（深圳市龙岗区人民医院普外科 广东 深圳 518172）
【摘要】 目的：探讨乳腺癌转移抑制基因（BRMS1）在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组化法检测40例结直肠癌组织及癌旁正常组织中BRMS1蛋白的表达，分析其与结直肠癌临床病理参数的相关性。结果：BRMS1在结直肠癌组织中的表达显著低于癌旁正常组织（P<0.01）；结直肠癌组织中BRMS1的表达与淋巴结转移、临床分期密切相关（P<0.05），而与患者性别、年龄、肿瘤大小、部位和分化程度无关（P>0.05）。结论：BRMS1的降低可能参与了结直肠癌的发生，检测BRMS1的表达有助于判断结直肠癌的侵袭转移情况及预后。
【关键词】 结直肠癌；乳腺癌转移抑制基因；表达意义
【中图分类号】R730.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）26-0223-02
肿瘤的浸润与转移是恶性肿瘤的主要生物学特性，是引起恶性肿瘤患者死亡的主要原因之一。乳腺癌转移抑制基因1（BRMS1）是近年来新发现的一种肿瘤转移抑制基因（MSG），研究证明其并不影响肿瘤的形成，而仅仅是抑制肿瘤细胞向远隔部位转移，BRMS1抑制乳腺癌转移的功能已经十分明确。本研究收集40例结直肠癌根治标本，运用免疫组化法，检测BRMS1在结直肠组织中的表达情况，探讨其在结直肠癌发生、发展中的作用。现报告如下。
1.材料与方法
1.1 临床资料
收集2010年3月至2013年9月手术切除并经病理证实为结直肠癌的40例存档石蜡标本，其中，男性27例，女性13例；年龄36至78岁，平均53.3岁；所有患者术前均未行化疗、放疗或靶向治疗；肿瘤部位：结肠癌21例，直肠癌19例；肿瘤大小：≥5cm为12例，<5cm为28例；分化程度：高分化17例，中低分化23例；术后病理分期采用美国癌症联合委员会（AJCC）分期标准：Ⅰ期6例，Ⅱ期16例，Ⅲ期13例，Ⅳ期5例。
1.2 试剂选用
采用上海沪尚生物科技有限公司BRMS1兔抗人多克隆抗体，使用浓度为1:200；采用蓝基生物技术开发公司的DAB显示试剂盒；采用福州迈新生物技术开发公司即用型非生物素免疫组化EliVision TM plus免疫组化检测试剂盒。
1.3 检测方法
每例标本均作4μm厚连续切片2张，1张行HE验色，另1张行BRMS1免疫组化学染色。采用免疫组化检测试剂盒作对照，PBS取代一抗作阴性对照。免疫组化学染色方法按照检测试剂盒说明书，DAB显色，苏木苏复染，中性树脂封片，光镜观察。
1.4 判断标准
BRMS1阳性表达位于胞质内，阳性表达染色均呈淡黄色至棕黄色颗粒，显微镜下见有呈棕黄色细颗粒状染色的细胞为阳性细胞。在高倍镜下(×400)随机选取5个视野，选取染色较为集中的区域进行细胞计数和结果判定，计算阳性细胞占全部计数癌细胞的比率，阳性细胞数<10%为(-)，10%～25%为(+)，25%～50% (++)，>50%为(+++)，+++为强阳性表达。
1.5 统计学方法
采用SPSS18.0统计软件进行统计分析，计量资料以x-±s表示，组间均数比较用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2.结果
2.1 结直肠癌组织中BRMS1 mRNA的表达
研究组结肠癌组中BRMS1 mRNA阳性表达率为32.5%，对照组结肠癌旁正常组织中BRMS1 mRNA阳性表达率为87.5%，组间比较差异具有统计学意义（P<0.01）。见表1。
3.讨论
侵袭转移是导致结直肠癌患者死亡的主要原因，其过程包括肿瘤细胞的移行、扩散、浸润及在转移部位的生长等。在恶性肿瘤的转移过程中，转移抑制基因的作用十分关键，这类基因的表达下降或缺失时，就可能会诱导肿瘤转移的发生。
2000年，Seraj等[1]将BRMS1的cDNA导入转移性的MDA-MB-435细胞中，可以显著抑制肺部转移瘤和淋巴结转移瘤的形成，却不影响乳腺癌细胞的生长。Marnie M.Saunders[2]等的研究指出BRMS1的抑癌转移机理是其影响细胞间的连接蛋白(Connexins,Cxs)的表达变化,Cxs的变化使细胞间缝隙连接交流（gap junctional intercedrllular communication，GJIC）增加，从而达到抑制癌症转移。
近来发现BRMS1不但在乳腺癌的转移方面有抑制作用[3]，对其他肿瘤的转移也有抑制作用。Smith PW[4]等研究表明在非小细胞肺癌中，BRMS1在转移癌中的表达显著下调； Liu Y等研究表明BRMS1可以通过组蛋白乙酰化转移酶P300上的E3转接酶的作用来抑制肺癌细胞的转移。Zhigang Jie等研究发现BRMS1在转移性胃癌组织中的表达水平明显降低，这表明BRMS1可以抑制转移性胃癌细胞的侵袭，但不能阻止胃癌的生长。Slipicevic A等研究表明BRMS1对黑色素瘤的转移有明显的抑制作用；赵晓兰等发现，BRMS1在卵巢癌中表达下调可缺失与卵巢癌的浸润深度和转移密切相关；Cui RX等研究表明，BRMS1在鼻咽癌中的mRNA和蛋白水平显著低于正常的上皮细胞。
本次通过RT-PCR方法对BRMS1 mRNA在结直肠癌组织及癌旁正常组织的表达进行研究。结果表明，研究组结直肠癌组织中的BRMS1 mRNA表达显著低于对照组结直肠癌旁正常组织。结直肠癌组织中的BRMS1 mRNA表达水平与淋巴结转移和临床分期有关，与与患者年龄、性别、肿瘤的大小、解剖部位和分化程度无关。
综上所述，BRMS1不仅在乳腺癌中发挥了肿瘤细胞转移抑制作用，对结直肠癌等恶性肿瘤的转移也有抑制作用，深化对BRMS1基因的研究必将为肿瘤转移的早期诊断、治疗及预后判断提供新的思路。
【参考文献】
[1] M.Jabed Seraj,Rajeev S.Samant,Michael F. Verderame. Functional Evidence for a Novel Human Breast Carcinoma Metastasis Suppressor,BRMS1, Encoded at Chromo-some 11q131.Cancer Res,2000,60:2764-2769.
[2] Saunders M M,Seraj M J,Li Z Y,et al.Breast cancer metastatic potential correla-tes with a breakdown in homospecific and heterospecific gap junctional intercellular communication. Cancer Res,2001,61(5):1765-1767.
[3] 陈思阳,杜林栋.BRMS1 mRNA在膀胱移行细胞癌组织中的表达及临床意义[J].临床泌尿外科杂志,2011,26(6):430-432.
[4] Smith PW,Liu Y,Siefert SA,et al.Breast cancer metastasis suppressor 1(BRMS1) suppresses metastasis and correlates with improved patient survival in non-small cell lung cancer.Cancer Lett,2009,276(2):196-203.
论文作者:钟宏,杨东华,段进粮
论文发表刊物:《医药前沿》2017年9月第26期
论文发表时间:2017/9/13
标签：抑制论文; 组织论文; 肿瘤论文; 细胞论文; 结直肠癌论文; 阳性论文; 乳腺癌论文; 《医药前沿》2017年9月第26期论文;