许斌[1]2000年在《睫状神经营养因子mRNA在脊髓损伤中的表达及其对脊髓损伤的保护作用的研究》文中进行了进一步梳理睫状神经营并因于mRNA 在脊髓损伤中的表达 及其对脊髓损伤的保护作用的实验研究 脊髓损伤是一类后果严重的常见损伤，给社会和家庭带来沉重的精神和经济负 担。脊髓损伤后如何恢复其神经功能一直是医学专家努力探索的重点。近年来研究 发现，睫状神经营养因子（Ciliary Neurotrophic Factor， CNTF）对体外培养的多种神 经元具有营养作用，可以促进多种神经元的存活，包括感觉，运动，交感和副交感 神经元。周围神经损伤后，睫状神经营养因子对多种神经元具有不同程度的保护和 促进其再生作用。但对其在脊髓损伤中的作用如何研究甚少。本课题在这一方面作 了一些研究。 本研究应用多种实验技术和方法，旨在阐明二个问题：（1）CNTF是否介入了 脊髓损伤，其在脊髓损伤后的InRNA表达变化如何？（2）CNTF是否能够保护脊 髓神经元，其可能作用机制是什么？最终目的是从整体、细胞和分子水平探讨CNTF 对实验性脊髓损伤大鼠脊髓神经元的保护作用及机理，为临床应用外源性神经营养 因子治疗脊髓损伤提供一定的实验依据。 本实验的主羹珐果和结论： 1．动物模型的建立 采用较接近人类脊髓损伤的模型－Aellen氏重物坠落（Weight Drop，WD）法脊 髓损伤模型致大鼠脊髓T8中度损伤。脊髓损伤成功后，采用Yaksh法行蛛网膜下 腔置管。各组于术后同时间注入等体积的CNTF或生理盐水，按实验设计定期处死 动物，进行各项指标测定。 2．损伤大鼠脊髓CNTFmRNA表达的变化 按试剂盒说明书对标本进行RNA抽提和RT－PCR扩增，扩增产物进行凝胶电 泳，最后行计算机扫描密度定量。结果发现，对照组大鼠脊髓CNTFmRNA呈现低 表达，在脊髓损伤后CNTFmRNA的表达持续增高，至伤后3天，其表达达到高峰， －2－ ＿——％———— 与对照组相比均有显著性差异。 3．CNll7对损伤脊髓神经元数目、乙 碱酯酶及酸性磷酸酶含量的影响 取伤段脊阮组织行Ni881染色检查，将尼氏染色切片进行计算机扫描，用电阉 和图像分析软件进行囹像采集和处理，测量神经元的数目。将冷冻伤段脊瞩组织匀 浆后，按试剂盒说明书进行AchE和ACP含量测定。结果显示：损伤后脊回神经元 数目显著减少、As含量持续下降、ACP含量升高；给予外源性Ci后神经元 数目显著增加、AchE含量下降援慢、ACP含量上升较缓，与正常对照组及生理盐 水组相比，均有显著性差异。 4．CNTF对损伤脊鹏组织含水量、局部离子含量的影响 取伤段脊回组织称取湿重，＃后将标本置于烘箱中烘于并称取干重，按mott 公式计算脊鹏含水量。将干燥标本消化后，稀释并测定溶液中Na、K＋、Caf＼Mgl” 浓度（呶Inl人再换算成每克干重脊瞩组织中离子含量（p切口叱drywt人结果表明： 损伤组伤后伤区脊问组织含水量较对照组增加非常显著，Na＋、CaZ“含量均显著增加， K＋、p含量均降低（p＜ 0刀1入给予外源性 C灿后伤区组织含水量明显下降（p＜ 0刀1人M、CaZ”含量较伤后有明显下降，同时，K＋、Mgl”含量也有明显回升（卜0刀1人 但仍明显高于对照组。 通过对大鼠脊回损伤前后组织中的CNyMA含量的测定，发现其在脊回损 伤后呈现高表达，表明CNIT在脊瞩损伤的修复过程中具有重要的作用；给予外源 性的CNTF后，能够反应脊囚神经功能状态的乙酞胆碱酯酶和酸性磷酸酶的含量及 脊瞩创伤性水肿均较损伤组有显著性改菩，说明CNTF对脊回神经元具有保护作用； 进一步研究表明CNTF可能踞过稳定损伤局部细胞内外离子平衡来起到保护脊回 神经元的作用的。
邓莉[2]2007年在《骨髓基质干细胞及地塞米松治疗大鼠脊髓挫伤的实验研究》文中研究指明目的：探讨骨髓基质干细胞对脊髓损伤修复的可能作用及其对bFGF的表达影响，为骨髓基质干细胞修复脊髓损伤提供实验依据。方法：采用改良的Allen氏WD法建立脊髓(T_(12)节段)损伤模型，对66只SD大鼠，6只／组。随机分为正常组、损伤后未移植的对照组(术后1天组、3天组、7天组、14天组和21天组)和骨髓基质干细胞移植治疗组(1天组、3天组、7天组、14天组和21天组)，通过BBB行为学评分比较两组动物后肢恢复功能，ABC免疫组织化学方法检测bFGF的表达。在荧光显微镜下观察细胞移植组荧光细胞生存情况。在Olympus光学显微镜下观察各组bFGF蛋白表达情况，HPLAS-1000高清晰图文分析系统，对bFGF免疫阳性反应物进行平均灰度测定。结果：1．移植细胞观察结果：在移植后1天、3天、7天、14天、21天均可见转绿色荧光蛋白的荧光细胞，荧光细胞呈小圆形亮点，1天组可见细胞聚集在损伤部位，成团状，很难分清单个细胞；3天组成团的细胞开始向周围扩散可见荧光细胞呈小圆形；7天组细胞清晰可数，在损伤中心分布均匀；14天组与7天组无明显的差异；21天组细胞分布更加均匀，细胞变得更圆，并向远处迁移。2．绿色荧光蛋白转基因小鼠MSCs移植治疗脊髓损伤后bFGF的表达变化：bFGF在各组大鼠脊髓灰质神经元胞质和胶质细胞中均呈阳性表达，损伤后对照组与骨髓基质干细胞移植组阳性细胞数总体出现先升高后降低的趋势，损伤后7d表达达高峰，21d接近正常组。损伤对照组3d、7d、14d组阳性细胞数均高于正常组(p＜0.05)，1d和21d组接近正常组(p＞0.05)；细胞移植组在3d、7d、14d、21d组阳性细胞数均高于正常组(p＜0.05)，1d组接近正常组(p＞0.05)；损伤对照组与损伤后细胞移植治疗组比较，阳性细胞数于3d、7d、14d、21d组出现差异(p＜0.05)，余各组未见差异。其间可见细胞内bFGF阳性部位由以胞浆为主转向核、浆并现。平均狄度值检测结果显示：灰度值出现先降低后升高，7d最低；损伤对照组和细胞移植组均低于正常组(p＜0.05)，细胞移植组在各时段均低于损伤对照组(p＜0.05)。3．行为学评分结果：损伤对照组及细胞移植治疗组BBB评分值在损伤后各时段(1d、3d、7d、14d、21d)均小于正常组(p＜0.05)。细胞移植治疗组与损伤对照组BBB评分比较，1d、3d、7d组均无差异(p＞0.05)14d、21d出现显著差异(p＜0.05)，有统计学意义。结论：1．脊髓损伤后直接移植的转绿色荧光蛋白的基因鼠的骨髓基质干细胞能存活，并远处迁移。2．BBB评分显示移植骨髓基质干细胞可以促进脊髓损伤的功能恢复。3．脊髓损伤后bFGF表达的变化，提示其参与了脊髓损伤后对神经元的保护作用。4．MSCs移植后增强了内源性bFGF的表达，推测MSCs参与了脊髓损伤的修复。目的：探讨实验性大鼠脊髓挫伤后急性期前炎症因子：肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)在脊髓内的表达变化以及大剂量地塞米松对其表达的影响。方法：健康成年雌性SD大鼠90只(体重220-250g)，随机分成15组：正常对照组、脊髓挫伤(于T11-T12节段挫伤)1h组、3h组、6h组、12h组、24h组、36h组、48h组，脊髓挫伤后地塞米松干预1h组、3h组、6h组、12h组、24h组、36h组、48h组，每组6只。动物模型制作：采用改良的Allen氏WD法建立脊髓(T12节段)损伤模型；取损伤处尾侧脊髓入4％多聚甲醛后固定，恒温冷冻切片机作20μm厚的连续冰冻切片，间隔取片后，做常规HE染色和用抗TNF-α和抗IL-6行免疫组织化学方法染色，在光镜下观察各组脊髓内TNF-α和IL-6的分布及阳性细胞计数，利用HMIAS-2000高清晰度彩色医学图文分析系统检测TNF-α和IL-6免疫阳性反应物的平均灰度值。应用SPSS11.0软件包单因素方差分析。结果：1．正常大鼠脊髓组织没有见到TNF-α和IL-6的阳性表达；2．TNF-α在脊髓损伤后即有表达，主要分布于脊髓神经元的胞浆及神经胶质细胞。免疫阳性反应在损伤后1h开始增强，24h达高峰，后逐渐下降，于48小时回落到正常；损伤后地塞米松干预后1h仍有免疫阳性产物，于6h达高峰，且峰值较前降低，12h后逐渐减少，至48h恢复正常。3．IL-6在脊髓损伤后即有表达，主要分布于神经元胞浆及神经胶质细胞。免疫阳性反应在损伤后1h开始增强，12h达高峰，后逐渐下降，于48h回落至正常；损伤后地塞米松治疗后1h、3h、6h仍有免疫阳性反应，于6h达高峰，且峰值较前降低，12h后逐渐降低，至48h恢复正常。结论：1．正常脊髓组织内无TNF-α、IL-6的表达。2．TNF-α和IL-6在脊髓损伤后即出现，但持续时间较短，48h消失，提示它们参与了脊髓损伤的炎症反应。3．大剂量地塞米松对TNF-α、IL-6有明显的抑制作用。推测DEX在治疗脊髓损伤时除了已知的抗炎作用外，还可能具有神经保护作用。
韩久卉[3]2005年在《腺病毒介导的外源性基因在脊髓和周围神经表达及其影响因素的实验研究》文中指出周围神经损伤是临床上常见疾病,周围神经损伤的显微外科修复技术已经十分精湛,却长期以来难以获得满意结果。因为周围神经再生是一个极为复杂的生物化学和细胞学过程,再生微环境中所含的多种物质成分对再生神经的生长和走向起着十分重要的作用,是受损神经形态和功能恢复的重要因素。随着分子生物学和基因转移技术不断进步,神经损伤的基因治疗研究正在兴起。近年来应用复制缺陷型重组腺病毒(Adenovirus, AdV)为载体将各种神经营养因子基因转入脊髓以保护受损轴突的靶神经元和促进周围神经再生的研究,已成为神经修复研究领域的前沿课题。基因治疗的效果依赖于将目的基因特异、高效和安全的转染受损神经元及神经并高效表达。但是目前常用的向神经系统投递载体的方法具有转基因表达效率低、手术操作复杂、局部炎性反应重等缺点。而且,对转基因表达在脊髓和周围神经内的详细进程还不十分明确。另外AdV 所激发的机体免疫反应使得目前这一载体的应用在很大程度上受到障碍。近来在修复周围神经缺损实验和临床研究中,人们又一次将目光投到上世纪初的神经端侧吻合上。神经端侧吻合法与常规神经修复方法相比的优点在于修复长段神经缺损时不需要进行神经移植,另外在神经损伤的近端神经干不能被利用时,不需要牺牲正常神经做移位术。但是目前神经的端侧吻合法仍然是引起争议的方法,对再生轴突的来源问题也是观点不一致。针对上述问题,本系列实验中将携带有LacZ基因、绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein, GFP)基因、细胞毒T淋巴细胞相关抗原4 免疫球蛋白4 (cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4 immunoglobulin, CTLA4Ig)基因、和不带外源性基因的重组复制缺陷型腺病毒载体(AdLacZ,AdGFP,AdCTLA4Ig和Ad0)单独或共同转染正常大鼠或端侧吻合大鼠的周围神经,以掌握LacZ 基因在靶神经元和周围神经转基因表达的规律和特点;探讨CTLA4Ig 诱导机体对AdV 载体免疫耐受的作用及其机制;分析端侧吻合再生轴突的来源。本实验具体分为三部分:
李月奎[4]1996年在《白细胞介素1，6及NGF低亲和力受体在大鼠实验性神经元损伤中的表达及其机制的研究》文中认为神经元退行性疾病，如Alzheimer病(AD)，肌萎缩侧索硬化(Amyotrophic lateral sclerosis，ALS)是当今国内外神经科学研究的一个热点，其病理特征主要为中枢神经系统中一些特殊脑区神经元的缺失和死亡。ALS主要是上、下运动神经元选择性死亡，伴随进行性瘫痪；AD主要累及前脑基底胆碱能神经元，这种脑内特殊核团神经元进行性缺失和死亡，其原因至今尚未明确。病因涉及遗传、免疫和环境等因素。近年来ALS，AD患者血清和脑脊液中发现特异性抗体能识别神经元，并对神经元有损伤作用，此外，病变区域发现有IgG沉积。因而推测自身抗体与这类疾病神经元的选择性死亡有关。但有关抗体的这种作用也有不同报道。特异抗体是否可以始动神经元损伤过程，通过何种机制发挥作用一直受到关注。 细胞因子，诸如白细胞介素(Interleukin，IL)，肿瘤坏死因子(TNF)以及干扰素(IFN)参与了许多免疫系统介导的神经疾患的病理生理过程，在众多白细胞介素中，IL-1、IL-6与神经元损伤及退变的关系更为密切。多年来对神经元退行性变的研究较多着眼于以经典神经递质为主线索，观察递质合成及其受体水平的变化，而特异抗体及细胞因子与神经元退行性变发生关系的研究只是近几年刚刚起步，尤其是有关特异抗体介导的神经元损伤与细胞因子表达关系的研究尚未见报道。因此，明确细胞因子、抗体在神经元退行性变中的作用，寻求干预或调节细胞因子合成及其对神经元的作用必将会成为这类疾病治疗方面的一个很有价值的领域。 本研究通过建立特异抗体介导神经元损伤离体实验模型，探讨抗体对神经元损伤的机制，采用RT-PCR、原位杂交和免疫细胞化学技术研究细胞因子(IL-1，6)及相关介质在神经元损伤后的变化，并应
倪炜[5]2005年在《TGF-β_1和PDGF-B在猴中枢神经系统的分布及脊髓半横断损伤后的表达变化》文中提出目的:探讨TGF-β_1和PDGF-B在成年恒河猴中枢神经系统的分布,及脊髓半横断损伤后不同时相的表达变化。 方法:健康成年恒河猴15只,随机分为5组。其中1组为正常对照组,另外4组在脊髓T_(11)部位制作左侧脊髓半横断损伤模型,动态观察各组动物后肢运动功能变化。模型动物分别于手术后7d、14d、30d、90d行脑和脊髓取材,冰冻切片免疫组织化学SP法染色,显微镜下观察正常对照组TGF-β_1和PDGF-B免疫阳性反应物在中枢神经系统的分布概况,计数脊髓前角TGF-β_1和PDGF-B阳性神经元数、结果用SPSS11.0统计软件包进行多因素析因方差分析、LSD检验统计学处理。 结果:1.TGF-β_1和PDGF-B的阳性反应物在正常对照组恒河猴CNS的分布区域有所不同。在延髓外侧网状核、小脑齿状核可见明显阳性的TGF-β_1免疫反应阳性的神经元,下橄榄核可见弱阳性细胞分布;在三叉神经脑桥核、疑核、三叉神经背核及网状结构可见棕黄色的PDGF-B免疫反应阳性的神经细胞;在脊髓TGF-β_1和PDGF-B主要分布在灰质前角、中间内、外侧核及胸核神经细胞,阳性反应物亚细胞定位均在细胞浆和突起。此外,脊髓白质也可见胶质细胞呈中等阳性反应。2.猴脊髓半横断术后24h,半横断组左侧后肢肌力为0级,肌张力下降,表现为迟缓性瘫,右侧肌力为3级;伤后14d,脊髓半横断组左后肢肌力均为2级,肌肉萎缩;至伤后90d,左后肢肌力恢复至3～4级。3.脊髓前角TGF-β_1和PDGF-B阳性神经元数分别在脊髓半横断损伤后7d、14d下调至最低点,随着时间延长表达进行性增加,90d时与正常对照组相比较无显著性差异(P>0.05),半横断侧TGF-β_1和PDGF-B阳性细胞数比对侧增加(P<0.05)半横断上端阳性神经元数与下端相比无显著性差异(P>0.05),正常对照组与半横断组恒河猴大
付长峰[6]2006年在《胰岛素样生长因子1真核细胞表达质粒的构建及其对神经胶质瘤细胞和大鼠脊髓损伤模型神经细胞凋亡影响的实验研究》文中提出脊髓损伤(Spinal cord injury,SCI)后,如果能够减少神经细胞的凋亡,降低继发性损伤,对于挽救濒临死亡的神经元、促进神经再生具有重要意义。研究发现,胰岛素样生长因子1(insulin like growth factor, IGF-1)对于维持神经细胞的生存、生长和损伤后的修复具有极其重要的作用,而关于IGF-1对急性脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响作用的研究,目前鲜有报道。为了研究IGF-1对于急性脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响作用,本研究应用质粒载体介导IGF-1基因转染的方式进行了体外及体内试验。在体外实验中,构建了IGF-1真核细胞表达质粒,应用脂质体介导质粒转基因的方法,转染神经胶质瘤(C6)细胞,ELISA及流式细胞术检测证实转染成功,体外诱导细胞凋亡,流式细胞术检测结果证实,IGF-1可减少体外培养的神经胶质瘤细胞的凋亡。在体内实验中,首先制作了大鼠SCI模型,并分组(IGF-1治疗组、模型组及空白对照组)进行不同干预;IGF-1治疗组,并应用免疫组化法证实转染成功、应用透射电镜、TUNEL等证实IGF-1转染后,SCI大鼠脊髓损伤区神经元细胞凋亡明显减少,BBB评分IGF-1治疗组优于模型组。本研究结果表明:应用脂质体介导重组IGF-1质粒的方法可以在体外转染C6细胞,并抑制C6细胞的凋亡;IGF-1真核细胞表达载体可以将IGF-1基因转染到大鼠脊髓神经细胞,并稳定表达IGF-1蛋白到转染后三周。证实IGF-1具有抑制神经细胞细胞凋亡、保护残存神经功能的作用。实验结果为进一步揭示脊髓损伤后神经细胞凋亡的机制及治疗脊髓损伤提供新的治疗方法具有重要意义。
佚名[7]2002年在《作者索引》文中研究指明(按汉语拼音字母顺序排列,索引论文前3位作者)AAdrian W Gelb Development 0f anaesthesiology (15):1 345一1346艾玉峰应用带蒂皮瓣、肌皮瓣修复小腿骨外露、骨髓炎创面 (2):183 组织工程骨复合骨
师一民[8]2017年在《补肾益髓方及其拆方对多发性硬化模型小鼠轴突损伤修复和神经营养信号的作用》文中提出目的多发性硬化(multiple sclerosis,MS)是中枢神经系统(central nervous system,CNS)炎性脱髓鞘的自身免疫性疾病。前期研究表明,具有补肾化痰活血作用的补肾益髓方能减缓MS的小鼠模型实验性自身免疫反应性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的轴突损伤,并促进其再生修复,但其作用机制还不明确。因此,在前期研究的基础上,结合目前国内外有关轴突再生机制及信号转导领域的研究,应用免疫组化、实时荧光定量PCR(quantitative RT-PCR,qRT-PCR)、蛋白质印迹法(western blot,WB)等技术,以轴突再生神经营养因子为研究重点,探讨补肾益髓方及其拆方对EAE小鼠轴突损伤和修复的作用及分子机制,以揭示中医补肾化痰活血法的现代内涵,为中医药辨证论治MS及相关疑难重症提供科学依据。方法140只C57BL/6雌性小鼠,随机分为正常对照(normal control,NC)、模型(model,MO)、醋酸泼尼松(prednisone acetate,PA,5mg/kg)、梓醇(catapol,CA,40mg/kg)、补肾益髓方(BSYS,3.02g生药/kg)、补肾方(BS,1.44g生药/kg)、化痰活血方(HTHX,1.57g生药/kg)组,每组20只。用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG)35-55免疫小鼠制备EAE模型。各治疗组予相应药物灌胃,NC和模型组灌服生理盐水,每日1次,共40天。每日记录小鼠体重和神经功能评分,统计小鼠发病率和死亡率。在EAE小鼠发病第20天(急性期)和第40天(缓解期)取脑和脊髓。苏木素伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)观察其病理变化;透射电镜观察轴突和髓鞘变化;免疫组化法(immunohistochemistry,IHC)检测P-tau与beta-tubulin的表达;应用qRT-PCR、WB法测定BDNF/TrkB/PI3K/AKT mRNA及蛋白的表达。结果1补肾益髓方及其拆方补肾方和化痰活血方对EAE小鼠神经保护的作用1.1补肾益髓方及其拆方对EAE小鼠发病情况的影响造模前各组小鼠体重无统计学差异(P>0.05)。造模后各小鼠体重缓慢上升,于第11天开始,与正常组比较,其他各造模组小鼠体重开始出现明显下降(P<0.05)。于第19天降至最低,后缓慢回升。但第19天到第40天各造模组动物体重均较正常组显著降低(P<0.01)。在第23天到40天,补肾益髓方和补肾组小鼠体重与激素组比较,回升明显(P<0.05或P<0.01)。1.2补肾益髓方及其拆方对EAE小鼠病理改变的影响模型组脑白质血管周围有炎细胞浸润,核固缩明显。激素、梓醇、补肾、化痰活血和补肾一岁组脑白质血管周围有炎细胞浸润,部分核固缩。病理程度较模型组低。脊髓病理变化与脑相似。1.3补肾益髓方及其拆方对EAE小鼠轴突损伤及修复的影响各组小鼠发病第20天和第40天,模型组中p-Tau表达明显上调,beta-tubulin表达明显下调,补肾益髓、补肾和化痰活血方均可明显下调p-Tau表达(P<0.05,P<0.01),上调beta-tubulin蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。2 BSYS及其拆方对EAE小鼠轴突修复的作用机制研究综合qRT-PCR、WB检测结果发现,发病第20天和40天,补肾益髓方及其拆方补肾方与化痰活血方均可明显上调EAE小鼠脑和脊髓BDNF、TrkB、PI3K与AKT mRNA的表达,与模型组相比,均有统计学差异(P<0.05)。补肾益髓方对上述各指标的作用趋势优于拆方补肾与化痰活血方,但无明显统计学意义(P>0.05)。结论补肾益髓方及其拆方补肾方与化痰活血方均对EAE小鼠有神经保护作用,表现在减少体重丢失,降低神经功能评分,减轻炎性细胞浸润,减轻轴突损伤及促进其修复,尤以补肾益髓全方更为显著。其作用机制可能与与增强BDNF/TrkB及其信号通路PI3K/AKT表达有关。补肾方的作用与补肾益髓方作用相似,但化痰活血方作用不及前二者。这些结果为补肾益髓方治疗MS提供了部分科学依据。
柳浩然[9]2006年在《神经干细胞移植治疗视神经损伤的实验研究》文中提出视神经损伤(optic nerve injury，ONI)是颅底骨折的常见并发症，也是致盲的重要因素之一，由于视神经是中枢神经系统的一部分，其损伤后的再生能力非常有限，目前临床尚缺乏行之有效的治疗手段，为此寻找促进神经再生和修复的有效方法成为治疗视神经损伤也是现代神经生物领域的热点。近年来，随着对视神经损伤机制的深入研究，其治疗方法逐渐多样化，周围神经、嗅鞘细胞、雪旺细胞移植及神经营养因子注射等已见较多实验研究报道，虽取得了一定进展，但由于来源限制或组织移植物引起免疫排斥反应、疗效持续性短暂等问题，限制了其临床应用。 神经干细胞(neural stem cells，NSCs)移植目前在许多中枢神经系统疾病的治疗研究中显示了其巨大的潜力和优势，其中，干细胞移植治疗脑血管疾病、肌萎缩侧索硬化、帕金森综合征、脊髓损伤、青光眼及缺血引起的视力下降等疾病已取得了可喜的成果，由于NSCs具有不断更新、自我增殖和多向分化潜能等特性，使之成为较为理想的移植细胞源。本课题组在以往几年对NSCs培养和移植的相关研究的基础上，采用玻璃体下腔注射NSCs移植治疗视神经部分损伤的动物模型，观察NSCs在视网膜内的存活、迁移与分化，通过研究NSCs移植后视网膜节细胞的变化及其对视觉电生理的影响，即形态学及功能恢复两个方面来探讨NSCs对ONI的治疗保护作用，并且进一步深入探讨了NSCs对视神经损伤保护功能的机理。由于视神经损伤后神经营养因子的剥夺是导致节细胞凋亡的根本原因之一，而有研究表明NSCs在体外体内均可分泌神经营养因子，那么移植的NSCs是否通过在视网膜内分泌神经营养因子来保护受损视神经呢?本研究对此进行了验证。论文各部分均进行了较为详细的时间分段比较，
孟晓婷[10]2007年在《转hbFGF羊膜上皮细胞与神经干细胞共移植治疗脊髓损伤的研究》文中进行了进一步梳理神经干细胞(NSCs)的应用为脊髓损伤(SCI)治疗带来新的希望,而细胞移植效果与损伤脊髓微环境密切相关。羊膜上皮细胞(AECs)与神经组织细胞具有相似性,可分泌多种神经营养因子(NTFs),其中脑源性NTFs(BDNF)与神经营养素-3(NT-3)是促进神经元存活与分化的主要NTFs。碱性成纤维细胞因子(bFGF)可提高AECs分泌的BDNF、NT3活性,三者的协同作用具有级联放大效应。本研究将分子生物学技术与组织学技术相结合,根据AECs分泌多种细胞因子的特性,利用转基因技术将人bFGF(hbFGF)基因通过携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的逆转录病毒导入大鼠AECs中,改善移植后NSCs的微环境,与NSCs共移植治疗大鼠SCI。应用行为学方法与神经电生理方法检测损伤脊髓功能的恢复;应用组织学技术观察宿主神经元的存活与移植NSCs的分化以及轴突生长、突触形成等。结果表明,转hbFGF的AECs与NSCs共移植明显促进了SCI大鼠后肢功能的恢复:首先AECs与NSCs共同充填损伤后形成的组织空洞,充当细胞桥;其次AECs本身所分泌的NTFs如BDNF、NT-3促进了宿主神经元的存活与突触形成;更重要的是导入的外源基因bFGF增强了AECs的神经营养作用,明显促进了移植NSCs的分化存活,补充了新生神经元,并能促进其轴突生长,重建神经环路,促进损伤脊髓的功能恢复。
参考文献：
[1]. 睫状神经营养因子mRNA在脊髓损伤中的表达及其对脊髓损伤的保护作用的研究[D]. 许斌. 第二军医大学. 2000
[2]. 骨髓基质干细胞及地塞米松治疗大鼠脊髓挫伤的实验研究[D]. 邓莉. 昆明医学院. 2007
[3]. 腺病毒介导的外源性基因在脊髓和周围神经表达及其影响因素的实验研究[D]. 韩久卉. 河北医科大学. 2005
[4]. 白细胞介素1，6及NGF低亲和力受体在大鼠实验性神经元损伤中的表达及其机制的研究[D]. 李月奎. 中国协和医科大学. 1996
[5]. TGF-β_1和PDGF-B在猴中枢神经系统的分布及脊髓半横断损伤后的表达变化[D]. 倪炜. 昆明医学院. 2005
[6]. 胰岛素样生长因子1真核细胞表达质粒的构建及其对神经胶质瘤细胞和大鼠脊髓损伤模型神经细胞凋亡影响的实验研究[D]. 付长峰. 吉林大学. 2006
[7]. 作者索引[J]. 佚名. 第四军医大学学报. 2002
[8]. 补肾益髓方及其拆方对多发性硬化模型小鼠轴突损伤修复和神经营养信号的作用[D]. 师一民. 首都医科大学. 2017
[9]. 神经干细胞移植治疗视神经损伤的实验研究[D]. 柳浩然. 中南大学. 2006
[10]. 转hbFGF羊膜上皮细胞与神经干细胞共移植治疗脊髓损伤的研究[D]. 孟晓婷. 吉林大学. 2007
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