（平江县第一人民医院静脉配置中心西药学 414500）
摘要：目的 分析马来酸依那普利片的人体相对生物利用度和生物等效性。方法 选取24名健康志愿者作为受试者，采用二交叉法单剂量口服马来酸依那普利片试验制剂及参比制剂各20mg，采用LC-MS/MS串联质谱法对所有患者血浆中的依那普利、依那普利拉的浓度进行测定，计算人体相对生物利用度，评价两种制剂的生物等效性。结果 24例健康受试者分别口服20mg马来酸依那普利片受试制剂、参比制剂后，以依那普利计算的人体相对生物利用度为（90.86±39.59）%，以依那普利拉计算的人体相对生物利用度为（103.0±31.1）%；马来酸依那普利、依那普利拉的tmax经非参数秩检验结果显示均无明显差异（P>0.05）；马来酸依那普利、依那普利拉的ρmax和AUC0-8 h经对数转换、方差分析，两者在α=0.05时均无明显差异，单双侧t检验显示两者均生物等效。结论 马来酸依那普利片试验制剂与参比制剂在健康人体内均具有生物学等效性。
关键词：马来酸依那普利片；生物利用度；生物等效性
[Abstract] objective：to analyze the relative bioavailability and bioequivalence of the human body in the maleic acid inna tablet. Methods selecting 24 healthy volunteers as subjects，using a single oral dose 2 the crossover maleic acid enalaprilat test preparation and reference preparation 20 mg，tandem mass spectrometry（LC - MS/MS method is used for all patients in the plasma of enalaprilat and concentrations were determined and calculated the body relative bioavailability，evaluate the bioequivalence of two preparations. Results 24 cases of healthy subjects were 20 mg oral maleic acid enalaprilat slice preparations，reference subjects，with enalaprilat calculation of human body relative bioavailability is（90.86±39.59）%，with enalaprilat calculation of human body relative bioavailability is（103.0±31.1）%. There was no significant difference between the tmax of the tmax of maleic acid and the tmax of anapprila（P BBB 0 0.05）. The log-conversion and variance analysis of the rho Max and auc0-8 h of maleic acid innalpria and innalpula were not significantly different between the two groups at the time of alpha = 0.05，and the single-side t test showed that both of them were biologically equivalent. Conclusion there is biological equivalence between the preparation of the experimental preparation and the reference preparation in healthy people.
[Key words] maleic acid enna tablet；Bioavailability；bioequivalence
马来酸依那普利片为是目前临床使用较为广泛的降压药物，它属于第二代血管紧张素转化酶抑制剂，其药理机制是通过肝脏将其水解成为活性二酸代谢物-依那普利拉，该物质能够对血管紧张素转化酶进行抑制，从而使得血管紧张素Ⅰ无法转化成血管紧张素Ⅱ，因此使得全身血管维持舒张状态，降低外周阻力从而起到降压效果[1]。本文据此对马来酸依那普利片的人体相对生物利用度和生物等效性进行分析与观察，现报告如下。
1 材料与方法
1.1 药品与试剂
本研究受试制剂：马来酸依那普利片（湘江，生产厂家：湖南千金湘江药业股份有限公司；批准文号：国药准字H20066383；规格：10mg/s）；参比制剂选用马来酸依那普利片（悦宁定，生产厂家：Merck Sharp & Dohme（Australia）Pty. Ltd.；批准文号：国药准字J20160082；规格：10mg/s）。马来酸依那普利拉对照品、依那普利拉对照品、贝那普利拉对照品分别为扬子江药业有限公司、山东鲁抗辰欣药业有限公司、深圳信立泰药业有限公司生产，其纯度分别为99.07%、大于99%、99.5%。所用试剂为自制纯净水、分析纯甲酸，试验仪器采用美国莫赛飞Finnigan TSQ Quantum Ultra AM三重四极杆质谱仪及LC-MS/MS系统。
1.2受试者
选取24名健康志愿者，年龄最小18岁，最大42岁，同一批受试者年龄差异应<10岁，体重应相近，所有患者均经健康体检，已剔除肝肾、心脏、消化道及代谢功能异常患者、神经系统疾病史患者、入选试验14d前服用过药物患者、长期烟酒史或饮用咖啡因饮料患者。本研究已经我院伦理委员会审批，所有患者均被告知本研究并签署知情同意书。
1.3给药方法
采用随机双交叉法单剂量口服马来酸依那普利片试验制剂及参比制剂试验设计，采用随机数字法将24例受试者随机分为受试组和对照组，其中一阶段受试组均口服20 mg受试品马来酸依那普利片（湘江），对照组患者均口服参比品马来酸依那普利片（悦宁定）。7d清洗期后，受试组和对照组交换药品进行二阶段试验，每次试验前1d晚7点后禁食，试验日清晨空腹状态下口服药品，分别于服用后的第5、10h进食脂肪及蛋白含量低的统一标准餐。所有患者受试期间均嘱禁烟禁酒、不饮用咖啡因及其它饮料、不服用除本研究以外的其他任何药物，严禁剧烈运动。两组受试者分别于口服药品前、口服药品后的0.167、0.333、、0.50、0.75、1.0、1.5、2、3、4、5、6、8、10、12、24、36 h抽取静脉血样4~5ml置于抗凝试管，离心分离后取血浆置于干燥管内低温保存待用，2周内完成对依那普利的血药浓度的测定。
1.4建立色谱与质谱条件
Inertsil ODS-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5μm），流动相：甲醇（0.4%甲酸）-水（0.4%甲酸）（体积比50：50），质谱检测分流比70：30，流速：1.0mL/min，柱温：55℃。依那普利、依那普利拉、内标贝那普利拉选择性反应检测离子分别为[MH]+m/z377.10→m /z234.10、[MH]+m/z349.10→m/z206.10、[MH]+m /z397.10→m /z351.10。
1.5制备样品
①配置标准溶液：分别精密称取适量马来酸依那普利、依那普利拉、贝那普利拉，均以甲醇为溶剂溶解，分别定量配制成2.5，25，50，2500mg/L马来酸依那普利及依那普利拉标准溶液、250mg/L贝那普利拉内标溶液。②血浆样品处理：测定血浆药物浓度时，精密吸取0.25ml血样样品置于离心管内，加50ml内标溶液+0.75ml甲醇充分混匀后离心处理取上清液，采用LC-MS/MS分析法分别计算血浆样品中马来酸依那普利、依那普利拉的浓度。
1.6数据分析
以非房室依赖型方法进行计算，采用BAPP2.2软件对生物等效性进行分析。
2 结果
2.1 色谱行为及精密度试验
色谱行为分析显示，依那普利拉、马来酸依那普利、内标贝那普利拉的的保留时间分别为3.9min、4.3min、4.4min，内源性物质未对本研究测定造成干扰。本方法对血浆中马来酸依那普利及依那普利拉浓度能做到准确测定，专属性及灵敏度均较高。
精密度试验显示：2.5mg/L、50mg/L、500mg/L不同浓度血浆样品中马来酸依那普利日内精密度分别为7.15%、9.99%、7.00%，日间精密度分别为9.99%、8.88%、0.90%；2.5mg/L、50mg/L、500mg/L不同浓度血浆样品中依那普利拉日内精密度分别为8.17%、4.65%、7.55%，日间精密度分别为9.90%、5.79%、0.96%。
2.2主要动力学参数
采用随机双交叉单剂量口服受试制剂和参比制剂后，24名健康受试者血浆马来酸依那普利和依那普利拉的主要药动学参数见表2。
2.3生物等效性评价
24例健康受试者分别口服20mg马来酸依那普利片受试制剂、参比制剂后，马来酸依那普利、依那普利拉的tmax经非参数秩检验结果显示均无明显差异（P>0.05）。马来酸依那普利、依那普利拉的ρmax和AUC0-8 h经对数转换、方差分析，两者在α=0.05时均无明显差异，单双侧t检验显示两者均生物等效。
3 讨论
本研究选用LC-MS/MS系统，是考虑到只需要用甲醇对样品进行沉淀便可进样测定，因此不仅便于操作，而且还有效避免因反复萃取而造成的回收率偏低现象[2-3]。除此以外，该研究方法使用二级MS测定，能够有效避免血浆中其他杂质对结果的影响，因此具有较高的灵敏度[4]；除此以外该方法还能够在0.5μg/L的较低浓度下进行检测，而且能保持对血浆中马来酸依那普利、以及其代谢产物依那普利拉的同时检测。本研究表1结果对两种药物的相关数据均可检测即是最好的证明，说明本研究所使用方法具有较高的适用性。
此外本研究对马来酸依那普利、依那普利拉的ρmax和AUC0-8 h经对数转换、方差分析，结果显示两者在α=0.05时均无明显差异，单双侧t检验显示两者均生物等效，这在王衍洪[5]等的研究中也得到证实，并且在本药物研究过程中均未出现药物不良反应，因此我们可以肯定的是上述两种药物均具有值得肯定的临床药物安全性。
综上所述，马来酸依那普利片试验制剂与参比制剂在健康人体内均具有生物学等效性。
参考文献
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[5]王衍洪，莫炫永，肖俏霞，等. 马来酸依那普利叶酸片与马来酸依那普利片和叶酸片联用的相对生物利用度评价[J]. 中国药物经济学，2017，12（8）：49-52.
论文作者:魏强英
论文发表刊物:《航空军医》2018年2期
论文发表时间:2018/4/10
标签：依那普利论文; 马来论文; 制剂论文; 血浆论文; 生物论文; 受试论文; 药物论文; 《航空军医》2018年2期论文;