临床病理检验常用骨组织脱钙液效果的比较论文_蒲正芳

南部县人民医院病理科 637300

摘要:目的:探讨临床病理检验常用骨组织脱钙液的临床效果。方法:选取在2013年12月-2014年12月在我院行手术切除的骨病变、骨肿瘤以及骨髓穿刺患者标本70例,把70例标本随机分成两组,观察组和对照组,每组分别35例标本。给予对照组硝酸脱钙液检验,观察组快速脱钙液检验,比较观察两组标本在微波以及常温条件下骨组织脱钙和切片染色效果。结果:使用快速脱钙液处理的观察组标本组织切片在4μm-5μm之间,切片完整平坦,薄厚均匀并且颜色新鲜,细胞核有清晰染色;使用硝酸脱钙液处理的组织切片薄厚不均匀,没有完整切片,染色较模糊并且没有清晰的核着色,会对病理诊断造成相应的影响。结论:将快速脱钙液运用在临床病理检验中,可将切片质量显著提高,有推广运用意义。

关键词:临床病理检验;常用骨组织脱钙液;效果;比较

因骨组织中有大量钙盐沉淀,形成坚硬的结缔组织,实施直接切片治疗非常复杂,选取对保护骨组织形态结构有利并且制片效果较好的脱钙方式是当前重点研究的问题,这对临床检验中诊断病理有重要意义。当前众多研究中使用的改良脱钙方式较多,但具体何种方式可保证取得良好的检验效果仍不明朗[1]。为研究临床病理检验常用骨组织脱钙液的临床效果,选取在2013年12月-2014年12月在我院行手术切除的骨病变、骨肿瘤以及骨髓穿刺患者标本70例,现将结果报告如下:

1资料与方法

1.1一般资料 选取在2013年12月-2014年12月在我院行手术切除的骨病变、骨肿瘤以及骨髓穿刺患者标本70例。将70例标本随机分成两组,每组35例。按照标本的差异把骨组织切取为体积是1.5×1.5×0.5cm的标本薄片,通常骨髓的直径为0.1cm,将所有标本放入到浓度为10%的福尔马林中固定24h,随后运用到脱钙实验中。

1.2方法

1.2.1对照组 给予对照组标本使用硝酸脱钙液临床病理检验。硝酸脱钙液是5%的硝酸5ml溶于95ml蒸馏水中。脱钙步骤如下:(1)将大块骨组织切成小片,对小块骨组织标本无需改刀,随后放入到10%的福尔马林中固定24h,随后进行脱钙步骤。(2)将等待脱钙的标本放入到硝酸脱钙液中,其中脱钙液不能少于待脱钙标本体积的10倍。(3)在室温下脱钙骨髓的穿刺标本需要在30min-60min内完成;皮质骨脱钙标本需要在5d-7d内完成;指耻骨脱钙标本需要在3d-6d内完成。(4)脱钙之后的骨组织经过水冲洗后进行取材、脱水、透明、石蜡包埋、制片等一系列技术。

1.2.2观察组 给予患者标本使用37%的8ml盐酸、5ml冰醋酸、10g水杨酸、87ml蒸馏水混合。使用微波炉加热可使组织内部分子运动加速并把脱钙的速度加快,因为标本在酸性溶液中滞留时间较短,因此对骨组织的副作用较小。具体脱钙步骤如下:(1)将大块骨组织切成小片,对小块骨组织标本无需改刀,随后放置到装有脱钙液的耐高温玻璃或者塑料容器内,脱钙液不得少于待脱钙标本总体积10倍。(2)随后把容器放入到功率为850W的医用微波炉中实施微波脱钙工作。(3)入微波炉之后使用高档加热5min使温度达到100℃,将骨髓的穿刺标本继续保留10min,把其他标本留置30min,对脱钙效果进行检查。(4)脱钙之后的标本不需要水洗,直接按照病理进行取材、脱水、透明、包埋、制片[2]。

2结果

使用快速脱钙液处理之后的标本组织切片的厚度在4μm-5μm之间,切片完整平坦,薄厚均匀并且颜色新鲜,细胞核有清晰染色,具体情况见图1;使用硝酸脱钙液处理的组织切片薄厚不均匀,没有完整切片,染色较模糊并且没有清晰的核着色,会对病理诊断造成相应的影响,具体情况见图2。

3讨论

脱钙是指使用物理或者化学的方式把骨组织成分中的胶原纤维以及钙盐分离,将钙盐去除。快捷、简单、有效的脱钙方式是当前医学研究中重点关注的问题。近年来,广大病理研究人员也进行了大量实验以及探索,比如当前在临床检验中使用的微波脱钙技术等方式,但是因微波处理需要多次操作并且需专人看护,制约了在实际操作中的使用[3]。但无论何种脱钙方式都是为了减少骨组织钙盐并且保证骨组织变软进行的切片。在临床检验中使用方便、优质以及快捷的脱钙方式对骨组织方面疾病实施病理诊断非常重要。

硝酸脱钙方式是把标本取好后直接放入到硝酸液中脱钙,其中脱钙时间在1d-10d之间,随后经脱水、包埋切片等步骤,切片厚度均在6μm以上,并且因切片时没有完整的组织,厚度不均匀容易致使脱片,无法准确掌握脱钙时间[4]。

快速脱钙液进行脱钙时通常需要10min-40min,可将脱钙时间有效缩短并保证制片质量。因快速脱钙液中含有水杨酸物质并且有一定松懈作用,可将酸性溶液有外至内的将钙盐溶解,被溶解的钙盐会迅速出现沉淀,减少和溶剂胶原混合,可把水盐酸的胶原作用充分发挥并把组织间隙疏通,保证钙盐快速脱钙[5]。同时还因组织在酸性溶液中滞留的时间较短,对组织的伤害较小,会最大限度的保证切片平整,有较好的染色效果。此种脱钙方式便捷、简单、快速,属于有效的骨组织脱钙方式。

综上所述,将快速脱钙液运用在临床病理检验中,可将切片质量显著提高,有推广运用意义。

参考文献:

[1]李玉莲,徐晓艳.临床病理检验中不同骨组织脱钙液效果的比较[J].山西医科大学学报,2014,45(10):996-997,1004.

[2]黄勋福,毛荣军,韩福兰,等.510例股骨头标本常规脱水与超声波快速脱水对切片效果的比较研究[J].国际医药卫生导报,2012,18(21):3160-3162.

[3]张青军,景强.石蜡包埋骨组织的DNA检验[J].法医学杂志,2013,29(2):145.

[4]李花,涂政,石屹,等.骨骼脱钙后DNA含量损失问题初探[J].中国法医学杂志,2014,29(2):141-142,144.

[5]张婉仪,阮君,丘展龙,等.骨组织病理制片三种脱钙液的比较[J].吉林医学,2014,35(10):2083-2084.

论文作者:蒲正芳

论文发表刊物:《健康世界》2015年18期

论文发表时间:2016/3/3

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