曾晓梅1 梁 俐1 张晓燕1 张 丹2 刘明华2
1宜宾市第三人民医院 四川宜宾 644000；2泸州医学院药学院 四川泸州 646000
【摘 要】目的：观察肛愈膏的皮肤粘膜刺激性及过敏反应，以评价临床局部用药的安全性。方法：采用家兔完整或破损皮肤、家兔直肠粘和豚鼠皮肤涂抹肛愈膏，观察肛愈膏的皮肤粘膜刺激性和过敏反应。结果：肛愈膏单次给药对家兔完整皮肤和破损皮肤无刺激性。肛愈膏多次给药对家兔完整皮肤无刺激性，对破损皮肤有轻度刺激性性，但该刺激性在给药48 h内可自行消失。肛愈膏单次及多次给药对家兔直肠粘膜无刺激性，对豚鼠皮肤无过敏反应。结论：肛愈膏无明显皮肤粘膜刺激性和过敏反应，局部应用较为安全。
【关键词】肛愈膏；刺激性；过敏反应
Abstract Objective：To evaluate the safety of clinical medication by Observing the skin and mucous membrane irritation of Gang-Yu ointment and allergic response.Methods：The irritative response and allergic reactions were observed by painting Gang-Yu ointment on normal and worn skin，anus mucous membrane of rabbits，and normal skin of guinea pigs.RESULTS：There were no irritative response on intact skin and damaged skin when once dosing.There were no irritative response on intact skin when multiple dosing，however，there were mild irritative response on damaged skin，but the irritation was disappeared on their own within 48 h of administration.There were no irritative response on anus mucous mcmbrane when once and multiple dosing in rabbits．There was no allergic reaction found in guinea pigs．Conclusion：Gang-Yu ointment exhibit no irritative response and allergic reaction，so it is safe after external local administration．
Key words：Gang-Yu ointment；irritation；allergic reaction
随着社会的不断发展，人们的生活节奏也越来越快，生活不规律，导致痔疮在各年龄层的发生率都居高不下，痔疮影响人们的正常生活工作，剧烈的疼痛严重影响着人们的生活质量[1]。肛愈膏是由宜宾市第三人民医院自行研制的痔疮膏，主要成份有黄芪、白芷、槐米、当归、紫草、冰片，具有镇痛抗炎、活血化瘀等功效，用于治疗痔疮术后，促进创面愈合。为了临床用药安全，本研究观察了肛愈膏对家兔皮肤、直肠粘膜有无刺激性和对豚鼠皮肤有无过敏性。现将结果报道如下。
1 实验材料
1.1 实验动物 新西兰白色家兔，体重1.5～2.0㎏，雌雄各半；白色豚鼠200～250 g，雌雄各半。均由泸州医学院实验动物科提供，生产许可证号：SCXK（川）2013-17，使用许可证号：SCXK（川）2013-065。
1.2 受试药物 肛愈膏：由宜宾市第三人民医院提供，为棕褐色膏药。阳性对照：市售马应龙麝香痔疮膏，批号：140118。
2 方法
2.1 家兔皮肤刺激性试验
2.1.1 单次给药皮肤刺激性实验[2] 家兔20只，随机分为两组，即完整皮肤组和破损皮肤组（用消毒针头划痕，以渗血为度）。于给药前24小时将家兔背部两侧去毛，去毛面积约150cm2，将去毛部分分成四个区域，左侧分为上下2个区域，右侧分为上下2个区域，实验采用同体自身对比。左侧上半区涂抹阴性对照芝麻油1.0g/只，左侧下半区涂抹低剂量0.5g/只，右侧上半区涂抹中剂量1.0g/只，右测下半区涂抹高剂量1.0g/只。涂药后用无菌干纱布包扎涂药区域，24h后用温水洗去残留药液。去除药液后1、24、48和72h用肉眼观察并记录涂抹部位有无红斑和水肿等情况以及上述变化的恢复情况和时间。皮肤刺激性分级参照卫生部《中药新药研究指南》，见表1和表2。
2.1.2 多次给药皮肤刺激性实验 家兔20只，分组及皮肤处理同单次给药，连续给药7天。停药后再观察1、24、48和72h。观察涂药部位有无出血点、色素沉着、皮肤粗糙（或菲薄）等变化，并记录其发生时间及消退时间。其它同上。
2.1.3 评价方法 皮肤刺激反应评分：总分最高为8分。红斑：无红斑为0分；勉强可见为1分；明显可见为2分；中度到严重红斑为3分；紫色红斑并有焦痂形成为4分。水肿：无水肿为0分；勉强可见为1分；可见（边缘高出周围皮肤）为2分；皮肤水肿隆起约1mm，轮廓清楚为3分；皮肤水肿隆起>1 mm，轮廓不清楚为4分。皮肤刺激强度评分：根据皮肤刺激反应评分计算其平均分值，以判断皮肤刺激的强度：无刺激为0～0.49分；轻度刺激为0.50～2.99分；中度刺激为3.00～5.99；重度刺激为6.00～8.00分。
2.2 家兔直肠刺激性试验
2.2.1 单次给药直肠刺激性实验 家兔40只，禁食16h后，随机分为4组，阴性对照组家兔肛门直肠涂抹辅料芝麻油1.0 g/只，低剂量组涂抹肛愈膏0.5g/只，中剂量组涂抹肛愈膏1.0 g/ 只，高剂量组涂抹肛愈膏2.0g/只。24h后处死动物，观察内容：包括肛门区域和肛门括约肌，给药后临床表现（如疼痛症状）和粪便（如血、粘液），给药后动物的死亡和尸检情况，局部组织有无充血、水肿等现象，并进行肛周粘膜的病理组织学检查等。
2.2.2 多次给药直肠刺激性实验 家兔40只，方法及分组同上。连续给药7d，每天观察动物的饮食、毛发、肛门、呼吸及四肢活动情况。于末次给药后24h处死动物，取出直肠，观察内容同上。
2.3 豚鼠皮肤过敏实验[3] 豚鼠50只，背部两侧对称去毛3cm×3cm，按雌雄各半随机分为5组，阴性对照组涂抹辅料芝麻油1.0 g/ 只，低剂量组涂抹肛愈膏0.5 g/ 只，中剂量组涂抹肛愈膏1.0 g/ 只，高剂量组涂抹肛愈膏2.0 g/ 只。阳性对照组（2，4-二硝基氯苯，上海试剂一厂生产）。
2.3.1 致敏接触 取受试药物0.2ml涂于豚鼠背部左侧脱毛区（阳性对照用1%2，4-二硝基氯苯，用1：1丙酮麻油配制），在7d和14d以同样的方法重复1次。
2.3.2 激发接触 于末次致敏后14d，将受试物0.2ml涂于豚鼠背部右侧脱毛区（阳性对照组用0.1%2，4-二硝基氯苯，用1：1丙酮麻油配制），6h后除去受试物，即刻观察，然后于24h，48h，72h观察皮肤过敏反应情况。记录各时间过敏反应分值，致敏率（%）=出现皮肤红斑和水肿的动物数/受试动物总数。
2.3.3致敏性评价标准 致敏发生率0～10％为无致敏性；11～30％为轻度致敏性；31～60％ 为中度致敏性；61～80％为高度致敏性；81～100％为极度致敏性。
3 结果
3.1 单次给药皮肤刺激性实验 结果显示：肛愈膏各剂量组对家兔完整皮肤和破损皮肤用药部位均未见红斑、水肿等刺激反应，各组1～72h内各个不同时间点刺激反应平均分值均为0，与阴性对照组比较均无差异。结果见表1。
4 讨论
刺激性是指中药、天然药物制剂（包括活性成分和赋形剂）经皮肤、粘膜、腔道、肌肉、血管等非口服途径给药，经局部吸收或注射后对给药部位以及全身产生的毒性作用，包括血管、肌肉、粘膜等刺激性。观察指标[4] 包括（1）肉眼观察：应详细描述动物局部反应，包括红斑、水肿、充血程度及范围，并以计分的方式表示。同时观察动物的一般状态、行为、体征等。（2）组织病理学检查：组织病理学检查应详细描述给药部位的病理变化，并进行半定量分析、判断。提供相应的组织病理学照片。（3）可逆性观察：若出现刺激性反应，应进行停药后的恢复期观察，以明确毒性反应的恢复情况。
过敏反应指变态反应[5]，又称超敏反应，是指机体受同一抗原再次刺激后产生的一种异常或病理性免疫反应。按抗原与抗体或细胞反应的方式和补体是否参加等，将过敏反应分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四型。其中Ⅰ型过敏反应是了解得最多的一种过敏反应，目前采用的过敏试验方法多数是根据Ⅰ型过敏反应发病机制的不同环节而设计建立的。中药、天然药物为一种外源性物质，也可能作为过敏原引发机体产生过敏反应。
肛愈膏是由宜宾市第三人民医院自行研制的痔疮膏，主要成份有黄芪、白芷、槐米、当归、紫草和冰片，用于治疗痔疮术后，促进创面愈合。本研究结果表明，肛愈膏单次给药对家兔完整皮肤和破损皮肤无刺激性。肛愈膏多次给药对家兔完整皮肤无刺激性，对破损皮肤有轻度刺激性性，但该刺激性在给药48 h内可自行消失。肛愈膏单次及多次给药对家兔直肠黏膜无刺激性，对豚鼠皮肤无过敏反应，揭示肛愈膏无明显毒性反应，局部应用较为安全。
参考文献
[1] 蔡晓松，韩翼，龙启军．黄柏片辅助预防痔疮手术后感染的临床研究．中华医院感染学杂志，2014，24（16）：4064-4065，4068．
[2] 刘旭琴，冯玉香，程卫东．黄连酊对家兔皮肤的刺激性研究[J]．西部中医药，2012，25（6）：13-14．
[3] 刘晓红，孙听，焦敬，等．复方麝香草酚醇溶液对豚鼠皮肤的过敏性实验研究[J]．2013，53（33）：28-29．
[4] 窗体顶端
[4] 杨超，唐桂英，吕姗珊，等．麝香追风止痛膏局部皮肤刺激性及过敏性实验研究[J]．中国中医急症，2014，23（8）：1491-1493
[5] 黄鑫，郝宝成，高旭东，等．速康解毒口服溶液对兔皮肤刺激性和过敏性的实验研究[J]．中国草食动物科学，2015，35（1）：37-40.
论医学人文精神与医患关系的联系
论文作者:曾晓梅 梁俐 张晓燕 张丹 刘明华
论文发表刊物:《中国医学人文》(学术版)2016年1月第2期
论文发表时间:2016/5/9
标签：皮肤论文; 家兔论文; 刺激性论文; 给药论文; 豚鼠论文; 直肠论文; 粘膜论文; 《中国医学人文》(学术版)2016年1月第2期论文;