严重烧伤后脑组织AQP4、AQP9的表达及其调控机制研究

严重烧伤后脑组织AQP4、AQP9的表达及其调控机制研究

骆世芳[1]2004年在《严重烧伤后脑组织AQP4、AQP9的表达及其调控机制研究》文中研究指明目的:探讨水通道蛋白-4(AQP4)和水通道蛋白-9(AQP9)在严重烧伤后脑水肿过程中的表达规律,以阐明烧伤后脑水肿的发生机制。 方法:健康成年Wistar大鼠90只,体重250-300g,随机分成两组:即对照组15只和致伤组75只(30%体表面积Ⅲ度烧伤)。致伤组在伤后2h、6h、12h、24h及48h各时间点再分成5小组。每小组各取5只分别用于脑含水量的测定,HE染色进行病理观察,免疫组化检测AQP4、AQP9的表达,原位杂交实验检测AQP4mRNA和AQP9mRNA的表达。实验结果采用图像分析技术分析脑组织AQP4和AQP9及其mRNA的表达水平。 结果:严重烧伤后脑含水量显着增加:烧伤后2h脑含水量开始增加,伤后6h达高峰,48h内仍高于正常水平。HE染色可见其脑细胞有水肿样改变,神经细胞和神经胶质细胞周围间隙以及血管周围间隙增增宽,神经胶质细胞增生,个别神经元出现核浓缩现象。免疫组化结果显示AQP4和AQP9阳性物质在脉络丛、SFO、室管膜、海马、视上核和室旁核等处表达,表现为胞膜着色,胞浆和胞核不着色,烧伤后各时间段其表达较对照组均有显着增加,在伤后6h达高峰。原位杂交显色在胞膜和胞浆,而胞核不显色,其阳性物质分布部位以及出现高峰的时间点与免疫组化结果一致。在整个脑水肿形成过程中,AQP4、AQP9分别与其mRNA的表达呈显着正相关;而且 重庆医科大学硕十学位论文AQP4、AQPg的表达分别与脑含水量的变化也呈高度正相关。 结论:严重烧伤后脑含水量不同程度增加,HE染色显示脑组织有水肿样改变,说明烧伤后有脑水肿出现,其高峰时间在烧伤后6h。免疫组化和原位杂交结果均显示AQP4、AQPg及其mRNA在烧伤后表达增强,其高峰出现时间与脑含水量的高峰时间一致。据上述结果我们推测AQP4、AQPg参与了严重烧伤后脑水肿的形成,在烧伤后脑水肿发生发展过程中起着非常重要的作用。

佚名[2]2007年在《西南叁省一市解剖学会第六届学术会议论文摘要》文中认为VEGF-C和VEGF-R3在腮腺癌中的表达及与淋巴结转移的研究先德海1钟建桥2张西北1常能彬1(1.泸州医学院解剖教研室2.泸州医学院附属医院皮肤科泸州646000)目的研究血管内皮生长因子-C及受体3(VEGF-C、VEGF-R3)在腮腺癌中的表达及

王君[3]2013年在《虎杖苷对大鼠急性脑出血损伤的干预作用研究》文中认为脑出血指非外伤性脑实质内出血,是一种常见的脑血管疾病,严重威胁中老年人的健康。中药治疗脑出血损伤有着独特的疗效。虎杖苷是具有活血化瘀、清热解毒功效的传统中药虎杖中的主要活性成分之一。现代药理学研究显示,虎杖苷具有改善血液流变学、抗血栓的形成、抗氧化、调节一氧化氮、影响离子通道和蛋白激酶等多种活性作用。本研究拟观察虎杖苷对实验性大鼠脑出血损伤的作用以及对大剂量凝血酶致神经细胞损伤的影响,并对其作用机制进行分析和探讨。1.虎杖苷对实验性大鼠脑出血损伤的作用及机制研究本部分实验旨在观察虎杖苷对实验性大鼠脑出血的作用及作用机制。研究采用胶原酶Ⅶ诱导大鼠脑出血建立脑出血模型,分别给予虎杖苷100、50、25mg/kg(2次/d,3d),通过对脑出血大鼠神经功能评分、脑含水量和脑系数的测定、红细胞聚集和变形的检测以及脑组织HE染色来观察虎杖苷对大鼠脑出血后神经功能、脑水肿、血液流变学和病理形态学的影响。通过对脑出血大鼠血清和脑组织SOD活性、MDA含量的检测来观察虎杖苷对大鼠脑出血后氧化性损伤的影响。采用免疫组化法、TUNEL阳性细胞检测法和western-blot法观察虎杖苷对脑出血大鼠血肿周围组织水肿相关蛋白MMP-9、AQP-4和细胞凋亡的影响。结果显示:1.1神经评分结果显示,虎杖苷小剂量(25mg/kg)能显着改善脑出血大鼠的神经损伤(P<0.05);虎杖苷小剂量(25mg/kg)能显着改善脑出血大鼠的脑组织含水量(P<0.05);虎杖苷大、中、小剂量(100、50、25mg/kg)均能显着改善脑出血大鼠红细胞聚集情况(P<0.01或P<0.05),虎杖苷大剂量(100mg/kg)能显着改善脑出血大鼠红细胞变形能力(P<0.05);HE染色后病理形态学显示,虎杖苷大、中、小剂量(100.50.25mg/kg)均能缩小出血面积、修复血肿周围组织、减轻神经细胞肿胀,其中虎杖苷大剂量(100mg/kg)的改善作用最为明显1.2虎杖苷大、中、小剂量(100、50、25mg/kg)均能显着增加脑出血大鼠血清SOD活性、降低MDA含量(P<0.01或P<0.05);虎杖苷大、中、小剂量(100、50、25mg/kg)具有一定的增加脑组织SOD活性、降低MDA含量的作用,但无统计学差异。1.3免疫组化法检测结果显示,虎杖苷大、中、小剂量(100、50、25mg/kg)均能显着降低血肿周围组织MMP-9和AQP-4的表达(P<0.01或P<0.05)。western-blot法检测结果显示,虎杖苷大、中、小剂量(100、50、25mg/kg)均能降低血肿周围组织MMP-9和AQP-4的表达,但无统计学差异。1.4TUNEL阳性细胞检测及免疫组化检测结果显示,虎杖苷大、中、小剂量(100、50、25mg/kg)均能显着降低血肿周围组织凋亡阳性细胞数、凋亡相关蛋白Bax的表达及Bax/Bcl-2值,并显着升高Bcl-2的表达(P<0.01或P<0.05)。western-blot检测结果显示,虎杖苷大、中、小剂量(100、50、25mg/kg)均能降低血肿周围组织凋亡相关蛋白Bax的表达,并升高Bcl-2的表达,但无统计学差异。以上结果表明虎杖苷可能通过抗氧化、改善脑水肿以及抗细胞凋亡来保护脑出血大鼠脑组织损伤。2.虎杖苷对凝血酶诱导原代培养皮层神经细胞损伤的作用本部分实验旨在观察虎杖苷对凝血酶致大鼠原代培养神经细胞损伤的干预作用。研究采用孕16-17d SD大鼠皮层神经元进行原代分散培养。模型组和给药组在培养第6d分别加入终浓度为150U/mL的凝血酶诱导神经细胞损伤,并同时在各给药组分别加入终浓度为15.625、31.25、62.5μmol/L的虎杖苷。给药3d后采用MTT法观察虎杖苷对凝血酶致大鼠原代培养神经细胞损伤的干预作用。结果显示虎杖苷31.25μmol/L剂量组细胞存活率为84.67%,显着高于模型组(P<0.01)。表明虎杖苷具有一定程度的干预凝血酶致神经细胞损伤的作用。综上所述,虎杖苷具有一定的抗实验性脑出血作用,能够通过抗氧化、改善脑水肿、抗细胞凋亡以及保护神经细胞来拮抗脑出血后的脑组织损伤。

参考文献:

[1]. 严重烧伤后脑组织AQP4、AQP9的表达及其调控机制研究[D]. 骆世芳. 重庆医科大学. 2004

[2]. 西南叁省一市解剖学会第六届学术会议论文摘要[J]. 佚名. 四川解剖学杂志. 2007

[3]. 虎杖苷对大鼠急性脑出血损伤的干预作用研究[D]. 王君. 北京中医药大学. 2013

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