潮州市人民医院 521000
摘要：目的：用EBV病毒（EBV）抗衣壳抗原抗体、抗早期抗原抗体、抗立即早期抗原抗体（VCA-IgA、EA-IgA、Rta-IgG）和白介素6（IL-6）检测评价鼻咽癌的患病风险。方法：收集200例不同分期鼻咽癌（I、II、Ⅲ、Ⅳ期各50例）、50例健康体检者的血清。用采用酶联免疫法检测血清VCA-IgA、EA-IgA和Rta-IgG抗体和IL-6的水平。按临床分期分组，对各临床分期鼻咽癌的IL-6、各抗体阳性率和抗体水平的结果并进行统计分析。结果：鼻咽癌组VCA-IgA、EA-IgA、Rta-IgG和IL-6阳性率均高于健康对照组。结果：Ⅰ、Ⅱ期的血清VCA-IgA和EA-IgA相对值低于Ⅲ、Ⅳ期，差异有统计学意义，但阳性率在各临床分期间比较差异无统计学意义；Ⅰ、Ⅱ期患者Rta-IgG的相对值值和阳性率均明显低于Ⅲ、Ⅳ期患者；血浆中IL-6阳性率与临床分期高低成正比。结论：检测VCA-IgA、EA-IgA、Rta-IgG和IL-6有助于鼻咽癌的患病风险评估。
关键词：鼻咽癌；血清抗体；IL-6
鼻咽癌是我国广东高发的头颈部恶性肿瘤之一，其发生与遗传、环境因素及EB病毒感染有关。在鼻咽癌细胞里存在EB病毒基因组，而且存在多种EB病毒特异性抗原.检测鼻咽癌患者血清中相关抗体水平对NPC的诊断有重要意义。利用EB病毒（EBV）刺激鼻咽癌和EB病毒（EBV）阳性正常人，检测其EB病毒（EBV）抗体，本项目选择VCA-IgA、EA-IgA、Rta-IgG和IL-6检测，评价这些指标检测判定鼻咽癌的患病风险。
1 材料与方法
1.1 一般资料
2015年1月至2017年1月在潮州人民医院临床病理确诊的鼻咽癌VCA-IgA阳性者（临床I期50份，临床II 50份，临床Ⅲ期50份，临床Ⅳ期50份）患者全血；及50例健康体检人员全血（VCA-IgA阴性者）。按中国鼻咽癌2008临床ＴＮＭ分期法进行分期。本研究得到医学伦理委员会的批准和受检者的知情同意。抽取每个研究对象4ml外周血，分离血清置于-70 ℃冷冻保存待检。
1.2 仪器与试剂
1.2.1 试剂
EBVVCA-IgA抗体、EA-IgA抗体采用德国欧蒙诊断试剂公司（Euroimmun）生产的 ELISA试剂盒；Rta/IgG抗体检测试剂盒由同昕生物技术（北京）有限公司提供；IL-6采用RD公司生产的ELISA试剂盒。
1.2.2 检测方法
按试剂盒说明书进行操作。临界值计算方法：cutoff（C.O）=0.05+阴性对照读数平均值（当阴性对照 ＜0.05时，按0.05算），结果以相对A值（rA值）表示。
１．3 统计学方法
应用SPSS19.0软件进行统计分析。３种抗体检出阳性率的比较用卡方检验，计量资料以（ ±ｓ）表示，两组间比较采用ｔ检验，多组间比较采用方差分析，抗体在不同临床分期中的阳性率比较采用行×列卡方线性趋势检验。P＜0.05为差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 各组中不同抗体的检测结果
NPC组IL-6的中位数和阳性率和VCA-IgA、EA-IgA、Rta-IgG的相对值，均高于对照组及健康对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。
2.2 不同临床分期患者的EBV检测结果比较
血清IL-6中阳性率及IL-6中位数水平随着临床分期的升高而增高，Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ 期之间比较差异有统计学意义（Ｐ＜0.05）。Ⅰ、Ⅱ期NPC患者的VCA-IgA和EA-IgA的相对表达水平明显低于Ⅲ、Ⅳ 期患者，差异有统计学意义（Ｐ＜0.05），但两阳性率在各期间比较差异统无计学意义（Ｐ＞0.05）。Rta-IgG的相对表达水平和阳性率Ⅰ、Ⅱ期明显低于Ⅲ、Ⅳ期（Ｐ值均 ＜０.０５）。
注：与Ⅰ期比较，*Ｐ＜0.05；与Ⅱ期比较，#Ｐ＜0.05
3 讨论
NPC是我国广东高发的恶性肿瘤。由于其病原发灶病变隐蔽，易漏诊、误诊，且临床症状不明显，不容易早期发现。国内外学者一直努力寻找有效的患病风险评估指标、诊断方法、预后评估手段。已有研究认为EB病毒（EBV）感染与鼻咽癌密切相关，其感染的细胞表达多种 EBV 特异性抗原，最常见包括早期抗原（EA）、壳抗原（VCA）、膜抗原（M A）和核抗原（EBNA）等[ 1]，其中针对病毒增殖性感染相关的VCA的相应抗体检测对鼻咽癌有高度的特异性。
NPC多发生于中老年人。EB-VCAIgA抗体阳性率自 21～30岁阶段开始升高，且随年龄的增高而增加，鼻咽癌高发年龄多在31～ 50岁之间，且渐有年轻化趋势。因此在鼻咽癌的高发地区，早期防癌筛查是十分有必要的。由于 EB-VCAIgA 具有较高的灵敏度，可作为筛查鼻咽癌的一个重要早期筛查检测指标，以利于鼻咽癌的早期发现、早期诊断、早期治疗。
同时，本研究发现临床分期越晚鼻咽癌患者血浆 IL-6中位水平和阳性率越高，提示血浆中IL-6含量与鼻咽癌分期相一致，与患者体内肿瘤负荷呈正相关。推测这可能是由肿瘤细胞刺激免疫反应，IL-6释放入外周血所致，因而随着病情的进展，血浆中IL-6含量也会出现相应的增加。该结果与侯雪等［2］的研究结果相似，
联合多种抗体检测已经受到越来越多的关注，多项研究认为EA/IgA+Rta/IgG+EBNA1/IgA可以显著提高特异度及阳性预测值，满足在血清学方法排除假阳性的需要。而为了早期发现鼻咽癌，有学者认为可以同时检测VCA/IgA、EA/IgA、Rta/IgG及EBNA1/IgA 四种抗体。抗立即早期抗原Rta/IgG抗体、抗早期抗原 EA/IgA 抗体、抗晚期抗原 VCA/IgA和抗潜伏期抗原 EBNA1/IgA 抗体联合检测可反映 EB 病毒溶解感染期及潜伏感染期的抗原表达，具有很好的互补作用，是鼻咽癌血清学诊断的合适联合指标[3，4]。
至今，尚无一个单一指标的检测对早期诊断鼻咽癌有理想的敏感性和特异性。因此，目前鼻咽癌血清学诊断倾向于多指标联合应用［5，6］。多抗体联合检测，本研究采用复合阳性判断的方法，在敏感度、特异度方面均有明显提高。三种联合抗体组合，VCA/IgA+Rta/IgG+EA/IgA组 合 的 敏 感 度（98.1%）较其它3种组合高，特异度为88.7%。多抗体联合检测，EA/IgA+Rta/IgG+IL-6可以显著提高特异度及阳性预测值，满足在血清学方法排除可疑鼻咽癌的需要。而为了早期发现鼻咽癌，则可以同时检测VCA/IgA、EA/IgA、Rta/IgG及IL-6 四种抗体。抗立即早期抗原Rta/IgG抗体、抗早期抗原 EA/IgA 抗体、抗晚期抗原VCA/IgA和IL-6联合检测可更大范围地反映EB 病毒溶解感染期及潜伏感染期的抗原表达，具有很好的互补作用，是鼻咽癌血清学诊断的合适组合大样本人群前瞻性血清学筛查研究也确定了 EB 病毒抗体血清标志物和鼻咽癌发病风险之间的密切关系：随着EBV 抗体VCA/IgA 滴度的增高，以及 VCA/IgA 和EA/IgA双阳性，均会增加患鼻咽癌的风险。提示EBV 抗体滴度和鼻咽癌发病风险之间存在相关性。
综上所述，本研究认为联合检测各项指标有互补作用，可以提高鼻咽癌的诊断效率，提高准确度，减少误诊和漏诊率。ＥＢＶ抗体在早期鼻咽癌表达水平相对较低，随着分期升高而升高，IL-6是反映肿瘤免疫情况灵敏可靠的指标，可用于协助鼻咽癌诊断、协助判断分期评估。用 ELISA法检测EBV抗体用于鼻咽癌的血清学诊断和筛查，VCA-IgA与EA-D-IgG 联合检测优于VCAIgA与EA-D-IgA 联合检测，前者更适用于对鼻咽癌的筛查，可采用平行试验来提高诊断的敏感性和阴性预测值，降低漏诊率，提高对鼻咽癌血清学诊断和筛查的价值。
参考文献：
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论文作者:陈伟忠,莫焕桐
论文发表刊物:《中国误诊学杂志》2017年第9期
论文发表时间:2017/8/9
标签：鼻咽癌论文; 抗体论文; 抗原论文; 血清学论文; 血清论文; 病毒论文; 阳性率论文; 《中国误诊学杂志》2017年第9期论文;