【关键词】HE染色；病理技术；诊断
病理检查作为一种创伤性诊断技术，是诊断胃癌、子宫内膜癌等多种疾病的金标准，可通过多取材、细观察的方式明确判断，但仅依靠伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ,HE)染色方法容易受切片染色效果、操作人员技巧、处理质量等因素干扰，影响诊断准确性[1-2]。相关报道显示，在病理技术的实际应用中存在标本固定不合理问题，致使组织脱水不完全，影响制片质量[3]。为了探讨更加可靠的病理诊断方法，本文就临床病理诊断中HE染色方法的应用价值进行了分析。
1资料与方法
1.1一般资料
选取2017年5月至2019年5月本院各科室送检的120例石蜡切片，主要为胃镜活检、脂肪组织、骨石蜡切片，严格按照相关操作规范进行HE染色，观察120例染色标本的细胞学制片。其中包括子宫内膜22例，胃镜活检36例，脂肪组织29例，骨组织22例，胃肠、肝胆11例。
1.2方法
HE染色方法：本次所有大块组织、器官标本源于手术室，细胞学、穿刺小标本源于超声、内窥镜、CT引导下穿刺。为了保证制片质量，在取材操作中要求准确、快速进行。在选材、制片中按照不同组织合理选择固定、脱水时间和制片染色方法。如，在小标本中脱水、固定时间应尽量缩短；硬组织应选择新切片刀实施制片；脂肪组织脱水、固定时间应适当延长；软组织、破碎组织和活检组织需选择已使用过的旧切片实施制片操作。HE染色具体步骤如下：（1）经二甲苯去蜡3次，约5～10min。（2）使用无水乙醇、95%乙醇、80%乙醇和70%乙醇在脱蜡后各水洗1min。（3）借助苏木紫液染色约3～5min，根据具体情况适当调整染色时间。（4）使用1%酸性乙醇实施水洗操作。（5）用流水浸洗约15min，直至细胞核转化为蓝色为止。如HE染色深度欠佳，可实施再分化或重染处理。（6）借助伊红液染色1min，再用85%乙醇、95%乙醇和无水乙醇各水洗1～2min。（7）再使用二甲苯透明3次，各3～5min。（8）借助中性树胶实施盖片封片处理，贴上对应标签。
病理技术改进方法：在病理检查中将大小各异的标本分开实施固定、脱水、染色处理，按照不同组织的特性完成制片，促使细胞核被苏木精染成蓝色，软骨基质和钙盐颗粒染作深蓝色，黏液染成灰蓝色。一般胶原纤维呈淡粉红色，弹力纤维呈亮粉红色。细胞间质染为桃红色、粉红色等深浅不一的红色，胞浆中的嗜酸性颗粒细胞染成鲜红色。由于组织着色程度与细胞、组织种类关联密切，且能够根据病理、生活周期改变出现改善。比如，大多数细胞在处于新生阶段时，其胞浆伊红着色浅淡，但当细胞处于衰老期或退行性改变时，伊红染色会逐渐加深。
1.3观察指标
统计改进前后的染色结果。
1.4统计学方法
将数据录至SPSS23.0，以X2检验定性资料（％、n），以t检验数值变量资料(x±s)，P小于0.05，表明有差异。
2结果
胃镜活检、脂肪组织、骨组织改进后的HE染色结果高于改进前的染色结果，见表1。
表1染色结果比较[n(%)]
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3讨论
病理检查期间，组织染色质量会直接影响到最终的诊断结果。相关报道显示，在HE染色操作中，染色质量与细胞核的染色质量关联密切，这是因为组织内部分布着大量的细微小孔，经染料充分渗透后会与组织紧密结合，而染料被组织吸收后会逐渐扩散、溶解[4-5]。比如，包含酸性物质的组织可与染液内的阳离子相结合，形成固定分子，而包含碱性物质的组织可与染液内的阴离子相结合，起到牢固性作用。但细胞、组织的染色质量会受到固定时间、取材操作、切片质量、操作时间等因素的影响，因此在HE染色中需按照不同的标本种类，选择合适的取材方式、范围、工具，减少对组织的挤压，避免改变组织结构。比如，对于体液较多的患者应离心后取沉渣，骨组织需实施脱钙处理，防止影响染色效果。本文中胃镜活检、脂肪组织、骨组织改进后的HE染色结果(97.22%、96.55%、95.45%)高于改进前的染色结果(77.78%、72.41%、63.64%)，显示采用改进后的HE染色方法可有效提高切片质量，为医师判断患者病情提供有力参照。分析后可知，所需送检的组织应按规定固定，有效保证组织与活体成分和形态相近，避免在制片中出现自溶情况。且在组织固定后需在规定时间内快速送检，防止因固定时间过长导致组织变脆、变硬，影响诊断结果。此外，HE染色操作应注意选取试剂浓度的变化，合理控制温湿度，确保各项操作规范、科学。
综上所述，在临床病理诊断中应用改进后的HE染色方法能够根据不同组织完成对应的固定、脱水、切片操作，提高制片质量，保障病理诊断结果的准确性，为医师诊疗患者病情提供更加可靠的参考依据，具有重要的临床应用价值。
参考文献：
[1]唐仲平, 崔权哲, 杨李波, 等. 全切片图像扫描技术在临床病理诊断工作中的应用[J]. 河北医科大学学报, 2018, 39(10):1205-1209.
[2]董志广. 探讨在病理常规染色中GS-C高清恒染系统的应用[J]. 临床医药文献电子杂志, 2016, 3(27):5345-5346.
[3]郑样贞. 分析HE染色技术在病理诊断中的应用[J]. 中国社区医师, 2016, 32(17):109-109.
[4]王海霞. HE染色在病理诊断中的应用价值[J]. 世界临床医学, 2017, 11(7):20.
[5]惠新利. HE染色两次分化法在病理制片技术中的应用效果[J]. 临床医学研究与实践, 2019, 4(17):105-107.
论文作者:姜丹
论文发表刊物:《医师在线》2020年3期
论文发表时间:2020/4/7
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