山长地
（嘉祥县人民医院医院感染管理科， 山东272400）
【摘要】目的：探讨应用两种培养基分离鉴定酵母样真菌的不同鉴定效果比较。方法：近年来本研究收集我院患者640份临床送检标本，分别划线接种于沙保弱培养基与CHROMagar显色培养基上，分离鉴定酵母样真菌效果。结果：沙保弱培养基与CHROMagar显色培养基对白色念珠菌和热带念珠菌分离鉴定效果差异有显著性（P< 0.05），而沙保弱培养基与CHROMagar显色培养基对其它酵母样真菌生长阳性率鉴定差异无显著性（P<0.05）。结论：沙保弱培养基和CHROMagar显色培养基都有较好的分离酵母样真菌的鉴别效果，显色培养基在分离鉴定酵母样菌中操作简便、抑杂菌强，又优于沙保弱培养基。
【关键词】沙保弱培养基；显色培养基；酵母样真菌；分离鉴定
由真菌引起的条件致病菌感染近年来日益增多[1]，其中以酵母样真菌引起的深部真菌感染最为常见，常常导致患者的终期感染，这给临床治疗带来了困难。由于抗真菌药物品种有限，研究真菌的耐药性并控制其耐药性发生，显得尤为重要。为了提高其诊断率和治愈率，临床急需新技术代替传统的常规鉴定方法[2]。科玛嘉念珠菌显色培养基是一种新的分离和鉴定的培养基（法国生产），本研究采用此培养基与传统的沙保弱培养基对酵母样菌的分离鉴定进行比较，取得了预期的临床效果，现将有关结果分析报告如下：
1 资料与方法
1.1 一般实验资料2010年1月——2014年12月期间，我们收集在我院住院及门诊患者临床送检的尿液、痰液、粪便、咽拭子、分泌物等标本共640例。CHROMagar显色培养基我们购自山东济南博赛生物研究所，沙保弱培养基我们按照《全国临床检验操作规程》中的规定进行自配。
1.2 培养方法 首先我们将选取的标本接种于沙保弱培养基上，30℃培养48h。然后挑取可疑菌落经涂片，革兰染色确定为酵母菌孢子后，同时作碳源同化实验、芽管实验等进行鉴定，将念珠菌鉴定至种。7 d不生长者为报告阴性。同时我们接种至显色培养基上，30℃培养48h后，依据菌落显示的颜色进行菌种鉴定，结果显示为绿色为白色念珠菌，蓝色为热带念珠菌，紫色为光滑念珠菌，粉红色为克柔念珠菌，白色为其他酵母菌。
1.3 统计学处理 采用SPSS18.0统计软件进行统计分析和总结，各项指标均以均数±标准差（?x±s）表示，分类资料统计分析采用χ 2检验，p <0.05表示两者差异有统计学意义。
2 结果
2.1 菌种分布及两种培养基对酵母样真菌分离鉴定结果比较 经48h细菌培养结果显示沙保弱培养基与CHROMagar显色培养基上真菌生长阳性率有统计学意义（P<0.05）。除了酵母样菌外还有5例烟曲霉菌均在沙保弱培养基和显色培养基上生长，白色念珠菌有4例在显色培养基上没有显色，其他念珠菌没有出现显绿色的假阳性培养，有3例标本是两种念珠菌混合感染，在沙保弱培养基上菌落形态相似，只鉴定出了白色念珠菌，而在显色培养基上均为白色念珠菌和热带念珠菌混合感染，颜色鲜明很容易判断。在显色培养基上为白色的菌落只能用常规法鉴定。酵母样菌菌种分布及两种培养基对酵母样真菌分离鉴定结果比较详见表1。
2.2 两种培养基中菌落形态的差异比较 在菌落形态比较上，酵母样真菌的菌落在显色培养基上明显偏大，容易观察研究；而在沙保弱培养基上则明显细小，两者的差异性易于观察和做比较分析。
3 讨论
随着抗真菌药物越来越多的应用于临床，真菌耐药性不断增强，目前真菌感染成为医院感染的主要病原菌之一，已成为下一步临床检验研究的热点问题。研究报道显示酵母样真菌感染主要侵袭呼吸道，其次是泌尿生殖道和消化道 [3]，这应引起临床医生的重视，在对患者治疗效果不佳时，应考虑到真菌感染的可能。因此微生物实验室要加强真菌检测，及时发现菌群失调，减少抗生素相关腹泻的发生。本研究也对几种抗真菌药物对酵母样真菌的耐药率进行了观察，5-氟胞嘧啶耐药率较低，在10%以下，灰黄霉素耐药率最高，在70%以上，氟康唑对酵母样真菌耐药率已达30%左右，其他药物耐药性也有所增加，出现了较多中度敏感株，这些必须引起广大医生和微生物工作者的高度重视，加强临床医生和临床检验人员之间的联系，合理使用抗菌药及抗真菌药物，以延缓和防止真菌耐药性的进一步发展。
酵母样真菌引起的医院内感染呈逐年增多趋势，因而对酵母样真菌做出快速鉴定具有十分重要的意义。本研究采用CHROMagar显色培养基，其最大的优点是简便快速，分离培养的同时即可鉴定。直接从临床标本中分离和鉴定出白色念株菌，可在48h内作出正确判断，经生化试验确认其符合率为90%～100%[4]，但酵母样真菌其他种类的菌落颜色不一，稳定性一般，还需要按常规方法进一步确认。CHROMagar显色培养基对标本中杂菌抑制作用明显优于沙保弱培养基。如在1例尿液样品中，用CHROMagar显色培养基分离出近平滑念珠菌，而在沙保弱培养基生长出了大量不动杆菌，因此沙保弱培养基尚需改进本身质量。CHROMagar显色培养基特别适合临床大便和阴道分泌物杂菌较多的标本的检测，尤其是在检测混合酵母样真菌感染上，能弥补传统培养基的不同[5]。
综上所述，沙保弱培养基和CHROMagar显色培养基都有较好的分离酵母样真菌的鉴别效果，显色培养基在分离鉴定酵母样菌中操作简便、抑杂菌强，又优于沙保弱培养基。本研究通过两种培养基的对比试验显示，CHROMagar显色培养基优于沙保弱培养基，能够更快速简便的分离鉴定临床常见酵母样真菌，为临床提供了可靠的科学依据。
参考文献
[1]周贵民，谢灵．国内酵母菌感染和实验室诊断的现状及建议[J]．中华医学检验杂志，2009，19(5)：301~303．
[2]张正，赵素蕊，庞良锦，等．临床标本分离 475株酵母样真菌调查分析[J]．中华医学检验杂志，2010，19(5)：267~269．
[3]单才华,贺奇超．小儿葡萄球菌败血症的细菌学分类及抗生素耐药性[J]．中华医院感染学杂志，2011，11(6)：401-403．
[4]谢国艳,蔡志昌,周建华,等．临床感染深部真菌的分离鉴定和药敏结果分析[J]．检验医学，2007，19(2)：122-124．
[5]黄六昆，夏星，等.临床标本中酵母样真菌的分离及耐药性现状分析[J]．中华检验医学杂志，2009，26：89-90.
论文作者:山长地
论文发表刊物:《中国医学人文》2015年第9期供稿
论文发表时间:2015/11/6
标签：培养基论文; 真菌论文; 显色论文; 酵母论文; 鉴定论文; 菌落论文; 念珠菌论文; 《中国医学人文》2015年第9期供稿论文;