大庆市人民医院 163311
摘要：目的 研究分析不孕症和自然流产患者染色体核型分布的关系。方法 此次研究的对象是选择我院2012年1月—2015年12月行外周血染色体检查的不孕症和自然流产患者416例，将其临床资料进行回顾性分析，并进行G显带染色体核型分析，发现异染色区异常病例进行C显带确认，发现随体及随体柄异常进行N显带确认。结果 在对该院就诊的不孕症和自然流产患者核型分析检查的416例样品中，共检出的51例染色体异常核型和2例性发育异常病例，总异常率为12.26%。51例染色体异常核型中常染色体结构异常有34例；异染色区多态性9例；性染色体结构异常4例。染色体数目异常4 例，其中1例为嵌合型数目异常。结论 染色体核型异常与不孕症和自然流产密切相关，也是出生异常胎儿的重要原因，为达到降低出生人口缺陷率优生优育的目标应进行必要的遗传学咨询、产前筛查、产前诊断。
关键词：不孕症；自然流产；染色体核型
[Abstract] Objective To study the relationship between the distribution of chromosome and infertility and spontaneous abortion. The object of the research methods is the 416 infertility and spontaneous abortion patients peripheral blood in our hospital from January 2012 - December 2015 for example，the retrospective analysis of the clinical data，and G banding karyotype analysis，C banding confirmed cases of abnormal heterochromatin region，found with the body and body with handle abnormal N banding confirmed. Results in 416 samples of infertility and spontaneous abortion patients，51 abnormal karyotypes and 2 cases of abnormal sexual development were detected，with a total abnormal rate of 12.26%. There were 34 cases of autosomal structural abnormalities in chromosome abnormalities，9 cases of polymorphism in abnormal staining area，and 4 cases of abnormal sex chromosome structure in 51 cases. The chromosome number was abnormal in 4 cases，1 of which were mosaicism type and the number was abnormal. Conclusion chromosome abnormalities associated with infertility and spontaneous abortion，is also an important cause of abnormal birth of the fetus，in order to reduce the rate of birth defects should be born in target population genetic counseling，prenatal screening and prenatal diagnosis is necessary.
Infertility；spontaneous abortion；chromosome karyotype
染色体异常是染色体病中患者表现正常的一类，是不孕症和自然流产患者重要的遗传原因，据人类遗传学家夏家辉等人统计每106～107对夫妇中就有1位染色体异常携带者，也有报道中国一般人群中染色体异常率为0.5%～1.0%[1]，在不孕与流产夫妇中，染色体异常携带者占3%～6%[2]。染色体异常中的异染色区多态性与不孕和流产的相关性在目前的相关研究报道中存在不同的观点。该研究对该院2012年1月—2015年12月行外周血染色体检查的不孕症和自然流产患者416例进行染色体核型分析检查，以探讨染色体核型异常患者染色体核型分布、染色体异常与不孕症和自然流产的相关性以及异染色区多态性与不孕症和自然流产的相关性，为遗传咨询提供参考，以达到降低出生人口缺陷率优生优育的目标，现报道如下。
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1 资料与方法
1.1 一般资料
整群收集在该院就诊并进行外周血染色体检查的不孕症和自然流产患者病例，同时对患者进行孕产史、接触史、家族史等可能引起染色体改变的相关信息详细采集。
1.2 方法
1.2.1 G显带 无菌操作抽取肘静脉血2～3 mL，在超净工作台中种植于5 mL培养基中，放置37℃恒温培养箱培养每日混匀1次，培养68～72 h后加入40 ug/mL秋水仙素75 uL混匀后，再继续培养1.5 h，1 500 r/min离心10 min吸取掉上清，培养物中加入0.075mol／ＬKC1溶液7 mL低渗处理30 min，加入1.8mL固定液预固定20 min离心去上清，加入７mL固定液固定3次，７５℃烤片３ h，隔日进行显带和染色。核型分析：每例至少计数20个核型，分析5个核型，异常者加大计数到60个核型，嵌合型病例计数到100个核型。
1.2.2 C显带 新滴玻片７５℃烤片３h。隔日，60℃的1～5%（过饱和）氢氧化钡液45--60秒，在60℃的2×SSC液中处理90 min时，用自来水冲洗干净，5%Giemsa染液染色３ min。
1.2.3 N显带 新滴玻片７５℃烤片３h。隔日，玻片用６－８层干净擦镜纸（略小于玻片大小）盖好，置于一干燥培养皿漂于60℃水浴箱水面上，新鲜配制的AgNO3与甲酸溶液慢慢滴于玻片纸上，直至擦镜纸呈棕黄色（黑色）为止，轻轻启开擦镜纸，将玻片用自来水冲干净，6%Giemsa染色液染色5 min。发现异染色区、着丝粒和随体异常时进行C显带或N显带分析，根据ISCN 2013人类细胞遗传学国际命名体制进行核型命名。
2 结果
不孕症和自然流产患者416例病例核型分析，共检出51例染色体异常核型和2例性腺发育异常病例，异常率为12.26%。51例染色体异常核型中常染色体结构异常有34例，占66.67%，其中平衡易位25例，占总异常率的49.02%；倒位6例，占总异常率的11.76%，其中9号染色体倒位3例。异染色区多态性例，占总异常率的，其中1 qh+，2例；9 qh+，2例；16 qh+，1例，Yqh+，1例；Yqh-，3例。性染色体结构异常4例，占总异常率的7.84%，其中X染色体臂间倒位2例，X长臂等臂1例；环状X染色体1例。染色体数目异常4例，占总异常率的7.84%，均为性染色体数目异常，其中46，XXY，2例；46，XYY，1例；1例核型为45，X[17]/46，XX[83]的嵌合体。染色体结构异常核型包括性染色体结构异常共38例占到总异常率的74.5%。
3 讨论
染色体异常无论是男方或女方都可能导致不孕症及流产，不孕症及流产染色体异常常见得结构异常主要有平衡易位、罗氏易位、倒位等。染色体数目异常导致不孕症及流产常见于性染色体数目异常常见类型如：45，X；47，XXY；47，XYY以及一些嵌合型病例。常染色体数目异常导致不孕症及流产可见于嵌合型染色体核型患者[3]。该文416例患者中共检出51例异常核型，检出率为12.26%，与李亚丽等报道检出率12.6%一致[4]。从检测结果可以看到结构异常病例包括性染色体异常共38例占到74.5%说明染色体结构是引起流产、不孕症的主要细胞遗传学因素，与相关报道结果一致[5]，这是由于染色体结构异常患者在生殖细胞减数分裂过程中染色体联会时产生异常联会结构，平衡易位染色体在联会时可形成4射体能够产生18种配子，其中只有1种配子核型正常，1种平衡易位携带配子，还有16种染色体结构异常配子，这16种异常配子都可导致流产；而倒位核型在联会时可形成倒位环可产生4种配子其中只有1种配子核型正常。由于染色体结构异常患者产生异常配子几率较大，所以可能发生不孕和自然流产的概率增大。检测结果中发现9例异染色区多态性，占到异常的17.6%，异染色区多态性是指在正常人群中超过1%携带这类异常，多态性与不孕症及流产的相关性在业内存在2种不同的观点，从报道中也可看出[6-8]。该文认为这与染色体检测的分辨率相关，染色体检测在320～400条带阶段分辨率在5～10 MB，即染色体检测是检测不出小于5 MB变异，甚至一些特殊病例由于缺失或重复的染色体带纹处于浅带区，可能超过10 MB的变异也无法检测出来。所以染色体检测中发现的异染色区多态性病例中可能一部分存在微小结构异常，需要更进一步进行分子水平的检测如芯片或高通量测序。随着技术发展染色体检测的优势转变为检测分子技术无法检测的染色体结构异常如倒位和易位。而染色体检测未发现异常患者又排除其它原因导致的不孕不育患者应建议行分子水平的遗传学检测。
综上所述，染色体核型异常与不孕症和自然流产密切相关，也是出生异常胎儿的重要原因。对不孕症及流产患者进行遗传咨询和染色体核型分析是必不可少的，而携带有染色体多态性的患者需要得到足够的重视，应建议进行分子水平的检测。为达到降低出生人口缺陷率优生优育的目标应进行必要的遗传学咨询、产前筛查、产前诊断。
参考文献：
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[8]刘念，阎炯，宋婕萍，等.染色体多态性与复发性流产的关系研究[J].实用妇产科杂志 2015，31（1）：75-77.
论文作者:赛凤英,张凤侠,刘运杰,秦丽君,顾春英
论文发表刊物:《中国误诊学杂志》2017年第13期
论文发表时间:2017/9/21
标签：染色体论文; 核型论文; 异常论文; 不孕症论文; 患者论文; 多态性论文; 自然论文; 《中国误诊学杂志》2017年第13期论文;