南京市浦口区浦厂医院 江苏南京 210031
[摘要]比较分析乙肝五项指标两种检测方法(乳胶层析法和ELISA)的应用价值。方法对353份血清分别采用乳胶层析法和酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测乙肝五项指标,对检测结果进行分析、总结、对比,探讨两种检测方法的临床应用价值。结果:两种方法的乙肝两对半检测结果比较,HBsAg、HbsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb五项结果差异性小,无统计学意义(P>0.05);同时及时对标本做出处理,严格按照操作规程进行,可以提高两种方法的检出率。结论:两种方法相结合,基本可以满足基层医院的临床诊疗需求。
【关键词】乳胶层析法;ELISA法;乙肝两对半;检测
乙肝病毒性肝炎是临床常见疾病,主要是由的乙肝病毒的引起的,且具备传染性,其中具体的传播方式为血液传播、体液传播等形式。其主要的临床症状以恶心、食欲减退、呕吐和肝功能异常的情况,严重影响患者的身体健康,甚至给患者带来沉重的心理负担。在我国,乙型肝炎的患病率极高[1],严重危害人类健康,因此需对其进行有效检测及防治。而乙肝两对半是目前临床较为常用的乙型肝炎病毒的血清学检测指标,对乙肝的诊治、献血人员筛查等方面有重要作用。本文采用两种方法对血清标本进行乙肝两对半检测,现将结果汇总如下:
1、材料与方法
1.1标本采集收集 2015年8月-2016年2月我院353例门诊患者及健康体检者血清,其中男185例,女168例。
1.2试剂与仪器 乙肝两对半ELISA法检测诊断试剂盒为上海科华生物技术有限公司生产;乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体检测试剂盒(乳胶法)为艾博生物医药(杭州)有限公司生产。
1.3方法 抽取空腹静脉血3~5mL于干燥试管或者促凝分离胶密封试管内,放置待凝固后,通过离心机对血标本进行处理,其中离心机可以选择3000r/min,最终得到血清样品。乳胶层析法与ELISA法均严格按说明书进行标准化操作。乳胶层析法是应用免疫层析法中的双抗体夹心法对血清HBsAg、HBeAg进行检测,双抗原夹心对HBsAb进行检测,竞争抑制法对HBeAb、HBcAb进行检测;ELISA法是通过酶标仪对显色结果进行分析检测。
1.4统计学处理 统计分析所得数据应用SPSS19.0进行统计学分析,P<0.05提示差异有统计学意义,P>0.05提示差异无统计学意义。
2、结果
两种方法检测结果不相符的标本共15例;其余不相符者包括HBsAg 2例、HBs Ab5例、HBeAg 1例、HBeAb 1例、HBcAb6例。两种方法的乙肝两对半检测结果比较,五项结果差异性较小,无统计学意义(P>0.05)。两种方法检测乙肝五项指标的结果有较高的符合率,见表1。
3、讨论
乙肝五项指标的检测临床实验室常用方法为酶联免疫吸附试验法(ELISA)、乳胶层析法。酶联免疫法在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅定性或定量分析[2]。乳胶层析法采用高度特异性的抗体抗原反应及免疫层析分析技术来定性检测血液中抗体,血标本中的抗体与预包被在膜上的重组抗原-乳胶结合物反应,如果在测试区内会出现一条红色条带,表明是阳性结果;如果在测试区内没有出现红色条带,则血液中不含有抗体,表明是阴性结果[3]。 根据本次比较可发现乳胶层析法灵敏度较ELISA法略低,造成一定的漏检不可避免,故临床一般把它作为急诊术前或大规模体检的筛查。根据本次实验的结果发现,乳胶层析法方便快捷,但对弱阳性的检测灵敏度较ELISA法略低,于加样后15min~20min内观察结果可相应提高其阳性率。ELISA法则易出现假阳性,结果往往受多种因素影响,如加样量、稀释浓度、温度等。如果严格按照SOP操作规程进行检测,两种方法相结合,基本可以满足基层医院的临床诊疗需求。
参考文献
[1]张冬梅;探讨乙肝五项定量检测在临床中的应用效果[J]。当代医学杂志,2007,13(2):46-47。
[2] 杭建峰,吴英松等;血清乳胶层析法及其诊断试剂的研制[J]。细胞与分子免疫学,2008,22(1):121-l24。
[3] 张继东;乙型肝炎表面抗原定量检测临床意义的探讨[J]。标记免疫分析与临床,2009,7(4):183-184 。
论文作者:王昊
论文发表刊物:《医师在线》2017年6月上第11期
论文发表时间:2017/8/25
标签:层析论文; 乙肝论文; 两种论文; 乳胶论文; 抗体论文; 抗原论文; 方法论文; 《医师在线》2017年6月上第11期论文;