郑晓璇 杨万勇(通讯作者) 黄少卿 刘伟畴 刘雅丽 黄格格 梁晓莹
（东莞光华医院检验科 广东 东莞 523416）
【摘要】 目的：研究白细胞介素37（IL-37）对SiHa细胞中MMP-2转录表达的调控作用。方法：首先，用Hilymax转染试剂将IL-37过表达载体转染宫颈癌SiHa细胞，而后Trizol法提取对照组及实验组RNA，反转录为cDNA，最后采用qPCR方法检测IL-37及MMP-2的mRNA表达改变情况。结果：IL-37载体转染宫颈癌SiHa细胞后，实验组IL-37mRNA表达较对照组升高约115倍(P<0.001)，显示IL-37重组质粒成功转染SiHa细胞，也表明SiHa细胞中IL-37的基础表达量很低。在MMP-2的表达方面，实验组与对照组相比，MMP-2的mRNA水平下降约31.2% (P<0.05)，表明IL-37对MMP-2的表达具有良好的抑制作用。结论：新型抗炎因子IL-37可抑制SiHa细胞中MMP-2的转录表达。
【关键词】 IL-37；SiHa；MMP-2
【中图分类号】R73 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）18-0217-02
新型抗炎因子白细胞介素37（IL-37）是最新命名的一种具有强大炎症抑制作用的细胞因子[1]，截止2015年12月31日，世界上发表的相关研究性论文仅百余篇。该分子更多的功能仍有待探索。目前研究表明，IL-37不仅对多种炎症疾病具有良好的治疗作用，其对多种肿瘤如宫颈癌[2]，肝癌[3]等亦具有抗癌作用。MMP-2是肿瘤转移相关的重要因子，本研究初步探讨了IL-37对宫颈癌SiHa细胞MMP-2转录表达的调控。
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1.材料与方法
1.1 材料
IL-37过表达载体由上海捷瑞生物工程有限公司构建。细胞DMEM培养基及胎牛血清购自Gibco。细胞转染试剂Hilymax购买自上海同仁化学。PCR相关试剂购买自大连Takara公司。
1.2方法
实验分组为对照组及实验组。各组分别收集6孔板2孔的细胞提取RNA。采用Realtime PCR法检测IL-37及MMP-2的mRNA水平改变。其中IL-37的引物序列为：F：GATCACAAAGTACTGGTCCTGG，R: TCCTTTATCCTTGTCACAGTAG. MMP-2的引物序列为：F：5'-GCGGATCCAGCGCCCAGAGAGACAC-3'；R：5'-TTAAGCTTCCACTCCGGGCAGGATT-3'。 引物由上海生工合成。而后进行反转录及PCR检测mRNA的表达情况。
2.结果
2.1 IL-37过表达载体转染宫颈癌SiHa细胞后，Trizol法提取两组的RNA。PCR结果显示，实验组IL-37 mRNA表达较对照组升高约115倍(P<0.001)，显示IL-37重组质粒成功转染SiHa细胞，同时，这一结果也表明SiHa细胞中IL-37的基础表达量很低。
2.2 在MMP-2的表达方面，实验组与对照组相比，MMP-2 的mRNA水平下降约31.2% (P<0.05)，表明IL-37对MMP-2的表达具有良好的抑制作用。
3.讨论
IL-37是IL-37b成员的简称，是最新命名的一种具有炎症抑制作用的细胞因子。IL-37原属于IL-1家族，2010年底，美国科罗拉多大学的Dinarello院士正式对其命名[1]。目前对IL-37的生物学功能及基因本身的研究尚处于起始阶段。现有研究表明，IL-37不仅对结直肠炎，肝炎等炎症疾病具有良好的治疗作用，其对多种肿瘤如宫颈癌[2]，肝癌[3]，纤维瘤[4]等亦具有抗癌作用，很可能是一种潜在的抗癌分子。
在本研究中，我们探索了该因子对宫颈癌MMP-2表达的影响。我们发现，转染IL-37能够有效抑制宫颈癌SiHa细胞MMP-2 的mRNA水平，由于MMP-2与肿瘤转移密切相关，这显示其对肿瘤细胞的迁移侵袭可能具有潜在的抑制作用。总之，IL-37的更多功能仍有待发掘，本研究为该因子在肿瘤防治方面的应用提供了新的线索。
【参考文献】
[1] Nold MF, Nold-Petry CA,Zepp JA,et al.IL-37 is a fundamental inhibitor of innate immunity[J].Nature immunology 2010, 11(11):1014-1022.
[2] Wang S,An W,Yao Y,et al.Interleukin 37 Expression Inhibits STAT3 to Suppress the Proliferation and Invasion of Human Cervical Cancer Cells[J]. Journal of Cancer, 2015, 6(10): 962-969.
[3] Zhao JJ,Pan QZ, Pan K,et al.Interleukin-37 mediates the antitumor activity in hepatocellular carcinoma: role for CD57+ NK cells. Sci Rep[J]. 2014，4:5177-5185.
[4] Gao W,Kumar S,Lotze M T,et al.Innate immunity mediated by the cytokine IL-1 homologue 4 (IL-1H4/IL-1F7)induces IL-12-dependent adaptive and profound antitumor immunity[J].J Immunol,2003,170(1):107-113.
本课题由东莞市科技计划社会发展项目（编号2014108101004）资助。
论文作者:郑晓璇,杨万勇(通讯作者),黄少卿,刘伟畴,刘雅丽
论文发表刊物:《医药前沿》2016年6月第18期
论文发表时间:2016/6/24
标签：转染论文; 细胞论文; 宫颈癌论文; 实验组论文; 转录论文; 因子论文; 作用论文; 《医药前沿》2016年6月第18期论文;