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摘要：糕点中的苯甲酸（钠）、山梨酸（钾）和脱氢乙酸（钠）、安赛蜜和糖精钠经水提取，脱脂、沉淀蛋白、离心、过滤后，采用超高效液相色谱法同时测定，样品标准加入平均回收率分别为99.01%~99.36%、99.51%~101.58%、98.90%~99.73%。
关键词：超高效液相；糕点；苯甲酸（钠）；山梨酸（钾）；糖精钠
Simultaneous Determination of Benzoic Acid（Sodium），Sorbic Acid（Potassium），and Saccharin Sodium in Cakes by Ultra Performance Liquid Chromatography
Ruiwen Zhong
（Guangzhou Alchemy Biotechnology Co.，Ltd.，Guangzhou，Guangdong 510760，China）
Abstract：The benzoic acid（sodium），sorbic acid（potassium），dehydroacetic acid（sodium），acesulfame potassium，and sodium saccharin in the cake are extracted with water，delipidated，precipitated protein，centrifuged，and filtered，followed by ultra-high performance liquid chromatography.The average recoveries of the standard samples were 99.01%~99.36%，99.51%~101.58%，and 98.90%~99.73%，respectively.
Key words：Ultra high performance liquid phase；Pastry；Benzoic acid（sodium）；Sorbic acid（potassium）；Sodium saccharin
食品安全是当今关系民生的重大问题，直接关系到广大人民群众的身体健康，而食品的色香味取决于在食品加工过程中使用的适量的食品添加剂。根据国家标准对食品的添加剂定义是：为改善食品品质和色、香、味，以及为防腐、保鲜和加工工艺的需要而加入食品中的人工合成或者天然物质。食品用香料、胶基糖果中基础剂物质、食品工业用加工助剂也包括在内。[1]糕点，作为人们喜爱的食品，其中添加剂主要有苯甲酸（钠）、山梨酸（钾）、糖精钠等。其中苯甲酸（钠）由于其毒性较大，现已有明文规定不得添加进糕点中，山梨酸（钾）与糖精钠也只能限量添加。国内对三类物质的限量检测，多以高效液相色谱法，气相色谱法。本方法探讨了超高效液相法测定上述三种添加剂，相较传统的高效液相色谱法更为简便快速、准确和回收率高。
1.实验部分
1.1仪器试剂
Waters ACQUITY UPLC H-CLASS 超高效液相色谱（四元溶剂管理器、二极管阵列检测器）美国沃特世；AL204电子天平 瑞士梅特勒托利多；涡旋振荡器；高速离心机 安徽中科中佳；超声波发生器 昆山超声仪有限公司。
苯甲酸标准溶液（1.0mg/ml）：中国计量科学研究院研制，GBW（E）100006。山梨酸标准溶液（1.0mg/ml）：中国计量科学研究院研制，GBW（E）100007。糖精钠标准溶液（1.0mg/ml）：中国计量科学研究院研制，GBW（E）100008。氨水溶液（1+99）：取氨水1mL，加到99mL水中，混匀。亚铁氰化钾溶液（92g/L）：称取106g亚铁氰化钾，加入适量水溶解，用水定容至1000mL。乙 酸 锌 溶 液（183g/L）：称 取 220g 乙 酸 锌 溶 于 少 量 水 中，加 入 30 mL 冰 乙 酸，用 水 定 容至1000mL。乙酸铵溶液（20 mmol/L）：称取 1.54g乙酸铵，加入适量水溶解，用水定容至 1000 mL，经0.22μm水相微孔滤膜过滤后备用。
1.2试样制备[2]
准确称取约2g（精确到0.001g）试样于50mL具塞离心管中，加正己烷10mL，于60 ℃水浴加热约5min，并不时轻摇以溶解脂肪，然后加氨水溶液（1+99）25mL，乙醇1mL，涡旋混匀，于50 ℃水浴超声20min，冷却至室温后，加亚铁氰化钾溶液2mL和乙酸锌溶液2mL，混匀，于8000r/min离心5min，弃去有机相，水相转移至50mL容量瓶中，残渣加水20mL，涡旋混匀后超声5min，于8000r/min离心5min，将水相转移到同一50mL容量瓶中，并用水定容至刻度，混匀。取适量上清液过0.22μm 滤膜，待超高效液相色谱测定。
1.3超高效液相色谱条件
色谱柱：WatersACQUITY UPLC BEH C18 1.7µm 2.1x150mm；柱温：30℃；流动相：甲醇+乙酸铵溶液（20 mmol/L）；流速：0.21ml/min，等度洗脱；检测器：二极管整列检测器（PDA）；检测波长：230nm；进样量：1 mL。
1.4标曲配置
配置浓度5、10、25、50、80、100g/ml的苯甲酸、山梨酸、糖精钠混合标准液进样1L，按1.3色谱条件进行检测，三种物质以保留时间和峰面积对浓度分别进行线性回归。
2.结果与讨论
2.1色谱分离效果
图1.混合标准溶液色谱图
Fig.6 Mixed standard solution chromatogram
按1.3的色谱条件对混合标品进样，得到标准溶液色谱图。
2.2方法的线性范围跟检出限
线性：根据1.4操作，三种物质在5~100g/ml浓度范围内线性良好，其线性回归方程见表1。检出限：5.0g空白样品，按1.2操作后进样。依据3倍噪声作为检出限，对照浓度最低标品峰面积，得出近似浓度，配置0.15g/ml的苯甲酸标准溶液，0.10g/ml的山梨酸标准溶液，0.15g/ml的糖精钠标准溶液进样，计算得出该方法苯甲酸、山梨酸、糖精钠检测限见表1。
表1 3种食品添加剂的线性回归方程、相关系数跟检测限
Tab.1 Linear regression equation，correlation coefficient and detection limit of three food additives
2.3方法的精密度
取糕点样品 6 份加入苯甲酸（1 mg/mL）、山梨酸（1 mg/mL）、糖精钠（1 mg/mL）标准溶液各1mL，按上述方法处理上机，平行测定 6 份样品，计算峰面积的相对标准偏差（RSD），苯甲酸、山梨酸和糖精钠峰面积的RSD 分别为 0.47%、0.64%、0.73%。
2.4方法的回收率
取糕点样品 9 份进行回收率测定，按 5.0 g/ml、25g/ml、50g/ml 三个加标水平，按上述方法测定，回收率结果见表 2。
表2 3种添加剂的加标回收
Tab.2 Additive recovery of three additives
2.5样品测定
随机选取市场中16个糕点样品，按1.2方法处理，按1.3色谱条件进行检测。结果显示，其均为检测出苯甲酸，检测出 山梨酸的样品有12个，检测出糖精钠的样品有14个，但其均为超出GB 2760-2014 中的规定，该16份样品均合格。
3.结论
本文所建立的快速检测饮料中的三种食品添加剂的方法操作简便、准确、快速，在 6 min 内完成样品分析，大幅提高了检测效率，适合大批糕点样品同时检测。
参考文献：
[1]GB 2760-2014《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》
[2] GB 5009.28-2016《食品安全国家标准食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定》.
论文作者:钟锐文
论文发表刊物:《基层建设》2018年第14期
论文发表时间:2018/7/9
标签：山梨论文; 溶液论文; 苯甲酸论文; 色谱论文; 样品论文; 高效论文; 糕点论文; 《基层建设》2018年第14期论文;