[摘要]目的 探究应用环介导等温扩增技术诊断菌阴性肺结核的临床价值。方法 选取我院2017年1月至2017年12月期间收治的120例疑似菌阴性肺结核患者作为研究对象。对所有患者留取痰标本（357份），应用直接涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法、TB-LAMP等温扩增法进行检测，并根据敏感性及特异性进行临床统计分析及随访观察。结果 在检测的357例痰标本中，直接涂片抗酸染色法检出阳性标本75份，阳性率21.01%（75/357）；培养检出阳性标本98份，阳性率27.45%（98/357）；LAMP检出阳性标本96份，阳性率26.89%（96/357）。以改良罗氏培养基培养法检测结果为标准，涂片法灵敏度为72.45%（71/98），特异性为97.9%；LAMP灵敏度为92.86%（91/98），特异性为98.2%，P<0.05，差异有统计学意义。结论 LAMP在诊断菌阴性肺结核患者时灵敏度、特异性均较高，具有较高的菌阴性肺结核诊断价值，值得临床大力推广及应用。
[关键词]环介导；血液透析；护理干预
[ 中图分类号 ]R2[ 文献标号 ]A[ 文章编号 ]2095-7165（2018）18-0086-01
肺结核是由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，严重威胁着人类健康。肺结核具有较强的空气传播性，因此早诊断对于治疗、预后及预防具有重要价值[1]。临床在诊断肺结核上多以固体培养法、液体培养法为主，但周期较长，不够简便、快速，敏感度也不高[2]。随着新型分子诊断技术水平的逐渐提高，环介导（TB-LAMP）等温扩增技术受到了临床的高度重视。世界卫生组织推荐认为，TB-LAMP检测系统可代替传统痰涂片，用于快速诊断疑似结核患者，且准确率更高[3]。为了进一步探究TB-LAMP检测技术在结核病诊断中的临床应用价值，本文笔者对我院2017年1月至2017年12月期间收治的120例菌阴性肺结核患者采用TB-LAMP检测进行了研究，现将结果报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取我院2017年1月至2017年12月期间收治的120例疑似菌阴性肺结核患者作为研究对象。其中，男性患者64例，女性患者56例，年龄20至80岁，平均年龄（43.56±4.85）岁。本研究方案已经我院伦理委员会批准，且研究对象均已签署知情同意书。
1.2 方法
1.2.1 LAMP检测[4] （1）采集痰液：吸取痰液60μl放入吸附剂试管中，充分混匀并加热裂解90℃，5min。（2）DNA提取：将吸附试管装到样本处理管上，摇晃几次后得到初提的核酸，在样本处理管上加上滴注盖，轻压样本处理管将样本滴入到反应管中。
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1.2.2 改良罗氏培养基培养法[5] 取约2ml痰标本置入消化管内，注入经高压处理的4%氢氧化钠溶液，于振荡器上振荡15min，改接种改良酸性罗氏培养基内，温度保持在36℃左右，3d后查看培养基污染情况，若未有污染，则从第1周起监测、记录细菌生长情况，至菌落生长即可确定为阳性，若至第8周未有菌落长处，则为阴性。
1.3 观察指标
根据不同检测方法，对患者检测结果的敏感性及特异性进行临床统计分析及随访观察。
1.4 统计学方法
采用SPSS16.0统计学软件分析所有数据，用（）来表示计量资料，采用t检验比较计量资料，采用χ2检验比较组间率，P<0.05，差异有统计学意义。
2 结果
2.1 检测结果
120例疑似菌阴性肺结核患者标本共357份痰标本，直接涂片抗酸染色法检出阳性标本75份，阳性率21.01%（75/357）；培养检出阳性标本98份，阳性率27.45%（98/357）；LAMP检出阳性标本96份，阳性率26.89%（96/357）。LAMP法阳性率与直接涂片染色法相比，P<0.05，差异有统计学意义。LAMP法与改良酸性罗氏培养基培养法相比，P＞0.05，差异无统计学意义。直接涂片染色法与改良酸性罗氏培养基培养法相比，P<0.05，差异有统计学意义。
2.2 LAMP与涂片法检测结果对比
357份标本中，有98份结核杆菌标本，其中LAMP法检出91份，直接涂片染色法检出71份；改良酸性罗氏培养基培养法鉴定为非结核杆菌标本中，LAMP法检出5份，直接涂片染色法检出4份。以改良罗氏培养基培养法检测结果为标准，涂片法灵敏度为72.45%（71/98），特异性为97.9%，阳性预测值为94.67%；LAMP灵敏度为92.86%（91/98），特异性为98.2%，阳性预测值为94.79%，P<0.05，差异有统计学意义。
3 讨论
与传统的涂片和培养法相比，结核分枝杆菌复合群核酸快速诊断系统（TB-LAMP）具有反应时间短、特异性高、不易受干扰物影响、结果可直接通过肉眼观察判定、高通量检测等优势，尤其是样本检测量大于20 个/天时，无需复杂精密的仪器和必要的生物安全设备，在现有的条件下即可有效提高结核病的检出效率。
综上所述，LAMP在诊断菌阴性肺结核患者时灵敏度、特异性均较高，具有较高的菌阴性肺结核诊断价值，值得临床大力推广及应用。
参考文献
[1]刘洋;郭艳玲;姜广路;孙琦;郑素华;张宗德.不同靶点环介导等温扩增技术对结核分枝杆菌检测的比较研究[J].中国防痨杂志,2015,37(8):843-847.
[2]陶峰;顾超;张齐.环介导等温扩增技术联合结核分枝杆菌快速培养在涂阴肺结核中的诊断价值[J].中国现代医生,2017,55(5):19-22.
[3]刘洋;郭艳玲;杨丽梅;班武娟;孙琦;张宗德.环介导等温扩增技术检测肺结核患者感染铜绿假单胞菌的临床应用研究[J].中华临床医师杂志(电子版),2016,10(12):1723-1726.
[4].环介导等温扩增技术检测痰样结核分枝杆菌临床价值评价[J].李金莉;王峰;彭毅;洪创跃;杨应周.
[5]欧喜超;夏辉;李强;逄宇;赵冰;张治英;李俊晨;赵雁林.快速核酸提取环介导等温扩增检测技术在肺结核诊断中的应用评价[J].中国防痨杂志,2016,38(5):393-397.
论文作者:王艳红 张志学 于凤翥
论文发表刊物: 《医师在线》2018年9月18期
论文发表时间:2019/3/14
标签：肺结核论文; 涂片论文; 标本论文; 检出论文; 阴性论文; 培养基论文; 阳性论文; 《医师在线》2018年9月18期论文;