（1.湖南中医药大学第一附属医院疼痛理疗科；
2.湖南中医药大学第一附属医院神经内科；3.湖南中医药大学第一附属医院疼痛理疗科）
摘要：目的 观察改良药熨法对神经根型颈椎SPF级日本大耳兔中ICAM-1和TNF-α的影响。方法 将50只SPF级日本大耳兔随机分为正常对照组、假手术对照组、模型组、实验组、实验对照组，观察兔血浆中ICAM-1和TNF-α含量。结果 实验组大耳兔血浆中ICAM-1和TNF-α含量均低于模型对照组，比较有显著差异（P<0．01、P<0．05）。结论 改良药熨法可抑制兔子体内炎症因子的释放，从而发挥对颈椎病的防治作用。
关键词：神经根型颈椎病；改良药熨法；ICAM-1；TNF-α
随着我国经济的高速发展，人民生活水平不断提高，颈椎病发病率呈逐年上升的趋势。其中，神经根型颈椎病在各型颈椎病中发病率最高，约占60～70%，是临床上最常见的类型[1、2]。本研究利用神经根型颈椎病模型，通过观察血浆中ICAM-1和TNF-α含量，探讨改良药熨法对改善神经根型颈椎病临床症状的作用机制。
1资料与方法
1.1一般资料
实验动物：SPF级日本大耳兔50只，6月龄，体重2.5～3kg，雌雄各半，购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司，由湖南中医药大学实验动物中心提供。（合格证号：0076523）。
动物分组：将兔随机分为正常对照组、假手术对照组、模型组、实验组、实验对照组。
1.2造模方法
先用脱毛剂将新西兰大白兔右侧自枕后及颈部的体毛脱掉，给兔左侧颈3至颈5椎体处消毒，抽取消痔灵1Oml注射于兔左侧C3～Cs颈椎横突侧面，进针以感觉到横突边缘骨头为准，回抽针栓无血，然后推注消痔灵。将消痔灵注射液约10ml注射于家兔第3～5颈推右侧横突侧面，并于第2周、第4周第 1天各重复1次。
1.3实验药物及给药途径
自制活血散基本组方：羌活30g、小茴香20g、血竭30g、香附30g、木香15g、肉桂30g、木瓜30g、制川乌7g、延胡80g、白芷50g、川芎30g、干姜40g、当归50g、乳香30g、没药30g、制附片30g、续断30g、厚朴20g、自然铜30g、薄荷脑1g，中药饮片来自湖南中医药大学第一附属医院中药房。将自制活血散碾成细末，然后选用250ml香油调匀如厚糊状。
给药方法 各治疗组均从造模后第2周开始治疗a.正常对照组：生理盐水 1 0 ml?kg-1.d-1，用生理盐水浸纱布敷贴于背部，每天1 次，共10天。b.假手术组、模型组：用生理盐水浸纱布敷贴于背部，每天1 次，共10天。c. 实验组：在兔背部由颈根部起，作6cm×6cm的剃毛，将自制活血散取1.5g敷成5cm×5cm大小，厚度为0.5mm，贴于兔颈部，用胶布固定，并用TDP治疗仪均匀加热30分钟，每天1 次，共10天。d.对照组：方法同实验组，每天1 次，共10天。
1.4实验所用主要试剂及设备
消痔灵注射液，由吉林省集安益盛药业股份有限公司生（国药准字Z22026175。批号：0704152）。TNF-a、SP、NPY、RPELISA检测试剂盒均购自武汉华美生物工程有限公司。
1.5观察指标
（1）模兔局部红外热像检查热图变化
模兔剔除全身体毛，全身麻醉后固定，分别在治疗前、治疗后观察在红外热像图下热图的变化。
（2）各实验指标的测定：按照试剂盒说明步骤进行检测。
①CAM-1表达水平的测定：利用流式细胞术检测。经实验动物心脏取血，（EDTA 抗凝）；标本马上送实验室，加样前摇匀；每个血样标本分别取100UL全血置12×75mm 干净试管中，标上检测号、待检指标名；各加IL-8、CD62p、IgG1-Control 试剂10ul，并涡旋混匀；置室温暗处避光孵育30 约分钟；直接将试管放入标本前处理仪样本台，用全血溶解试剂，裂解红细胞。再置室温暗处孵育5 分钟；用流式细胞仪检测血中性粒细胞、血小板的荧光强度，计算阳性百分率。记录检测序列号及检测结果。全部数据用流式细胞仪和软件SYSTEMⅡ获取和分析。
②TNF-α水平的测定：免疫组化法。采用过氧化物酶标记的链霉卵白素染色试剂盒，滴加一抗（1：100），4℃过夜。二抗，37℃孵育30min。三抗37℃孵育30minDAB 显色。用显微图象扫描分析仪拍摄扫描图象。
表1 五组治疗后血液中ICAM-1、TNF-α含量的比较（ ±S分）
实验组组内前后比较：两侧温差比较P=0.000，差异有显著统计学意义（P＜0.01），说明改良药熨法对红外热像图均有改善；
各组治疗后比较：实验组和正常组对比，差异无有统计学意义（P＞0.05）。和模型组对比，两侧温差比较P=0.000，差异有显著统计学意义（P＜0.01），和实验组对照组相比，差异无明显统计学意义，但可以降低其温度。
3讨论：
近年来，物理治疗结合中药治疗神经根型颈椎病已广为开展并取得成效。我科通过自制中药活血散和TDP灯有机结合的改良药熨法治疗本病在临床中也取得了不错的疗效。
特定电磁波治疗仪（简称TDP治疗仪）是一个多功能微量元素治疗仪，TDP治疗仪具有如下功效：1、改善血液循环。照射中局部温度升高，毛细血管扩张，血流加快，物质代谢增强，组织细胞活力及再生能力提高；2、消炎。改善血液循环增加吞噬细胞的吞噬功能，消除肿胀，促进炎症消散；3、镇痛、解痉作用。降低神经系统的兴奋性，有镇痛、解除横纹肌和平滑肌痉挛以及促进神经功能恢复的作用；4、加快创口愈合；5、促进组织肿胀和血肿的消散。而自制活血散是在活血散的基础上加用祛风除湿、温补肝肾之类的药物。在治疗本病的过程中使二者有机的结合，药物在TDP照射下，可促进更好的促进局部组织的血液循环，加快新陈代谢，促进药物的吸收，加快病变组织的恢复。具有止血舒筋，活血散瘀，理气镇痛的功效，主治久伤不愈，经血不和，创伤出血，伤后肿胀，疼痛瘀血。
TNF-α、ICAM-1作为炎症标志物在神经根型颈椎病的发生发展过程中起重要作用[3、4]，通过本实验我们可以看出，通过改良药熨治疗后的实验组大兔中其含量较模型组明显减少，和正常组比较无明显差异，经治疗后实验组兔子的体温较模型组的体温也下降明显，与普通的药物治疗相比，也能有效的降低其温度。由此推测其治疗神经根型颈椎病可能是通过抑制炎性因子，从而改善项背部微循环瘀滞、组织供血不足与缺氧状态，增强局部血供，改善局部组织炎症损伤，加速局部无菌性炎性物质的排除，阻止炎症过度反应，促使炎症恢复。
参考文献
[1]刘拴.中西医结合治疗椎动脉型颈椎病疗效观察.[J] 现代中西医结合杂志2013.22（7）.-739-741
[2]中华人民共和国卫生部医政司．中国康复医学诊疗规范（上册）．北京：华夏出版社，2009：309．
[3]唐可京．细胞间粘附分子-1和血管细胞间粘附分子-1的结构与功能[J]．细胞与免疫学分子杂志，2002，18（2）：193-195．
[4]Demircan MN，Asir A，Cetinkal A，etal. Is there any relationship between proinflammatory mediator levels in disc material and myelopathy with cervical disc herniation and spondylosis? A non -randomized，Prospective Clinical study .Eur Spine J，2007，16（7）：983～986
注：本课题为湖南省科技厅2013年以后立项项目，项目编号：2013SK3082
论文作者:王玥1,张婷2,曹东波3（通讯作者）
论文发表刊物:《航空军医》2017年第17期
论文发表时间:2017/11/10
标签：实验组论文; 颈椎病论文; 良药论文; 对照组论文; 湖南论文; 神经论文; 炎症论文; 《航空军医》2017年第17期论文;