2 文件,收集50 例本院就诊患者及健康体检人群血清标本,以Rochee602 电化学发光免疫分析仪为对比仪器(x),长光华医 A1800 化学发光测定仪为实验仪器(y),同时检测血清中AFP 的含量,分析两种化学发光仪测定结果之间的相关性和2 种方法检测结果的一致性。结果:2 种仪器测定的结果具有良好相关性(r=0.996),一致率为94%。结论:在严格按照操作规程进行检测的前提下,2 种方法测定结果基本一致,实验仪器能基本满足临床检测需要。

【关键词】甲胎蛋白;电化学发光法;化学发光法;一致性【中图分类号】 R2 【文献标号】 A 【文章编号】 2095-7165(2015)11-0028-02Comparison of the two methods for serum alpha-fetoprotein determination.Zhong Jing,Shang Peng-cheng,Zhu Ma,Zeng Chongliang(Public Health Clinical Center Of Chengdu, Chengdu 610066,China)Abstract:Objective:To compare the consistency of serum alpha fetoprotein(AFP) results detected by electrochemiluminescence immunoassay(ECLIA)and chemiluminescence immunoassay(CLIA), Methods:To choose the ECLIA from Roche Diagnostics as a comparative method (x) and the ECLIAfrom Hybiome Huayi Diagnostics as experimental method (y),according to the EP9-A2 files of NCCLS. To analyze the correlativity and the consistencyof the results detected by two methods in 50 clinical serum specimens. Results:The results of two groups were correlated (r=0.996), the concordance ratewas 94%. Conclusion:The experimental method can meet the needs of AFP detection in clinical practice.KEY WORDS:AFP;alpha fetoprotein;ECLIA;CLIA;consistency甲胎蛋白(alpha fetoprotein, AFP)是来源于卵黄囊、未分化肝细胞和胎儿胃肠道的一种分子量为70000d 的糖基化白蛋白[1,2]。70-95%的原发性肝癌患者体内的AFP 水平会升高[3]。AFP 的检测方法较多,近年来主要使用化学发光法及电化学发光法进行测定,而国内外化学发光免疫产品繁多,同一标本在不同仪器间的检测结果的可比性是值得关注的问题。本研究按照美国国家实验室标准委员会(NCCLS)的EP9-A2 文件,对本实验室的A1800 化学发光测定仪和瑞士Roche cobas e602 电化学发光免疫分析仪血清中AFP 的检测含量结果进行比对,以了解两者之间是否具有一致性,探讨国内发学发光仪器及试剂的临床应用价值。

1 材料与方法1.1 材料1.1.1 标本来源 收集本院于2014 年11 月1 日 -12 月30 日在本院住院及门诊患者血清标本共50 例。年龄18-70 岁。包括肝硬化患者21 例,肝癌患者9 例,健康对照者20 名。不采用有明显脂血、溶血和黄疸的标本。

1.1.2 标本收集 本院住院患者,真空采血管抽取静脉血3~5mL,3000rpm/min 离心10min,分离出血清作检测,剩余血清-20℃保存,以备复查。

1.1.3 仪器与试剂 实验组为苏州长光华医 EVERESYS A1800化学发光测定仪,试剂为配套甲胎蛋白(AFP)测定试剂盒;对照组为瑞士Roche cobas e602 电化学发光免疫分析仪,试剂为Roche 配套甲胎蛋白(AFP)电化学发光法试剂盒。校准品分别为长光华医及Roche 的专用校准品,质控品均为Roche 提供的冻干质控品。

1.2 方法

1.2.1 方法的选择 以参加卫生部临检中心室间质评成绩为100%的Roche e602 为对比方法(用x 表示),以新购入的长光华医A1800 为实验方法(用y 表示)。

1.2.2 仪器校准 常规开机后,使用各自专用的校准品对两台仪器进行校准。

1.2.3 质量控制 在2 台仪器上分别测定高、低值质控品。在如果质控结果在控,则纳入当天测定数据;若失控时应分析失控原因,以决定是否纳入检测数据,确保检测结果在允许范围之内。

1.2.4 样本测定 按EP9-A2 文件的要求,每天测定8 份样本,分别用实验组方法和对照组方法进行双份测定,连续测定7d。测定时先对样本用1 至8 号排序,按顺序1~8 测定第1 次,顺序8~1测定第2 次。测定在2h 内完成[4]。

1.3 数据处理1.3.1 离群点检验 对照EP9-A2 文件,对长光华医 A1800 化学发光测定仪和Roche e602 电化学发光免疫分析仪测定的所有点进行仪器内部和仪器间的离群点检验。

1.3.2 绘制散点图 散点图Y 轴:实验方法每样本双份测定的均值;X 轴:对比方法每样本双份测定的均值。

1.3.3 线性回归方程和相关系数(r) 采用SPSS19.0 软件对测定结果数据进行统计分析,以对比方法为x 变量,实验方法为y 变量,得出线性回归方程Y=bX+a 及相关系数r;并计算出在医学决定水平处(Xc),两种方法的预期偏差[4]。

2 结果2.1 离群点检验 按EP9-A2 文件要求计算,长光华医A1800和Roche e602 检测系统测定AFP,两台仪器内部及仪器之间均无离群点。

2.2 散点图、直线回归方程与r 用长光华医A1800 和Roche e602对样本AFP 含量进行双份平行测定的数据绘制成散点图及作相关性分析(图1),经计算相关系数r2=0.993>0.95,r=0.996>0.975,故认为x 变量的取值范围足够,数据可补偿x 变量的误差,可对数据进行线性回归。计算所得线性回归方程为y=1.0267x+0.0290,2 种方法的相关性较好;

Cut-off 值为25μg/L时,两者的一致性为94.0%;Cut-off 值为400 μg/L时为两者的一致性为98.0%。

不符合样本分析:不符样本共4例,均为灰区样本,无统计学意义,需要进行动态监测AFP浓度的变化,可进行AFP异质体检测并结合临床症状等进行综合分析。

3 讨论据调查,目前国内三级甲等以上医院的临床实验室已经普及了免疫化学发光自动化仪器,其中进口设备及试剂所占比例超过95%,而国产全自动免疫分析系统处于发展期[6]。我们根据NCCLS 的EP9-A2 流程,对国产长光华医A1800 化学发光测定仪和进口Rochecobas e602 电化学发光免疫分析仪进行了AFP 平行检测,并对两种试剂检测结果进行对比分析,结果显示2 种方法的测定结果相关系数r=0.997,P<0.01,具有显著性相关;相对偏差较小,一致性均超过94%。而国产仪器维护成本与试剂较低,既满足了临床定量检测的需求,又降低了检验费用,减轻了患者经济负担,有很好的临床应用价值。

参考文献:[1] 吉强,顾星, 高春芳. 甲胎蛋白及其单核苷酸多态性与肝细胞癌易感性的研究[J]. 检验医学, 2013, 28(2): 168-170.[2] Jingting J,Changping W,Ning X,et al.Clinical evaluation of serumalpha-fetoprotein-IgM immune complexes on the diagnosis of primaryhepatocellular carcinoma [J].J Clin Lab Anal,2009,23(4):213-218.[3] 谷强业,闫庆福,丁街林,张光海.慢性重型肝炎血清甲胎蛋白检测意义.临床肝胆病杂志[J],2007,23:131-132.[4] National Committe for Clinical Laboratory Standards. MethodsComparison and Bias Estimate Using Patient Sample ; ApprovedGuideline-Second Edition,Document EP9-A2[S]. NCCLS,2002.[5] Montaser LM,Abbas OM,Saltah AM,Waked IA.Circulating AFP mRNA as aPossible Indicator of Hematogenous Spread of HCC Cells:A PossibleAssociation with HBV Infection.J Egypt Natl Canc Inst[J],2007,19:48-60.[6] 李耀华.国内外免疫自动化发展趋势现状与分析[J].医学论坛杂志,2011,32(14):197-200.作者简介:钟晶,女,重庆巴县人,主管技师,本科。专业方向:临床免疫学与微生物检验。

论文作者:钟晶 尚鹏程 朱玛 曾崇亮

论文发表刊物:《医师在线》2015年6月第11期供稿

论文发表时间:2015/8/12

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