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摘要用邻二氮菲分光光度法测定了当归、红花、枸杞3种中药微量元素铁的含量。将中药消化后配制成溶液,在pH=4~6下,用盐酸羟胺将三价铁还原成二价铁。二价铁再与邻二氮菲生成桔红色络合物。在波长510nm 处用分光光度法来测定各样品的吸光度A,求出样品中微量元素铁的含量。
关键词 铁;中药;分光光度法
引言
人体是由60多种元素所组成。根据元素在人体内的含量不同,可分为宏量元素和微量元素两大类。凡是占人体总重量的0.01%以上的元素,如碳、氢、氧等,称为宏量元素;凡是占人体总重量的0.01%以下的元素,如铁、锌、铜、等,称为微量元素。微量元素在人体内的含量真是微乎其微。量元素虽然在人体内的含量不多,但与人的生存和健康息息相关。它们的摄入过量、不足、或缺乏都会不同程度地引起人体生理的异常或发生疾病。
微量元素中的铁元素在人体内含量较多,它是人体许多生理过程中不可缺少的物质。铁在体内参与重要的生理功能,它是血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素以及某些呼吸酶的成分,参与体内氧与二氧化碳的转运、交换和组织呼吸过程,促进脂类在血液中的转运等。国外曾有报道:机体内含铁、铜、锌总量减少,均可减弱免疫机制(抵抗疾病力量),降低抗病能力,助长细菌感染,而且感染后的死亡率亦较高。
本文选用了当归、红花、枸杞3种中药,运用邻二氮菲分光光度法对这3种中药中铁含量进行了测定,对微量元素铁的含量以及中药疗效的相关性进行了初步讨论,为进一步研究有关微量元素的存在形态、药理机制等提供参考。
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
仪器:(1) 721分光光度计(上海精密仪器有限公司);
(2) GR-200型电子分析天平 (广州市艾安得仪器有限公司);
(3) 烘箱 (中国重义实验设备厂);
(4) F117型中药粉碎机 (天津市泰斯特仪器有限公司)。
药品:当归、红花、枸杞,均为市售。
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试剂:(1) 10μg/mL铁标液;
(2) 10%盐酸羟胺(临用时配制);
(3) 0.15%邻二氮菲(临用时配制,应用少许浓盐酸溶解,再用去离子水稀释);
(4) 1 mol/L NaAc溶液;
(5) 浓HNO3、HC1O4均为优级纯;
(6) 0.1mol/L氢氧化钠溶液。
1.2 实验方法
1.2.1 样品处理
样品干燥至恒质量后研碎,搅拌均匀。准确称取1.0000g,于25 mL锥形瓶中,加HNO3 20 mL,HC1O45mL于电热板上消化,至溶液呈无色透明,近干为止。冷却后转移至25 mL容量瓶中,用NaOH溶液调pH为4~6,加去离子水到刻度,摇匀备用。
1.2.2 选取最大吸收波长
准确吸取10μg/mL铁标准溶液0.00、4.00 mL依次加入到50m1的容量瓶中,再分别依次加入10%盐酸羟胺1 mL、1 mol/L NaAc溶液5 mL及0.15%邻二氮菲2 mL,每加入一种试剂都要摇匀,加去离子水到刻度线,静置约10 min,以未加铁试剂溶液的作为参比溶液,在450~540nm之间,每隔5nm测一次吸光度A,在500~520nm之间,每隔2nm测一次吸光度A,可测得铁的最大吸收波长为510nm。
1.2.3 标准曲线的绘制
10μg/mL铁标准溶液配制:准确称取0.0702 g六水硫酸亚铁铵,置于烧杯中,用去离子水溶解,转移到100mL容量瓶中,用去离子水稀释到刻度、摇匀,然后从中吸取5m1溶液于50mL容量瓶中,用去离子水稀释到刻度,摇匀。准确吸取10μg/mL铁标液0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00 mL依次加入到50mL的容量瓶中,再分别依次加入10%盐酸羟胺1mL、1mol/LNaAc溶液5m1及0.15%邻二氮菲2m1,每加入一种试剂都要摇匀,加去离子水到刻度线,静置约10min,以0.00 mL的作为参比溶液,在峰值波长510nm处测量溶液的吸光度A。做铁标准曲线图,在测量范围内线性关系良好(r=0.9967),并计算出回归方程为:A=0.0206C+0.0006,相关系数r=0.9985。
1.2.4 样品测定
准确吸取中草药的储备液各5mL,分别置于50mL容量瓶,再分别依次加人10%盐酸经胺1mL,1mol/L NaAc溶液5mL及0.15%邻二氮菲2mL,每加入一种试剂后都要充分混匀,加去离子水至刻度,摇匀,静置10 min后用紫外分光光度计在510nm波长处以0.00mL铁标液为空白进行参比,测定各样品的吸光度,并通过标准曲线回归方程求出各样品中铁的含量。
2 结果与分析
邻二氮菲分光光度法测定当归、红花、枸杞3种中药微量元素铁的含量,结果如下:
枸杞 含量0.1085±0.0006(mg /g) 当归 含量0.2650±0.0006(mg /g)
红花 含量0.0785±0.0006(mg /g)
测量结果表明:不同种类的中草药的微量元素铁含量有所不同,但这3种中药微量元素含铁相当丰富,含量由高到低顺序为:当归 > 枸杞 > 红花。其中当归含铁量最为丰富为0.2650±0.0006 mg /g。
3 讨论
铁是人体必需的微量元素之一,也是体内含量最高的微量元素。缺铁影响蛋白及去氧核糖核酸的合成,影响造血功能、无机盐及维生素代谢,缺铁还使中性自细胞的杀菌能力降低,淋巴细胞功能受损,还有研究表明铁还参与基因表达调控。因此当人体内铁含量不足将会引起一系列疾病。
本方法测定中药中铁的含量,方法简便、灵敏度高、准确性好。本研究运用邻二氮菲分光光度法测定了当归、红花、枸杞3种中药中铁元素的含量,为中药开发和应用提供了科学的依据。
参考文献
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论文作者:杨博 刘李欢
论文发表刊物:《科技新时代》2018年6期
论文发表时间:2018/8/10
标签:溶液论文; 微量元素论文; 含量论文; 光度论文; 当归论文; 中药论文; 枸杞论文; 《科技新时代》2018年6期论文;