蓝天1 张春芳2 张淑萍3
【摘 要】 目的 了解下呼吸道感染常见病原菌及其耐药现状，探究痰培养在临床呼吸道感染治疗中的作用及存在问题。方法 收集我院2014年3月至2015年3月住院患者送检的所有下呼吸道标本共1209份。一般细菌按照《全国临床检验操作规程》，应用梅里埃公司细菌鉴定板条进行鉴定；真菌培鉴定按照《全国临床检验操作规程》真菌培养鉴定程序，药物敏感试验采用K-B法。 结果 共分离菌株1030株，培养阳性率为85.1%。其中革兰氏阴性杆菌460株，占44.6% ，主要以铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌为主；革兰氏阳性球菌19株，占1.8% ，主要以肺炎链球菌、葡萄球菌为主；曲霉菌370株，占35.9%；白色念珠菌181株，占17.5%；毛霉菌10株，占0.9%。主要的耐药菌株有：产超广谱β—内酰胺酶（ESBLs）的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌分别为15株和7株，分别占23.5%和21.4% ；泛耐药的非发酵菌群铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌分别为15株和3株，分别占6.8%和6.1%；耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）1株，占葡萄球菌的11.1%，耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）6株，占66.7%； 结论 耐药菌的监测，特别是对产ESBLs的菌株、 MRCNS和MRSA及真菌的监测，对临床医师合理应用抗生素及延缓耐药菌株产生，有着极为重要的意义。
【关键词】 病原菌； ESBLs； MRCNS； MRSA； 耐药性
为了解我院常见病原菌及耐药情况，现收集我院2014年3月—2015年3月下呼吸道感染患者的痰和肺泡灌洗液标本，对常见病原菌及其耐药性进行分析。
材料与方法
1．材料
1.1 标本来源：收集我院2014年3月至2015年3月住院患者送检的所有痰标本和肺泡灌洗液标本共1209份。标准质控菌株：铜绿假单胞菌ATCC27853，肺炎克雷伯菌ATCC700603，大肠埃希菌ATCC25922；
1.2 试剂：
培养基：哥伦比亚琼脂，M-H琼脂，麦康凯琼脂，沙保弱琼脂均购自法国梅里埃公司；药敏纸片购自杭州微生物公司；细菌鉴定板条购自法国梅里埃公司。
2.方法
2.1 一般细菌按照《全国临床检验操作规程》，应用细菌鉴定板条进行鉴定；药物敏感试验采用K-B法，按照CLSI药物敏感试验标准[1]。
2.2 真菌培养及鉴定：按照《全国临床检验操作规程》真菌培养鉴定程序，将痰标本处理后，接种至沙保弱培养基，置于25°C培养箱内。每日检查培养结果，有丝状真菌生长均进行形态学鉴定。
2.3 丝状真菌形态学鉴定：丝状真菌主要依靠形态学鉴定，沾取菌落置于滴有生理盐水的载玻片上，盖上盖玻片后镜下直接观察。
结 果
1.下呼吸道感染主要病原菌群分布见（表1）：
2.五种主要革兰氏阴性杆菌对16种抗菌药物耐药率分析见（表2）。
3.17株葡萄球菌的耐药率检测见（表3）。
讨 论
由于广谱抗生素的广泛应用及滥用，出现大量的耐药菌株，使得细菌的耐药问题更加突出。故临床上对细菌进行耐药性监测是十分重要的。我院2014年3月—2015年3月下呼吸道感染病原菌耐药菌监测显示，主要的耐药菌株有：产超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌；泛耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌以及嗜麦芽寡养食单胞菌等；耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA），耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）。
超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）和质粒介导的AmpC酶是大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌对新的广谱头孢菌素、氨曲南等耐药的重要原因[1]。铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌是临床上最常见的引起严重医院感染的条件致病菌。由于碳青霉烯酶的出现，可导致细菌对碳青霉烯类、青霉素类、广谱头孢菌素类及单环类抗生素均耐药性，成为泛耐药菌株[2]。在长期应用抗生素治疗过程中，铜绿假单胞菌可能发生耐药突变。因此，初代敏感的菌株在治疗3-4天后，有必要测试重复分离菌株的药敏试验。不动杆菌的分离率目前呈急剧上升状态，但就其对临床上的指导意义到底多大，还不是很明确。有资料显示，患者培养出泛耐药的的鲍曼不动杆菌，未经抗菌药物治疗，经过上一段时间后，患者的病情反而好转，鲍曼不动杆菌在人体内定植比感染更为常见。因此，还需要临床医生进一步探讨。葡萄球菌在我院下呼吸道感染中也占有重要地位，耐甲氧西林的葡萄球菌治疗上已经成为世界性的难题。嗜麦芽寡养食单胞菌是主要的条件致病菌和院内感染的病原菌之一【3】，该菌感染多发生于老年人及机体免疫功能低下者，87％的患者有严重的基础疾病。
从本次调查资料中看，真菌的检出率急剧上升，主要以曲霉菌为主。原因有两个，一由于哮喘、COPD、气管内插管等患者，正常防御机制受到破坏，可导致细菌定植。二是曲霉菌在环境中广泛存在，可通过呼吸道吸入其孢子，一旦患者存在免疫缺陷等高危因素，很容易引起深部真菌感染。
总之，在细菌耐药受到广泛关注的今天，及时准确地检出病原菌，对耐药菌株进行监测，特别是产ESBLs的菌株、 MRCNS和MRSA及真菌的监测，对临床医师合理应用抗生素及延缓耐药菌株产生，有着极为重要的意义。
参考文献
[1]Liu W,Chen L,Li H, et al. Novel CTX-M β-Lactamase genotype distribution and spread into multiple species of enterobacteriaceae in Changsha,Southern China.Antimicrob Chemother,2009,63:895-900.
[2]Perez F, Hujer AM, Hujer KM, er al. Global challenge of multidrug-resistant Acinetobacter baumannii. Antimicrobl Agents Chemother,2007,51:3471-3484.
[3]Waters VJ, Gomez MI, Soong G,et al. Immunostimulatory Properties of the emerging Stenotrophomonas maltophilia.Infect Immun,2007,75:1698-1703.
论文作者:蓝天1,张春芳2,张淑萍3
论文发表刊物:《中华临床医师杂志》(电子版)2016年2月第4期
论文发表时间:2016/7/15
标签：菌株论文; 病原菌论文; 真菌论文; 葡萄球菌论文; 细菌论文; 杆菌论文; 西林论文; 《中华临床医师杂志》(电子版)2016年2月第4期论文;