（1暨南大学药学院 中药及天然药物研究所 广州 510632；
2暨南大学理工学院 食品科学与工程系 广州 510632；3 深圳凯联健康科技有限公司 深圳 518000）
摘要：将龟仙茶水煮提取液浓缩并配制成不同浓度的龟仙茶（GCX）溶液，以研究其对糖尿病模型小鼠降血糖的功能；在本次实验中共分5个实验组：空白对照组、糖尿病对照组、GXC低剂量组、GXC中剂量组、GXC高剂量组。采用灌胃给药，空白对照组和糖尿病对照组采用灌胃同等体积的蒸馏水。糖尿病实验小鼠为用四氧嘧啶诱发糖尿病造模后合格的小鼠，并观测其体重与血糖的变化情况。实验结果表明：GXC具有促进糖尿病小鼠体重增加的功效，但无显著性差异。GXC可较好的降低糖尿病小鼠的血糖值，高剂量GXC（400 mg/kg）比低剂量的GXC（100 mg/kg）降血糖效果更有优势，且降糖效果具有剂量依赖性。
关键词：龟仙茶；降血糖，小鼠
糖尿病是一种严重危害人类健康的疾病，全世界的糖尿病患者已超过4.5亿[1]。而随着经济的发展和人们饮食结构的改变，以及人口的老龄化，糖尿病患者的数量急剧增加，预计到2020年糖尿病患者可能达到2.3亿，居世界首位[2]。糖尿病病程长，又易诱发多种急、慢性并发症，给患者的身心健康带来了巨大的威胁[3-4]。当前临床上常用的口服降血糖药虽然在降血糖方面有一定的效果，但多存在一定的副作用[5]。因此，寻找高效、无毒副作用的天然降糖因子已成为当前的迫切需要。
1 材 料
1.1 试剂和仪器
四氧嘧啶 Sigma 公司；格列本脲片（天津市力生制药厂）；葡萄糖测定试剂盒（碧云天生物技术有限公司）；UV755B紫外可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司分析仪器总厂）。
1.2 动物
NIH雄鼠（18~22 g）购于广东省实验动物中心，许可证号：SCJN-（粤）2016-0733，实验前自然光照、自由饮水、常规饲养。
2 方法和结果
2.1 龟仙茶浸膏样品制备
龟仙茶提取液（GXC）：龟仙茶（石金钱龟、人参、枸杞、红茶）水煮，浓缩成每1mL含1.5 g茶浸提物的浓缩液，4℃保存备用，使用时用蒸馏水配制成所需不同浓度。
2.2 糖尿病小鼠造模及降血糖作用
2.2.1 糖尿病小鼠造模
小鼠禁食22 h，四氧嘧啶50 mg/kg尾静脉注射，观察小鼠出现典型的“三多一少”（多饮、多食、多尿、体重减轻）糖尿病症状后，断尾取血，用葡萄糖-过氧化物酶测定血糖值，取血糖值≥ 18.0 mmol/L的小鼠作为实验小鼠[9]。
2.2.2 龟仙茶对糖尿病小鼠的降血糖作用
将已经确定为糖尿病的小鼠分为5组；各组均常规饲养，自然光照，自由饮水。除阴性组外其它各组进行如下处理：空白对照组，将糖尿病小鼠按血糖和体重随机分为糖尿病对照组以及低、中、高剂量实验组。实验组分别给予100、200及400 mg/kg体重剂量的GXC提取液。每只小鼠每天以GXC提取液配制成相应浓度的溶液1 mL进行灌胃。空白对照组和糖尿病对照组给予等体积的蒸馏水灌胃[10]。血糖测定：血糖测定分3个阶段，建模前给予实验各小鼠测定空腹血糖值并记录；建模成功后给予符合要求的50只糖尿病小鼠测定空腹血糖值并记录；于实验周期的末期测定所有参与实验的小鼠的空腹血糖值并记录。连续实验10 d，断尾取血以葡萄糖氧化酶法测定血糖值。比较各组降血糖效果，对各实验组数据进行 t 检验。
从表1可知，实验开始时，空白对照组、糖尿病糖尿病对照组、低、中、高剂量组的空腹血糖均无显著性差异（P<0.05）。实验期间，空白对照组小鼠空腹的血糖值基本维持在较统一的水平上，与造模后及实验末期的血糖值相比，并无显著性差异（P<0.05）。糖尿病（DM）对照组小鼠，其血糖值在造模后变化幅度大，升高了223.6%，一直到实验末期其血糖值仍处于较高的水平。糖尿病灌胃的低、中、高剂量组，与糖尿病对照组相似，其血糖值在造模后变化明显，分别升高了226.8%、228.3%、226.2%。组内的造模后及实验末期小鼠血糖值与造模前呈现出显著性差异。
在造模成功后的几天中，由于每天都定时、定量的灌胃GXC溶液，三组不同剂量组小鼠的血糖值随着实验的进行其高血糖症状逐渐缓解，虽然直到实验结束，其血糖值仍超过造模前的血糖值，但实验组小鼠血糖值仍呈现出下降的趋势。这表明GXC具有降低糖尿病小鼠血糖值的功效。纵观整个实验，在实验末期小鼠的血糖值与造模前小鼠的血糖值比较，差异显著（P<0.05）。而各处理组之间，在造模前各组小鼠的血糖值均无显著性差异，而在造模后得5组之间，只有空白对照组小鼠的血糖值保持在造模前的水平。而其余4组，小鼠的血糖值都表现出较大程度的升高。糖尿病对照组小鼠的血糖值一直维持在较高的水平下，且未出现下降的趋势，即使到了实验末期其血糖值仍处于较高的水平。其它注射不同浓度的GXC配制液的3组实验小鼠，随着实验的进行，其组内小鼠的血糖值均表现出下降的趋势。且三组小鼠的血糖值与空白对照组比较，皆呈现出显著性差异（P<0.05）。在实验末期，灌胃GXC配制液的3组糖尿病小鼠的血糖值，与实验开始造模时相比，均有显著的下降，低、中、高剂量组其血糖值下降幅度达27.91%、30.08%、40.71%，三组糖尿病小鼠的血糖值在实验末期比较，均呈现出显著性差异（P<0.05）。
3 结论
实验通过灌胃GXC提取浓缩液配制溶液，对糖尿病小鼠体重的研究表明，作用效果在实验末期体重变化与造模后体重变化比较，其差别无显著性意义。对糖尿病模型小鼠血糖值变化的研究表明，GXC能很好的降低由四氧嘧啶诱发的高血糖小鼠的血糖值。在实验末期小鼠血糖值变化与造模后小鼠血糖值变化比较，其差别具有显著性差异（P<0.05）。GXC高剂量组的降血糖效果与低剂量组相比，具有相对较明显的优势，且在统计学上比较有显著性（P<0.05）。与临床常规所用的西药相比，GXC具有稳定的性质、无毒副作用以及作用时间持久等优点。可成为一些轻度糖尿病或糖耐量低的患者的饮食疗法的一部分，在辅助降血糖方面应用前景良好。
参考文献：
[1] 李俊燕，谭英姿，冯国鄞等.糖尿病肾病遗传学研究进展 [J].遗传，2012，34（12）：1537-1544.
[2] Qian HuJiong Chen，Chao Jiang，Heng-Fang Liu.Effect of peroxi some proliferator activated receptor gamma agonist on heart of rabbits with acute myocardial ischemia/reperfusion injury.[J].Asian Pacific journal of tropical medicine 2014；7（4）：271-275.
[3] 陈灏珠.实用内科学 [M].北京：人民卫生出版社，2004.
[4] 王露，王薇，杨咪咪等.血清SOD、MDA、NO在波动性高血糖糖尿病大鼠中的表达 [J].中国医科大学学报，2014，43（9）：806-808.
[5] 沈烨渠，沈渠深，张秋子.氧化应激与糖尿病血管并发症的关系 [J].中国糖尿病杂志，2014，22（9）：856-858.
[6] 白桂芹，成军，张树林等.谷肽甘肽过氧化物酶与肝炎病毒蛋白关系的研究进展 [J].胃肠病学和肝病学杂志，2004，13（1）：82-84.
[7] 王伟华，韩占江.茶多糖的提取纯化及其药理作用的研究进展 [J].广东微量元素科学，2007，14（12）：8-13.
[8] 汪东风，谢晓凤，王泽农等.粗老茶中的多糖含量及其保健作用 [J].茶叶科学，1994，14（1）：73-74.
[9] 邹盛勤.茶叶的药用成分、药理作用及应用研究进展 [J].中国茶叶加工，2004（3）：35-37.
[10] 刘冠璋，董婉茹，于卉等.玄参水提物对CCL-4所致大鼠急性肝损伤的保护作用研究 [J].吉林中医药，2015，10（5）：504-507.
论文作者:刘杰1,邱瑞霞2,单凯3
论文发表刊物:《健康世界》2016年第20期
论文发表时间:2016/11/14
标签：小鼠论文; 糖尿病论文; 血糖值论文; 对照组论文; 剂量论文; 实验组论文; 降血糖论文; 《健康世界》2016年第20期论文;