王红平 赵璐 杨雯
（四川省食品药品检验检测院安全评价中心 四川 成都 611731）
【摘要】目的：通过SD大鼠连续3个月经口灌服三个不同剂量的金芪片，并经1个月停药恢复期，观察该药对大鼠血液生化学的影响。方法：取120只雌性SD大鼠按体重随机分为4组，30只/组，连续三个月灌服金芪片1.375、3.3和8.25g生药粉/kg·bw三个剂量和溶媒对照组（蒸馏水），连续13周，恢复4周。分别于给药末期和恢复期进行血液生化学检查。结果：给药末期，高剂量组碱性磷酸酶降低；低、中、高剂量组丙氨酸氨基转移酶降低；中剂量组肌酐降低；高剂量组血糖升高；高剂量组钾离子浓度升高；中、高剂量组钠离子浓度升高。恢复期，高剂量组天门冬氨酸氨基转移酶降低；中、高剂量组肌酸激酶降低；中、高剂量组血糖升高；高剂量组钾离子浓度降低。结论：血液生化学指标的变化与本实验室背景数据相符，结合其他指标及组织病理学结果综合分析无毒理学意义，金芪片低剂量1.375g生药粉/kg·bw为安全剂量。
【关键词】经口灌服；剂量；金芪片；大鼠；血液生化学
【中图分类号】R285.5
【文献标识码】A
【文章编号】2095-1752（2018）14-0065-02
金芪片是由成都复兴医院研制提供的院内制剂，主药为黄芪、白茅根等，具有清热解毒，凉血止血，托毒排脓功效，用于治疗乳腺癌、子宫癌等妇科肿瘤。本研究具体分析经口灌服不同剂量金芪片对大鼠血液生化学的影响，寻找临床安全剂量。
1.材料及方法
1.1 实验动物
雌性SD大鼠120只，SPF级，购入时体重为80～100g。实验动物生产许可证号：SCXK（渝）2012-0005，实验动物质量合格证号：NO.0000055，由第三军医大学第三附属医院野战外科研究所实验动物中心提供。
1.2 实验仪器
仪器：COBAS INTEGRA 400 Plus型全自动生化分析仪，瑞士Roche公司；。
试剂：主要为血液生化学试剂，均购自德国罗氏诊断有限公司。
1.3 方法
1.3.1剂量确定[1] 高剂量组：通过SD大鼠经口灌服金芪片14天多次给药毒性实验预试实验结果：最大给药量8.25g生药粉/kg·bw无动物死亡，未见明显毒性反应。因此将8.25g生药粉/kg·bw，设为高剂量，相当于41.25倍人用剂量。
低剂量组：金芪片的临床用量为成人（按60kg体重计）6片/次×4次/日，相当于0.2g生药粉/kg·bw/日，折算成大鼠的等效剂量为1.26g生药粉/kg.bw/日。为了便于配制药液，分析药物的剂量与毒性关系，因此将低剂量设为1.375g生药粉/kg·bw（是高剂量的1/6）。
中剂量组：中剂量设计选择在1.375g生药粉/kg·bw和8.25g生药粉/kg·bw之间，为了便于配制药液，分析药物的剂量与毒性关系，中剂量设为高剂量的1/2.5,低剂量的2.4倍，为3.3g生药/kg·bw。
另外设置溶媒对照组（蒸馏水）。
1.3.2分组给药[2] 大鼠经适应性饲养并检疫后，按体重随机均分成4组，连续经口灌胃给药3个月（按13周计），给药容积15ml/kg·bw，每周连续给药6天每天1次，星期天停药1天。连续给药13周后停药恢复1个月（按4周计）。
1.4 观察指标
在给药末期13周和恢复期17周各测一次血液生化学指标，检测项目包括：白蛋白(ALB)、碱性磷酸酶(ALP)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酸激酶(CK)、肌酐(CREA)、尿素氮(BUN)、总胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、总胆红素(TBIL)、总蛋白(TP)、血糖(GLU)、钾离子浓度(K+)、钠离子浓度(Na+)和氯离子浓度(Cl-)。
1.5 统计方法[3]
用SPSS16.0软件对各项检查的数据进行统计，数据以均数±标准差（x-±s）表示。血液生化指标按计量资料统计，首先选用SPSS16.0软件下的Decriptives统计数据，计算其均值、标准差、标准误、均值95%的可信区间、最大值和最小值；其次采用单因素方差分析，方差齐者，采用LSD多重比较检验；方差不齐者，采用Tamhane T2多重比较检验。
2.结果
2.1 给药末期血液生化学水平
表1、表2结果显示：给药末期，与对照组比较，高剂量组ALP降低（P＜0.05）；低、中、高剂量组ALT降低（P＜0.05、P＜0.01、P＜0.01）；中剂量组CREA降低（P＜0.05）；高剂量组Glu升高（P＜0.01）；高剂量组K+浓度升高（P＜0.01）；中、高剂量组Na+浓度升高（P＜0.01）。
2.2 恢复期血液生化学水平
表3、表4结果显示，恢复期，与对照组比较，高剂量组AST降低（P＜0.01）；中、高剂量组CK降低（P＜0.05）、Glu升高（P＜0.05）；高剂量组K+浓度降低（P＜0.01）。
3.讨论
金芪片对大鼠长期毒性血液生化学检验结果显示及分析，未见受试物的血液生化学方面的毒性反应。低、中、高三个剂量组给药末期以及恢复期的血液生化学检测值，与对照组比较，虽然部分结果显示有统计学意义，但是，除血糖指标外，涉及到肝功能的指标ALP和ALT在给药末期均为显著降低，恢复期恢复正常；涉及到肾脏功能的指标肌酐，在给药末期中剂量组低于对照组，而恢复期均有所恢复，病理检查也未见肝脏和肾脏有病变发生，且以上数据均在本实验室背景数据范围内波动，其降低不具有毒理学意义，故该样品对SD大鼠肝肾功能无明显影响[4-7]。血糖在给药末期高剂量组显著高于对照组，恢复期中、高剂量组血糖都有所降低但相对于对照组仍偏高，提示在临床用药时需关注患者血糖变化。
综上所述，在本试验条件下，大鼠连续3个月灌服金芪片1.375、3.3和8.25g生药粉/kg·bw三个剂量（分别为人临床日用剂量的6.875、16.5、41.25倍），无动物死亡，未见严重的毒性反应，低剂量组，即1.375g生药粉/kg·bw为安全剂量。
【参考文献】
[1]中药、天然药物长期毒性研究技术指导原则（[Z]GPT3-1）.国家食品药品监督管理局,2005.
[2]国家食品药品监督管理局.药物非临床研究质量管理规范[J].中国医药导刊,2003,5(5):364-366.
[3]王红平,武志强,曾统英,等.苏萸痛风胶囊重复给药毒性试验研究——对SD大鼠肝脏的影响[J].四川生理科学杂志,2017,39(2):59-62.
[4]蔡铁全,李雪梅,胡宇驰,等.灵芝孢子胶囊大鼠重复给药26周长期毒性试验[J].毒理学杂志,2017,31(5):410-413.
[5]尚红.全国临床检验操作规程[M]（第4版）.北京:人民卫生出版社,2015.
[6]府伟灵.临床生物化学检验[M]（第5版）.北京:人民卫生出版社,2015.
[7]夏兆飞.兽医临床病理学[M].北京:中国农业大学出版社,2014.
论文作者:王红平,赵璐,杨雯
论文发表刊物:《医药前沿》2018年5月第14期
论文发表时间:2018/5/9
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