郑州市中医院 河南郑州 450007
【摘 要】目的：探讨愈胃灵合剂(YuweilingmixtureYWLM)对慢性萎缩性胃炎大鼠（CAG）胃酸分泌及SS、Bcl-2含量的影响及机制。方法：将健康Wistar大鼠随机分为5组，即正常组、CAG组、YWLM低、中、高剂量组，每组15只。用水杨酸钠灌胃联合自由饮用氨水法建立大鼠CAG模型，正常组予生理盐水灌胃。结果：与正常组比较，CAG组血清SS含量和胃粘膜Bcl-2表达显著升高（P<0.01)，胃液总酸、游离酸含量显著降低(P<0.01;P<0.01)；与CAG组比较，YWLM（高、中、低剂量）组血清SS含量和胃粘膜Bcl-2表达明显下降，胃液总酸、游离酸含量升高(P<0.01或P<0.05)，其中高剂量组差异最为突出(P<0.01)。结论：YWLM对CAG大鼠模型有较好的治疗作用，促进胃酸分泌、减少血清SS含量、下调胃黏膜Bcl-2表达可能是其部分作用机制。
【关键词】愈胃灵合剂；慢性萎缩性胃炎；胃酸分泌；SS；Bcl-2
【中图分类号】R573.3+2 【文献标识码】B 【文章编号】1674-8999（2015）9-0642-01
慢性萎缩性胃炎（chronicatrophicgastritis,CAG）是消化系统的常见病之一，以胃黏膜上皮和腺体萎缩、黏膜变薄、黏膜肌层增厚为主要特征。本研究旨在建立大鼠慢性萎缩性胃炎模型的基础上，观察YWLM对CAG模型大鼠胃胃酸分泌及SS、Bcl-2表达的影响，探讨其可能的作用机制。
1 材料和方法
1.1 动物
健康清洁级Wistar大鼠75只，雌雄各半，体重180-220g，河南中医学院动物实验中心提供。
1.2 实验药物
愈胃灵合剂组成：党参、黄芪、白术、丹参、莪术、三七、川芎、白花蛇舌草、石斛、麦冬、半枝莲等组成，由郑州市中医药中药房提供。
1.3 试剂及仪器试剂：氨水含NH325%～28%（沈阳新兴试剂厂）；水杨酸钠（天津市化学一厂）；兔抗鼠Bcl-2多抗（北京博奥森生物技术公司）；SSELISA试剂盒（北京博奥森生物技术公司）；SP试剂盒（美国ZYMED公司）；DAB染色液（美国ZYMED公司）。
仪器：高速离心机HHR21型，北京医用离心机厂；电热恒温水浴箱HWS-20型，江苏太仓市实验设备厂；酶标仪Thermo354型，美国；光学显微镜OlympusBX-51型，日本。
1.4方法
1.4.1将75只健康Wistar大鼠随机分为5组，即正常组、CAG组、YWLM低剂量组、YWLM中剂量组、YWLM高剂量组，每组15只。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆除正常组外各组大鼠采用浓度为2％水杨酸钠溶液按1mL/100g灌胃2个月，1次/d，灌胃前后1h禁食禁水，并自由饮用0．05％的氨水，2d足量喂食，1d停食；正常组给予1mL/100g体重生理盐水日1次灌胃，自由饮水进食，直至实验结束。造模过程中CAG组死亡2只，YWLM低剂量组、YWLM中剂量组各死亡1只，正常组没有死亡。随机抽取2只大鼠做胃黏膜病理组织学检查，确认造模成功后进行药物干预实验，YWLM低剂量2g生药/(kg?d)灌胃，相当于人的临床用量，1次/d；YWLM中剂量组4g生药/(kg?d)灌胃，相当于人临床用量的2倍，1次/d；YWLM高剂量组8g生药/(kg?d)灌胃，相当于人临床用量的4倍，1次/d；CAG组予1mL/100g体重生理盐水1次/d灌胃。各组灌胃均50天后，处死所有大鼠。
1.4.2ELISA法测定标本中SS含量：采用摘取眼球法取血，约5mL/只，离心10min，分离血浆、血清，-80℃保存，采用酶联免疫吸附法检测SS含量，具体操作方法详见试剂盒说明书。
1.5统计学方法
采用SPSS20.0软件包进行数据分析。数据均采用（x±s）表示，多组间比较采用单因素方差分析（ANOVA）。
2结果
2.1 各组大鼠胃液总酸量和游离酸含量的比较。
胃液总酸含量,CAG组与正常组比较P<0.01,差异具有统计学意义；YWLM高剂量组与CAG组相比较P<0.05,差异具有统计学意义；YWLM低剂量组与CAG组相比较差异无统计学意义。胃液游离酸含量,CAG组与正常组比较P<0.01,差异具有统计学意义；YWLM高剂量组与CAG组相比较P<0.05,差异具有统计学意义；YWLM低剂量组与CAG组相比较差异无统计学意义。
2.2血清生长抑素（SS）的变化
与正常组比较,CAG组血清SS水平显著升高（P<0.01）,说明造模成功。YWLM低剂量组血清SS水平升高（P<0.05），YWLM中、高各剂量组血清SS水平升高（P＞0.05）。与CAG组比较,YWLM高、中剂量组均显著降低血清SS水平（P<0.01）。
2.3胃粘膜Bcl-2蛋白表达的变化
Bcl-2在CAG组、YWLM低、中、高各剂量组及正常组各组中的表达灰度值呈逐渐递增趋势，YWLM高各剂量组较CAG组胃粘膜Bcl-2表达灰度值明显升高（P<0.01）；与正常组比较，YWLM低、中剂量组胃粘膜Bcl-2表达灰度值降低（P<0.05），YWLM高剂量组降低，但差异无统计学意义（P＞0.05）。
3讨论
本实验结果示：与正常组比较,CAG组大鼠胃液总酸和游离酸含量显著降低,说明CAG状态下所造成的胃损伤已严重影响胃酸、胃蛋白酶的合成和分泌。这与胃粘膜萎缩、胃液pH值增高的低酸状态、壁细胞数减少、盐酸分泌不足和主细胞数的降低、胃蛋白酶原分泌下降有关。造模成功并经药物治疗后,YWLM3种不同剂量均能不同程度升高胃液总酸含量和游离酸含量,且以YWLM高剂量作用显著,提示YWLM具有促进胃酸分泌的作用。
YWLM的作用机制可能是通过促进胃酸分泌、降低血清SS水平,促进SS正常分泌,下调Bcl-2表达，促进正常的细胞凋亡，起到治疗CAG的效果。且YWLM在治疗CAG方面具有明显的剂量相关性，一定程度上提高药物剂量可以达到更好的治疗效果。而其更深入的作用机制则有待进一步探讨。
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[4]郑州市普通科技攻关计划项目（X2013S0264）
通讯作者：
娄华（1985-），女，河南省郸城县。硕士研究生。
论文作者:娄华通讯作者,乔虹,杨宏升,王昊,曹桂芳,白广欧
论文发表刊物:《中医学报》2015年9月第30卷供稿
论文发表时间:2015/10/21
标签：剂量论文; 大鼠论文; 含量论文; 血清论文; 胃液论文; 胃酸论文; 统计学论文; 《中医学报》2015年9月第30卷供稿论文;