哈药集团三精制药 150000
【摘 要】目的：对心脑安片中的黄芩苷含量测定方法进行甄选，优选出最为适宜的方法。方法：使用HPLC方法对心脑安片中的黄芩苷含量进行科学测定。结果:通过技术工作人员安排的实验可以发现的是黄芩苷在0.1248～0.6240μg时，线性关系状态维持的最好，此时的平均的回收率是100.55%。同时RSD=1.07%(n=5)。结论：通过技术实验可以发现的是高效液相色谱法在实际应用中的使用效果良好，这种方法在组织使用的过程中可以发现的优势是灵敏性以及重现性优良，比较适合心脑安片中的黄芩苷的含量测定。
【关键词】心脑安片；黄芩苷；高效液相色谱法
心脑安片是由莲子、桑寄生等中药材通过科学的配比得到的，这种药材在实际应用的过程中，可以起到疏通血管、活血化瘀的作用。一般会被用于治疗一些关节以及腰腿痛上的病症。可以祛风散寒，有效缓解患者的病痛。为了方便患者吞服，这种药品为片剂，并且为了调整口感，还在外部设进行了糖衣包裹。为了对心脑安片的药品质量进行测定，以期药品在实际应用过程中获得最好的疗效，本文对黄芩苷在心脑胺片中的实际含量进行了测定，为了获得较为精确的实验结果，选用了高效液相法，通过实验获得了较为满意的结果，值得较大范围的推广。
1仪器与试药
1.1仪器
高效液相色谱仪(美国SSI高效液相色谱仪),紫外分光光度计(美国PE公司2S型紫外分光光度计),电子天平(MettlerAE-240)。
1.2试药
黄芩苷对照品由中国药品生物制品检定所提供,所用试剂甲醇为色谱纯,其它为分析纯,水为重蒸馏的去离子水,心脑安片由天津乐仁堂制药厂生产(批号:970901、990401、000101、000102、000103)。
2 方法和结果
2.1色谱条件
色谱柱:PARKINGKromasilC18(250mm×460mm,5μm);流动相:甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2);流速:1.00ml/min;柱温:40℃;进样量:20μl;检测波长:280nm;灵敏度:0.02AUFS;测定方法:外标峰面积法。
2.2对照品和供试品溶液的制备
精密称取黄芩苷对照品6.42mg于100ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,制成0.0642g/L的对照品储备液,摇匀,备用。取心脑安片0.4g,精密称定,置50ml容量瓶中,加甲醇(40%),超声30分钟提取,超声后补足损失的重量,经微孔滤膜过滤后,按色谱条件每隔一定时间进样20μl。
2.3标准曲线的制备
精密称取黄芩苷对照品12.5mg于50ml量瓶,用甲醇稀释至刻度,准确吸取0.25、0.75、1.25、1.75、2.25、2.75ml分别置于5ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,按色谱条件各取20μl进样,以黄芩苷的浓度为横坐标,所测峰面积为纵坐标绘制工作曲线,黄芩苷在0.0125～0.1375g/L间线性良好,回归方程:Y=71924907.4C-126278.5,r=0.9992。
2.4稳定性试验
精密称取心脑安片000101批号的样品粉末0.4090g,置50ml量瓶中,加甲醇(40%),超声30分钟提取,超声后补足损失的重量,经微孔滤膜过滤后,按上述色谱条件每隔一定间进样20μl。黄芩苷在所测定的15小时内基本稳定,不影响测定结果。
2.5精密度试验
精密称取000102批号的样品0.4115g,按“2.4”项下样品处理方法提取,经微孔滤膜过滤后,按上述色谱条件每次进样20μl,连续测定5次,表明本仪器精密度好。
2.6重复性试验
取000103同一批号的样品粉末5份,每份约0.4g,精密称定,按“2.4”项下提取方法提取,经微孔滤膜过滤后,按上述色谱条件连续进样,每次20μl。方法重现性良好。
2.7回收率试验
精密称取同批号已知含量(0.8026%)的心脑安片粉末5份,每份约0.25g,精密称定,置50ml量瓶中,每份精密加入黄芩苷对照品1mg,按“2.4”项下提取方法提取,经微孔滤膜过滤后,按上述色谱条件测定,经计算黄芩苷平均回收率为101.42%,RSD=1.81%,结果见表1。
表1 回收率试验结果
2.8空白试验
按处方中药味的比例及制剂工艺,自制不含黄芩的阴性对照品,再按样品提取方法提取,并按上述色谱条件测定,结果空白溶液中无黄芩苷峰,故认为该处方中各药成分间基本无干扰。
2.9 样品含量测定
2.9.1 黄芩原药材中黄芩苷含量的测定
精密称取黄芩原药材粉末0.25g左右于100ml量瓶中,按上述样品提取方法提取,再取1ml提取液,用甲醇定容至10ml,经微孔滤膜过滤后,按上述谱条件进样20μl,测定,经计算原药材中黄芩苷平均百分含量为11.722%,RSD=3.53%。结果见表2。
表2 黄芩原药材黄芩苷含量测定结果
3讨论
通过对流动相的观察，可以从中获得的数据是在此次实验的色谱条件下，黄芩苷拥有足够大的峰值，同时黄芩苷与其他组分间存在较好的分离度，实验工作人员在在使用这种方法进行样品处理时，可以获得较好的效果，在时间的占用上也花费较少，可以直接用于制剂过程中的快速分离，本次实验在对流动相以及波长进行选择时，主要参照《中国药典》上的相关管理数据，加上实验过程中的自主摸索，在流动相上选用了甲醇：0.05%磷酸(47∶53),可以发现此时的黄芩苷试验检测数据上的显示为较好的峰型、以及较为合理的保留时间和较好的分离度。
样品处理方法上为了提升获取操作上的效率，可以选用超声提取法，不仅节省占用的时间，同时也缩减了工作人员在执行操作上的步骤。在对药品进行波长上的检测时，可以使用的方法是在黄芩苷对照品中加入甲醇，然后制作成每1ml中含黄芩苷1mg溶液，作为实验的对照品溶液，并进行紫外线检测，在对结果进行选定时，可以测定波长λmax=280nm。并且溶剂的阴性无干扰。实验工作人员在对实验的方法进行选用时，可以发现高效液相色谱法在使用时，可以获得较好的样本回收率，在使用体验上较为准确、快速、且操作相对简单。
参考文献
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[4]李玉英,彭海英.高效液相色谱法测定清热止泻片中黄芩苷含量[J].中国药业,2015(10):64-65.
论文作者:吕红岩,张冬梅
论文发表刊物:《世界复合医学》2017年第9期
论文发表时间:2018/1/30
标签：黄芩论文; 色谱论文; 滤膜论文; 精密论文; 甲醇论文; 高效论文; 含量论文; 《世界复合医学》2017年第9期论文;