（贵州医科大学 贵州 贵阳 550025）
【摘要】 目的：观察舒肝宁注射液是否具有溶血作用及过敏反应，为临床安全用药提供实验依据。方法：采用体外溶血试验观察舒肝宁注射液有无溶血或红细胞凝集作用；采用全身主动过敏试验观察舒肝宁注射液是否存在过敏性。结果：体外溶血试验未见红细胞有溶解或凝集现象；全身主动过敏试验中豚鼠的过敏反应级数为0级。结论：舒肝宁注射液无溶血作用及明显的过敏性。
【关键词】 舒肝宁注射液；溶血性；过敏性
【中图分类号】R55 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）25-0157-03
舒肝宁注射液是复方中药注射剂，主要成分为茵陈提取物、栀子提取物、黄芩苷、板蓝根提取物、灵芝提取物，具有清热解毒，利湿退黄，益气扶正，保肝护肝之功效。舒肝宁注射液的临床应用广泛，常用于治疗慢性乙型肝炎、戊型肝炎、急性黄疸型病毒性肝炎、慢性乙型肝炎高胆红素血症、肝功能损害、药物性肝病、脂肪肝、肝内胆汁淤积症肝炎、急性梗阻性化脓性胆管炎、急性黄疸型甲型肝炎等肝病[1]。本课题采用体外溶血实验及豚鼠全身主动过敏实验对舒肝宁注射液的溶血作用及过敏性进行了观察，为其临床安全使用提供实验依据。
1.材料
1.1 受试药物
舒肝宁注射液：贵州瑞和制药有限公司提供，批号20140402，规格2ml/支。临床用法为：取舒肝宁注射液10～20ml，以5～10%葡萄糖液250～500ml稀释后静脉缓慢滴注。
1.2 实验动物
日本大耳兔，♂，一级实验动物，体重2.15kg；白色豚鼠，♀、♂各半，一级实验动物，重体203.33±13.96g，合格证号：SCXK( 黔)2002-0001，均由贵阳医学院实验动物中心提供。
2.方法
2.1 溶血性试验
取家兔1只，经心脏取血20ml，置三角烧瓶中。立即旋转摇动三角烧瓶，使瓶中内置的玻珠裹尽纤维蛋白。将去掉纤维蛋白的血浆移至刻度离心管中，2500rpm，离心5min。吸去血清，加入生理盐水10ml混匀，再次以2500rpm离心5min，清洗血细胞，反复洗涤4次至上清液无色透明。用生理盐水将红细胞按其容积配成2%的混悬液。取21支10ml试管编为7组，每组3支试管，依次排列于试管架上。各组试管按表1加入各种溶液。第6组不加供试品作为空白对照，第7组也不加供试品并用蒸馏水代替生理盐水，作为溶血的阳性对照。将各管轻轻摇匀，37℃水浴1h。取出后，按表2内容观察并记录结果：以“+++”表示溶血，以“++”表示部分溶血，以“+”表示凝集，以“－”表示不溶血、并且无凝集现象。
2.2 豚鼠全身主动过敏性试验
取健康白色豚鼠36只，重体203.33±13.96g，雌雄各半。均衡随机分为对照组、阳性对照组和舒肝宁注射液3个组，每组12只。对照组腹腔注射生理盐水，阳性对照组腹腔注射5%蛋清生理盐，舒肝宁注射液组腹腔注射舒肝宁注射液，注射量均为0.5ml?100g-1，隔日一次，共注射三次，以进行致敏。于首次注射后14d每组各取6只动物（♀、♂各3只），足趾静脉注射各自药物2ml进行攻击，观察注射后动物有无抓鼻、竖毛、呼吸困难、痉挛、休克、大小便失禁、死亡等反应，并按表3进行评分。余下的另一半动物于首次给药后第21d同法进行攻击、观察，评分。攻击给药后动物继续饲养3d，观察其反应及存活情况。如反应级数达2级及2级以上，则认为过敏试验不合格。
3.结果
3.1 溶血性试验
阳性对照组（第7组）3管全部均为红色澄明，镜下观察见大量红细胞碎片，未见完整红细胞，明显溶血。第1至第6组所有各管红细胞下沉，第6组3管上清液均为无色透明；第1至第5组各管上清液呈舒肝宁注射液的浅橙色，清澈透明，并因舒肝宁注射液用量的增多而渐次加深，经与相同浓度的舒肝宁注射液生理盐水稀释液比较，无差异。管底及管壁均无红细胞凝集，轻轻振摇试管，下沉红细胞立即浮起，均匀混悬，取管底细胞镜检也未见有红细胞膨胀、绉缩、相互粘附等异常，表明在试验剂量范围内舒肝宁注射液各剂量均无溶血或红细胞凝集现象。见表4。
3.2 全身过敏试验
阳性组动物无论在第14d或21d，均于iv5%蛋清后5～11s内出现抓鼻，20s内出现竖毛，呼吸困难，65～85s内出现倒地、抽搐，120s内出现小便失禁，动物多于3～4min内死亡，反应级数为4级。而对照组和舒肝宁注射液组，所有动物无论在第14d或第21d的攻击后密切观察30min以上，均未见抓鼻、颤抖、竖毛、咳嗽、呼吸异常、痉挛、抽搐、大小便异常、休克等反应，反应级数均为零级。此后继续饲养动物3d，未见异常，动物全部健康存活，见表5。
4.讨论
中药注射剂是对传统中医药剂型的传承和发展，具有重要的临床价值和不可替代性[2]，但近年来随着中药注射剂在临床的广泛使用，不良反应的报道也在逐渐增加，中药注射剂的安全问题应该倍受关注。本实验观察了舒肝宁注射液的溶血性及过敏性，为舒肝宁注射液的临床安全应用提供实验依据。
药物制剂引起的溶血反应包括免疫性溶血与非免疫性溶血。有些药物由于含有溶血性成分或物理、化学、生物等方面的原因，在直接注射入血管后可产生溶血现象；有些药物注入血管后可产生血细胞凝聚，引起血液循环功能的障碍等。凡是注射剂和可能引起免疫性溶血或非免疫性溶血的药物制剂，均应进行溶血性实验。本研究采用溶血性实验常规的体外试管法观察了舒肝宁注射液在3h内的反应情况，结果显示，在试验剂量范围内舒肝宁注射液各剂量均未见溶血或红细胞凝集现象，表明舒肝宁注射液无溶血或红细胞凝集作用。
中药引起的不良反应中过敏反应高居首位，Ⅰ型过敏反应是中药注射剂在临床上最常引起的一类[3]，在国家食品药品监督管理局颁布的《中药、天然药物免疫毒性(过敏性、光过敏反应)研究的技术指导原则》[4]中，考察I型过敏反应最常见的方法为豚鼠全身主动过敏试验，目前普遍认为，该方法具有操作相对简单、敏感性好、结果稳定和可重复性高等特点[5]。本研究采用豚鼠全身主动过观察了舒肝宁注射液的过敏性，结果显示，在第14天及第21天对豚鼠进行过敏激发后，所有动物均未出现过敏反应，表明舒肝宁注射液无明显的致密性。
5.小结
综上所述，舒肝宁注射液无溶血或红细胞凝集作用，无明显的致密性。预见其临床应用应是相对安全的。但必须指出，不少药物包括中药注射剂，在动物过敏试验中未发现其有致敏性，但在大规模的临床应用中会有个别病人出现不同程度的过敏反应，故在临床应用中注意收集相关情报，以求对舒肝宁注射液有更全面、深入的了解，以此能更好地服务于患者。
【参考文献】
[1]关妮.舒肝宁注射液临床应用进展[J].医学理论与实践，2014 27（10）：1291-1292.
[2]李江,刘治中,王丽霞等.临床安全使用中药注射剂应注意的几个方面[J]. 中国中医基础医学杂志,2014, 20(7):982-984.
[3]孙立娟.中药注射剂的过敏反应[J].中国现代药物应用, 2011, 5 (21):65-66.
[4]国家食品药品监督管理局．中药、天然药物免疫毒性(过敏性、光过敏反应)研究的技术指导原则[J].指导原则编号：CPT5-1．2005:1-20．
[5]翁谢川,樊星,王青秀.药物安全性评价中豚鼠全身过敏试验方法的研究[J]. 中国比较医学杂志,2012，22(5):51-54.
论文作者:张金娟,刘伟,兰金芝,熊英,吴宁
论文发表刊物:《医药前沿》2016年9月第25期
论文发表时间:2016/9/7
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