毛玉婷[1]2004年在《生后发育中NR2B在C57BL/6小鼠听皮层脑片LTP诱导中的作用》文中研究说明以往研究表明，NMDA受体NR2B亚单位表达的变化与动物出生后早期的发育可塑性具有相关性。动物出生后的早期经验能影响NR2B亚单位的表达。据测NR2B亚单位与经验依赖性的发育可塑性密切相关，改变特定脑区NR2B亚单位的表达，可以影响相应系统的发育可塑性。由于突触传递的长时程增强(Long-term potentiation,LTP)效应与NMDA受体的功能和学习记忆的密切相关，本文着重研究在发育中NMDA受体亚单位NR2B在C57BL／6小鼠听皮层LTP诱导中的作用。 一．C57BL／6小鼠听皮层脑片LTP特性 本实验采用细胞外记录群体细胞场电位(Field Potential,FP)方法在成年C57BL／6小鼠听皮层脑片上研究LTP特征。给予100Hz高频电脉冲(Highfrequency stimulation,HFS)刺激听皮层白质时，可在听皮层灰质Ⅱ／Ⅲ层记录到明显的LTP。使用模拟的θ节律刺激(Theta burst stimulation,TBS)参数，也可有效地诱导听皮层LTP，但其增加幅度不如HFS诱导的LTP增加幅度明显。华东师范大学2001级硕士论文二.NRZB在C57BL/6小鼠听皮层脑片LTP诱导中的作用1.生后发育关键期拮抗NRZB对听皮层脑片LTP诱导的影响 本实验采用Elvax缓释技术，在小鼠出生后12一14天，在其左侧听皮层定位、缓慢释放NMDA受体NRZB亚单位特异性拮抗剂ifenProdil。在成年小鼠听皮层11/I11层细胞外记录场电位LTP。结果埋药组的LTP比正常组的LTP明显下降，平均增长幅度差异显着，而手术对照组和关键期后埋药组都与正常组无差异。证明NMDA受体尤其是其NRZB亚单位在小鼠听皮层经验依赖性的发育可塑性中起关键作用，并很大程度上影响了LTp和听觉记忆的形成。同时，TBS和HFs差异也在埋药组最明显，说明模仿自然频率的刺激引导的LTP更易受到NMDA受体及其级联反应的影响。2.激活NMDA受体活动对听皮层脑片LTP诱导的影响 同样采用Elvax缓释技术，关键期内植入听皮层，在成年小鼠听皮层检测LTP。在记录前孵育期，ACSF中加入NMDA，激活NMDA受体，观察LTP变化。结果正常激活组LTP比正常组的LTP幅值更高，埋药后激活组也比埋药组LTP高，甚至埋药后激活组TBS诱导的LTP幅值超过了正常组的LTP幅值，充分说明NMDA对LTP诱导的促进作用。同时，激活组的TBS诱导的幅值超过了HFS诱导的LTP幅值，证明e节律刺激引导的LTP对NMDA受体的依赖性更强。 总之，在发育关键期内C57BL/6小鼠的听皮层植入含NRZB特异性拮抗剂ifenProdil的Elvax，使埋药药组动物在关键期内，左侧听皮层一直受着ifenProdll的作用，含NRZB亚单位的NMDA受体的通道开放被抑制，影响了小鼠听皮层神经元在关键期内经验依赖性可塑性的发育和听皮层LTP及听觉记忆的形成，而在记录前脑片孵育期间，激活NMDA受体，会有效提高诱导的LTP的幅值，补偿关键期拮抗NRZB产生的抑制效应。同时，比较TBS诱导的LTP和HFS诱导的LTP得出，e节律刺激引导的LTP对NMDA受体的依赖性更强。
臧绍云[2]2004年在《生后发育中NR2B受体在C57BL/6小鼠听皮层LTP诱导中的作用》文中研究指明突触传递的长时程增强效应(Long-term Potentiation,LTP)自发现以来，因为具有协同性、特异性、联合性等特征，而被认为与学习、记忆的神经机制相关。很多强有力的实验资料都表明，LTP在发育可塑性中起着非常重要的作用。对LTP机制的研究中发现，NMDA受体发挥着重要作用，其中含NR2B亚单位的NMDA受体具有独特的生理、药理特性：介导的EPSCs时程长，对Mg~(2+)、Glu、Gly敏感性高。这些特性使早期含NR2B亚单位的NMDA受体更易受周围环境的影响，从而“启动”发育过程中的各种结构和功能的生物反应。 本实验采用Elvax加载药物缓释技术，在小鼠出生后早期，在其一侧听皮层慢性施加NR2B亚单位特异性拮抗剂ifenprodil，在发育关键期内阻断特定脑区NR2B亚单位功能活动，推测可能影响相应脑区突触的形成，或减弱突触联系的强度。Rudoh等发现，听皮层所记录到的LTP要比视皮层大，原因是听皮层Ⅱ／Ⅲ层的水平方向的突触密度较视皮层要大两倍，提示形态学特性与LTP特性的一致性。因此，我们在给药小鼠的成年期，检测其LTP的表达，观察LTP功能的变化，为NMDA受体NR2B亚单位在发育关键期的作用机制提供实验依据。 本论文包括两个部分：一、听皮层LTP的基本特性。首先用电生理方法记录声音诱发的听反应，确定C57BL／6小鼠的初级听皮层。继而，在初级听皮层电刺激白质，在听皮层灰质Ⅱ／ⅢII层诱导、记录LTP。并观察了LTP在不同诱导刺激下的变化，观察LTP表达时程中电位幅度、潜伏期的变化。结果表明：听皮层LTP的诱导中呈现两种模式：一类出现PTP，一类未出现PTP；听皮层LTP的表达受到强直刺激强度的影响，高强度强直刺激诱导的LTP幅度增长百分数显着性大于低强度强直刺激诱导的LTP幅度增长百分数。实验小鼠的年龄也影响了听皮层LTP的表达，二月龄小鼠的LTP幅度增长百分数显着性大于四月龄小鼠的LTP幅度增长百分数。 二、生后发育“关键期”阻断NR2B受体活动对听皮层LTP的影响。小鼠出生13—15天(耳道刚打开)时，采用Elvax缓释技术，在一侧听皮层慢性施加NR2B亚单位特异性拮抗剂ifenprodil。待其成年时，检测LTP的诱导条件的变化和表达特征的变化。结果发现：关键期给药组、成年给药组的LTP幅度增长百分数显着性小于正常组的LTP幅度增长百分数;关键期给药组LTP幅度增长百分数显着性小于成年给药组的LTP幅度增长百分数。推测:一NMDA受体NRZB亚单位在听皮层LTP中扮演重要角色;二NMDA受体NRZB亚单位在听觉发育可塑性中起重要作用;叁NMDA受体NRZB亚单位的表达量和神经元联系的紧密程度可能是影响听皮层LTP的两大因素;四发育关键期的可塑性大于成年期的可塑性。
张凌[3]2005年在《大鼠听皮层NMDA受体NR2B亚单位蛋白质经验—依赖性的表达》文中认为以往研究表明,NMDA受体NR2B亚单位表达量变化与动物出生后早期的发育可塑性变化具有相关性。动物出生后的早期经验能够影响NR2B亚单位的基因表达。推测NR2B亚单位与经验-依赖性发育可塑性密切相关,改变特定脑区NR2B亚单位的表达量,可能影响相应系统的发育可塑性。本论文采用Western-Blotting技术和免疫组织化学方法,研究了早期听觉剥夺对大鼠听皮层NR2B受体亚单位蛋白质的年龄-依赖性表达模式的影响,并比较其与NR2B亚单位mRNA水平上的变化是否出现时间和空间上的一致。从蛋白质水平上,对NMDA受体亚单位NR2B在脑的经验-依赖性听觉功能发育可塑性中的作用做出评价,为阐明中枢听觉功能发育可塑性的分子机制提供理论依据。一、大鼠听皮层NMDA受体亚单位NR2B蛋白质的年龄-依赖性表达规律应用免疫组织化学反应和蛋白质杂交技术(Western-blotting),在SD大鼠生后各个年龄段,观察听皮层NMDA受体亚单位NR2B的表达量变化,为研究NR2B亚单位在年龄-依赖性脑听觉发育可塑性中的作用机制提供理论依据。Western-Blotting和免疫组化的结果均显示:生后各时间点听皮层神经元中均有NR2B亚单位阳性神经元的表达,数量随着年龄的增长逐渐递减,即在出生后就有高水平表达,之后表达量呈现下调趋势,并逐渐降至成年的低水平。但在出生后13天(P13) 至21天(P21) 有一个回升,出现一个短暂的过性表达高峰,随
参考文献：
[1]. 生后发育中NR2B在C57BL/6小鼠听皮层脑片LTP诱导中的作用[D]. 毛玉婷. 华东师范大学. 2004
[2]. 生后发育中NR2B受体在C57BL/6小鼠听皮层LTP诱导中的作用[D]. 臧绍云. 华东师范大学. 2004
[3]. 大鼠听皮层NMDA受体NR2B亚单位蛋白质经验—依赖性的表达[D]. 张凌. 华东师范大学. 2005