湖南省肿瘤医院胃十二指肠胰腺外科 湖南长沙 410000
摘要：目的：探讨骨髓中表达VEGFR-1的造血前体干细胞在肝细胞癌肺转移中的表达及临床意义。方法：运用免疫组化法分别检测22例肝细胞癌肺转移组织（研究组）、20例正常肺组织（对照组）中VEGFR-1的表达情况，结合患者的病理资料展开回顾性分析。结果：研究组VEGFR-1的阴性表达3例，阴性率为13.6%，阳性表达19例，阳性率为86.4%；对照组VEGFR-1的阴性表达15例，阴性率为75.0%，阳性表达5例，阳性率为25.0%；两组对比差异显著（P<0.05）。结论：肝细胞癌肺转移中VEGFR-1呈高表达，分析VEGFR-1表达可谓肝细胞癌的靶向治疗提供重要的参考依据。
关键词：VEGFR-1；造血前体干细胞；肝细胞癌肺转移；表达；临床意义
Expression and clinical significance of VEGFR - 1 hematopoietic progenitor cells expressed in the bone marrow in the lung metastasis of hepatocellular carcinoma
[Abstract]Objective：To investigate the expression and clinical significance of hematopoietic progenitor cells expressing VEGFR-1 in the bone marrow in the lung metastasis of hepatocellular carcinoma. Methods：immunohistochemical method was used to detect the expression of VEGFR-1 in 22 cases of hepatocellular carcinoma（lung metastasis tissue）and 20 normal lung tissues（control group）. Results：the negative expression of VEGFR-1 in the study group was 3 cases，the negative rate was 13.6%，the positive expression rate was 19，the positive rate was 86.4%，the negative expression of VEGFR-1 in the control group was 15，the negative rate was 75%，the positive expression rate was 5，the positive rate was 25%，and the difference between two groups was significant（P<0.05）. Conclusion：the expression of VEGFR-1 in the lung metastasis of hepatocellular carcinoma is high，and the analysis of VEGFR-1 expression may be an important reference for the targeting therapy of hepatocellular carcinoma.
[Key words]VEGFR-1；hematopoietic progenitor stem cells；lung metastasis of hepatocellular carcinoma；expression；clinical significance
肝细胞癌肺转移多发于早期，转移方式分为肝内转移与肝外转移两种，后者涉及的主要器官是肺，这是导致患者预后不佳的重要因素[1]。肝细胞癌肺转移会进一步加重患者病情，进而威胁其生命安全。相关研究报道指出，探讨骨髓中表达VEGFR-1的造血前体干细胞在肝细胞癌肺转移中的表达及临床意义，可为临床治疗方案的制定提供非常有价值的参考依据[2]。基于此，本研究运用免疫组化法分别对肝细胞癌肺转移组织及正常肺组织中VEGFR-1的表达进行检测与对比分析，总结汇报如下。
1资料和方法
1.1临床资料
选取我院手术切除并经病理学确诊的22例肝细胞癌肺转移组织石蜡包埋标本作为研究组，患者中，男13例，女9例；年龄44~67岁，平均（53.5±2.7）岁；Chinld分级中，A级10例，B级7例，C级5例；临床分期中，I期3例，II期11例，III期8例；病理分型中，单结节型5例，多结节型4例，巨块型8例，弥漫型5例。所有患者均未行化疗、放疗，经影像学检测证实为肺转移。另选取我院20例正常肺组织石蜡包埋标本（取自肺部炎性假瘤患者）作为对照组，患者中，男12例，女8例；年龄43~67岁，平均（53.6±2.5）岁。
1.2方法
收集患者的肺组织标本，送检后先用10%福尔马林固定，石蜡包埋，切片，65℃下烤片2h；再行VEGFR-1免疫组化分析。脱蜡水化，滴入3%H2O2，置于37℃恒温箱中封闭10min，磷酸盐缓冲液洗涤，微波修复后置于室温冷却，磷酸盐缓冲液洗涤，滴入一抗，抗VEGFR-1抗体（武汉博士德生物技术有限公司）以1：100稀释，4℃孵育过夜，隔天滴入通用型（Fab段）-HRP多媒体（PV-9000试剂盒，中杉金桥，北京诺博莱德科技有限公司），置于37℃恒温箱中孵育20min，磷酸盐缓冲液洗涤，DAB显色（DAB试剂盒，中杉金桥，北京诺博莱德科技有限公司），两组标本同一批染色，免疫组化分析的操作流程严格按照试剂说明书进行，以磷酸盐缓冲液代替一抗作为阴性对照，苏木素复染，脱水透明，中性树胶封片。
1.3判断标准
染色评定由2名经验丰富的病理医师分别进行评估。运用显微镜摄像计算机图像分析系统，计算阳性细胞及肿瘤细胞的数量。VEGFR-1主要定位于肿瘤细胞质，癌细胞浆呈棕黄色视为阳性表达，细胞质呈透明或无色视为阴性表达，根据阳性细胞数与显色强度区分阳性等级，分为①弱阳性（+）：阳性细胞数<25%且显色强度呈淡黄色或只有个别细胞呈黄色或棕黄色；②强阳性（+++）：阳性细胞数>50%且大部分细胞呈黄色或棕黄色；③中度阳性（++）：阳性细胞数与显色强度处于弱阳性与强阳性之间[3]。
1.4统计学方法
采用SPSS19.0软件处理数据，计数资料用%表示，组间比较采用x2检验，P<0.05表示差异显著。
2结果
研究组VEGFR-1的阴性表达3例，阴性率为13.6%，阳性表达19例，阳性率为86.4%；对照组VEGFR-1的阴性表达15例，阴性率为75.0%，阳性表达5例，阳性率为25.0%；两组对比差异显著（P<0.05）。见表1。
3 讨论
肝细胞癌是一种常见恶性肿瘤，发病率与死亡率均较高，以西南、东南和东北地区发病率为高，并向内陆地区呈递增趋势。我国每年有数十万的肝细胞癌新发病例，也有数十万人死于肝细胞癌。随着医学技术的不断进步，肝细胞癌在临床治疗上有了很大的突破，死亡率有所下降，但仍不容乐观。至今，肝细胞癌的病因和发病机制仍未完全肯定，一般认为在各种致癌因素（如肝炎病毒感染、肝硬化基础、黄曲霉素摄入、寄生虫刺激或化学物质接触等）长期作用下，包括糖尿病疾病基础等，加上遗传易感性，导致肝细胞遗传特性的改变，而这种改变的积累导致癌前病变，并可发展为早期癌，然后继续扩展，并且进展至中晚期，进而威胁患者的生命安全[4]。
肝细胞癌具有明显的侵袭性，可向肝内或肝外发生转移，其中肝外转移主要涉及器官是肺，一旦出现肺转移则自然进入晚期，这在一定程度上提高了肝细胞癌患者的死亡率。相关研究报道指出，肝细胞癌肺转移的尸检率可达40%以上[5]。已有的研究报道指出，VEGFR-1的表达与肝细胞癌肺转移密切相关，且会影响患者预后[6]。本研究选取肝细胞癌肺转移组织与正常肺组织进行VEGFR-1表达对比，结果显示，肝细胞癌肺转移组织的阳性率（86.4%）明显高于正常肺组织（25.0%），提示VEGFR-1在肝细胞癌肺转移组织中呈高表达，分析认为，骨髓中表达VEGFR-1的造血前体干细胞对肝细胞癌肺转移或有诱导作用，且可进一步导致癌细胞的扩散。
综上所述，肝细胞癌肺转移中VEGFR-1呈高表达，分析VEGFR-1表达可谓肝细胞癌的靶向治疗提供重要的参考依据。
参考文献：
[1]吴述平.结直肠癌肝转移组织中CD133+VEGFR1+细胞及CD133+CXCR4+细胞的表达[D]. 福建医科大学，2015.
[2]刘斌，高建东，刘清.肝癌细胞株中VEGFR活化检测及临床意义[J].当代医学，2015（19）：12-13.
[3]许鸿雁，赵忠民，王文慧，等. VEGFR、ERCC1mRNA表达量对肺癌患者预后的临床意义[J]. 中国社区医师，2016，32（16）：116-117.
[4]韩力，刘琳.靶向VEGF/VEGFR路径治疗肝细胞癌的临床研究进展[J].东南大学学报（医学版），2017，36（2）：266-270.
[5]覃雪峰.板蓝根双糖Fructopyrano-（1→4）-glucopyranose靶向VEGF/VEGFR通路对肝癌细胞增殖和血管生成的影响[D].四川医科大学，2015.
[6]刘同华，胡雪莲，樊莉，等. DLL4和VEGFR表达与肝细胞癌临床特征的相关性研究[J].现代生物医学进展，2016，16（31）：6019-6022.
论文作者:尹彬
论文发表刊物:《中国误诊学杂志》2018年第1期
论文发表时间:2018/4/8
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